FLAG® 純化
FLAG®標籤能對重組融合蛋白進行優異的檢測和穩健的純化，在從結合和活性檢測到結構分析的眾多下游應用中具有經證實的效用。FLAG® 表位標籤是一種短小、親水、8 位胺基酸的縮氨酸 (DYKDDDDK 標籤)，很容易被腸激酶 (EK) 裂解。由於其尺寸小且具親水性，FLAG® 標籤通常位於融合蛋白的表面，可將對融合蛋白的功能、分泌或傳輸的影響降至最低。無論您的最終應用為何，我們都能提供您表達、純化和檢測 FLAG® 融合蛋白所需的工具。
產品
FLAG® 標記蛋白質純化
我們提供各種瓊脂糖親和純化凝膠、磁珠、純化套件和塗佈板，用於分離和純化 FLAG® 標記蛋白。
- 琼脂糖親和凝膠 使用交聯到珠狀琼脂糖上的抗FLAG® 抗體實現融合標記蛋白質的純化，適用於小規模到大規模的純化，這些樹脂適用於重力流柱純化。
- Anti-FLAG® M2磁珠 用於純化重組融合標記蛋白，使用磁性架或平台分離磁珠，分離蛋白進行快速處理。
- Anti-FLAG® High Sensitivity M2-coated 96-well plates are suitable for expression screening, the study of protein-protein interactions, and ELISA assays.
FLAG® 抗體選擇指南
| 小鼠製造的單克隆抗FLAG® 小鼠製造的M1抗體 | 單株抗體anti-FLAG? M2 小鼠製備的抗體 | Monoclonal anti-FLAG®<小鼠製備的單克隆抗FLAG® M5抗體 | |||
|---|---|---|---|---|---|
| 目錄編號 | F3040 | F1804 | F3165< | F3165 | F4042 |
| 克隆 | Clone | M1 | M2 | M2 | M5 |
| 形態 | 緩衝水溶液 | 緩衝甘油水溶液（不含疊氮化鈉） | 緩衝水溶液（含疊氮化鈉） | 緩衝水溶液 | |
| 免疫原序列 | DYKDDDDK | DYKDDDDK | DYKDDDDK< | DYKDDDDK | |
| 抗體純化方法< | 在蛋白A Sepharose上純化 | 在專利FLAG®上純化 多肽-琼脂糖 | 在蛋白質A Sepharose上提純 | 在蛋白質A Sepharose上提純 | |
| KD | 53。4 nM | 9.3 nM | 9.3 nM | 不可用 | |
| Specificity | 高度特異性。僅識別 FLAG® epitope 位於游離 N--terminus 時。 | 可識別 FLAG® 序列位於 N-端、Met-N-端、 C-端或 FLAG® 融合蛋白的任何內部位點。 | 強力辨識 Met-N FLAG® 融合蛋白。與 N 端或 C 端融合蛋白的結合較弱。 | ||
| Sensitivity | 在點印圖上檢測 1 ng FLAG-BAP™ 融合蛋白 | 在點印圖上檢測 2 ng 蛋白質 | 在點印圖上檢測 <1 ng Met-FLAG® fusion 蛋白質 | ||
| Recommended for： | 建議用於檢測哺乳動物、植物和細菌表達系統中的 FLAG® 融合蛋白。對親和純化非常有用。 | colspan="2">Western blot 檢測在 E. | Western印跡檢測在哺乳動物和嗜酸乳動物細胞裂解液上表達的目標蛋白質。特別適用於檢測細胞質表達的 Met-FLAG 融合蛋白。不建議用於檢測在 E.大腸桿菌 | ||
| Applications* | IP, IC, WB, EIA | IP, IC, WB, EIA | IP、IC、WB、EIA | WB | |
| Special requirements | 結合需要鈣。(複合物在缺乏鈣離子時會解離) | N/A | N/A | N/A | |
FLAG® 抗體結合特性
Antibody & binding characteristics | ANTI-FLAG M1 | ANTI-FLAG M2 小鼠 IgG1 MAb | ANTI-FLAG |
|---|---|---|---|
| 未加工的N-末端FLAG融合蛋白： 訊號肽 - FLAG - 蛋白質 | - | + | 未確定 |
| Met-N-末端 FLAG 融合蛋白： Met - FLAG -蛋白 | - | + | ++ |
| N-末端 FLAG 融合蛋白： FLAG - 蛋白質 | + | + | 弱 |
| 內含 FLAG 多肽： 蛋白 - FLAG - 蛋白 | - | + | 未確定 |
| C-末端 FLAG 融合蛋白： 蛋白 - FLAG | - | + | 弱 |
| 鈣依賴性結合 (複合物在含 EDTA 的緩衝液中解離) | + | - | - |
相關資源
- Brochure: Refine Protein Preparation
Today, researchers are challenged to create high quality samples for meaningful protein analysis, often using cumbersome traditional sample preparation methods. With over 50 years of experience in developing protein sample preparation technologies, Merck is constantly innovating new tools to offer you rapid and efficient solutions that can be smoothly integrated into your workflow.
- User Guide: FLAG - Proven System for Detection and Purification of Proteins
The FLAG Expression System is an established way to express, purify, and detect recombinant fusion proteins. FLAG and 3×FLAG® have proven utility in numerous applications such as Western blotting, immunocytochemistry, immunoprecipitation, flow cytometry, protein purification, and in the study of protein-protein interactions, cell ultrastructure, and protein localization. These small hydrophilic tags facilitate superior detection and purification of recombinant fusion proteins when using our highly specific and sensitive ANTI-FLAG® antibodies.
- Application Note: EZview™ Red Protein A and ANTI-FLAG® M2 Affinity Gels - Immunoprecipitation with Enhanced Visibility Affinity Beads
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