Sắc ký khí (GC)

Giống như các hình thức sắc ký khác, GC liên quan đến một pha tĩnh và pha di động. Trong GC, pha di động là một khí trơ, thường là heli hoặc nitơ, và pha tĩnh là một chất hấp phụ rắn, được gọi là sắc ký khí rắn (GSC), hoặc một chất lỏng hấp thụ vào một hỗ trợ trơ, được gọi là sắc ký khí-lỏng (GLC, hoặc chỉ GC).

Sắc ký khí hoạt động như thế nào?

Sau khi thu thập và chuẩn bị mẫu, các chất được phân tích quan tâm được phân tách bên trong cột và sau đó máy dò đo số lượng các thành phần thoát khỏi cột. Trong GC, một chất được phân tích được tiêm vào cổng lấy mẫu của thiết bị và đi vào lò vi sóng nơi nó bị bốc hơi. Mẫu bay hơi được vận chuyển qua cột sắc ký bởi dòng khí trơ tạo thành pha di động. Các hợp chất trong phân vùng mẫu giữa pha tĩnh của cột và khí mang. Độ mạnh của tương tác pha tĩnh kết hợp xác định thời gian lưu giữ của chất được phân tích. Tại lối ra của cột, máy dò (MS hoặc không phải MS) tạo ra tín hiệu khi các hợp chất đi qua. Sắc ký là kết quả của sự phân tách GC.

Để đo nồng độ của mẫu xét nghiệm, mẫu tiêu chuẩn có nồng độ đã biết được tiêm vào thiết bị GC. Thời gian giữ và diện tích cao nhất của tiêu chuẩn được so sánh với kết quả của mẫu xét nghiệm để xác định nồng độ không xác định. Trong GC, các tiêu chuẩn bên ngoài và bên trong thường được sử dụng để đảm bảo định lượng đáng tin cậy của mẫu xét nghiệm. Khi các tiêu chuẩn đã biết được chạy riêng với mẫu quan tâm thực tế và phản ứng được so sánh với mẫu trong một sắc đồ khác, nó được gọi là tiêu chuẩn bên ngoài.  Khi tiêu chuẩn được thêm vào mẫu và phân tích đồng thời, nó được gọi là tiêu chuẩn nội bộ.

Thu thập và chuẩn bị mẫu cho phân tích GC

Nhiều mẫu có thể được phân tích bởi GC miễn là các hợp chất dễ bay hơi hợp lý (có thể được bay hơi) nhưng ổn định về nhiệt (không bị suy giảm ở nhiệt độ cao). Mẫu có thể được thu thập từ chất rắn, chất lỏng hoặc chất khí. Khi chuẩn bị mẫu cho GC, điều quan trọng là giảm thiểu độ phức tạp của mẫu vì chất lượng của mẫu ảnh hưởng đến độ chính xác và độ chính xác của kết quả sắc ký cuối cùng của bạn. Một loạt các kỹ thuật chuẩn bị mẫu cụ thể theo ma trận có sẵn để giúp cô lập và tập trung các chất được phân tích và ma trận mẫu trước khi phân tích GC.

Cách chọn cột GC

Cột GC là trung tâm của một hệ thống GC, nơi xảy ra sự phân tách sắc ký. Việc chọn cột GC thích hợp phải dựa trên 4 yếu tố đáng kể: Pha tĩnh, đường kính bên trong cột (ID), độ dày phim và chiều dài cột. Những yếu tố này ảnh hưởng đến hiệu quả cột, độ phân giải và dung lượng mẫu.

Nên chọn pha tĩnh dựa trên ứng dụng sẽ được thực hiện.