Kiểm nghiệm tính vô trùng

Các quy trình kiểm tra vô trùng được áp dụng cho các sản phẩm trong nhiều ngành công nghiệp, bao gồm các nhà sản xuất thực phẩm và đồ uống, nhưng các ngành chính là dược phẩm và y tế, nơi việc kiểm tra vô trùng sản phẩm vẫn là một nhiệm vụ quan trọng và thường xuyên đối với các nhà vi sinh học.

• Các phương pháp kiểm tra vô trùng trong dược phẩm
• Các phương pháp kiểm tra vô trùng cho thiết bị y tế
• Quy trình kiểm tra vô trùng

Phương pháp kiểm tra vô trùng trong dược phẩm

Các phương pháp chuẩn mực để kiểm tra độ vô trùng của các sản phẩm dược phẩm yêu cầu các mẫu phải được nuôi cấy trong hai môi trường riêng biệt. Hai loại môi trường nuôi cấy khác nhau được sử dụng trong kiểm tra vô trùng để thúc đẩy sự phát triển của vi khuẩn kỵ khí còn sót lại, cũng như vi khuẩn hiếu khí và nấm. Môi trường thioglycolate lỏng (FTM) thường được sử dụng để nuôi cấy vi khuẩn kỵ khí và một số vi khuẩn hiếu khí, trong khi môi trường tiêu hóa casein đậu nành (SCDM) thường được sử dụng để nuôi cấy nấm và vi khuẩn hiếu khí. Các mẫu được ủ trong 14 ngày ở nhiệt độ 32,5 °C và 22,5 °C trước khi kiểm tra. Bất kỳ sự đục nào trong môi trường nuôi cấy đều có thể cho thấy sự phát triển và phải được điều tra. Có hai phương pháp kiểm tra độ vô trùng được khuyến nghị cho dược phẩm: lọc màng và cấy trực tiếp.

Kiểm tra vô trùng bằng lọc màng

Kiểm tra vô trùng bằng lọc màng là phương pháp quy định được ưu tiên cho các sản phẩm dược phẩm có thể lọc được, như được trích dẫn trong USP <71>, Dược điển EU <2.6.1> và Dược điển Nhật Bản <4.06>. Các mẫu được đưa qua màng lọc 0,45 µm trong bình lọc và môi trường nuôi cấy được thêm vào để ủ. Phương pháp kiểm tra độ vô trùng này có thể mang lại độ nhạy cao hơn so với các phương pháp khác vì toàn bộ mẫu hoặc mẫu tổng hợp được đưa qua một màng lọc duy nhất. Lọc cũng tạo cơ hội rửa trôi các thành phần trong mẫu có thể gây đục hoặc ức chế sự phát triển, chẳng hạn như kháng sinh hoặc chất bảo quản.

Kiểm tra vô trùng bằng cách cấy trực tiếp

Trong phương pháp cấy trực tiếp, một thể tích nhỏ mẫu được lấy vô trùng từ đơn vị mẫu và cấy trực tiếp vào một thể tích thích hợp của môi trường nuôi cấy trước khi ủ. Mặc dù đơn giản, phương pháp kiểm tra này có thể có một số hạn chế đáng kể. Chỉ có thể cấy một lượng nhỏ sản phẩm vào môi trường nuôi cấy, làm hạn chế độ nhạy của thử nghiệm. Nếu mẫu có vẻ đục hoặc vẩn đục sau khi cấy, sẽ rất khó phát hiện độ đục do sự phát triển của vi sinh vật vào cuối thời gian ủ. Ngoài ra, nếu sản phẩm có đặc tính kháng khuẩn, mẫu phải được trung hòa để không ức chế sự phát triển của vi sinh vật.

Phương pháp kiểm tra vô trùng cho thiết bị y tế

Thử nghiệm vô trùng bằng phương pháp chuyển trực tiếp được khuyến nghị cho việc thử nghiệm vô trùng thiết bị y tế. Thiết bị cần thử nghiệm tiếp xúc trực tiếp với môi trường thử nghiệm trong suốt thời gian ủ, trong đó bất kỳ vi sinh vật nào trong hoặc trên thiết bị sẽ phát triển và nhân lên. Hơn nữa, thử nghiệm vô trùng bằng cách rửa sản phẩm được ưu tiên áp dụng cho các sản phẩm có ống rỗng, chẳng hạn như bộ truyền máu và bộ truyền dịch, trong đó đường dẫn chất lỏng được dán nhãn là vô trùng. Lumen của sản phẩm được rửa bằng chất lỏng rửa, dịch rửa được lọc qua màng và được đặt trong môi trường thích hợp để ủ.

Quy trình kiểm tra vô trùng

1. Chuẩn bị thử nghiệm — Đặt ống thiết bị lọc màng vào máy bơm

2. Làm ướt trước màng lọc — Làm ướt trước thiết bị lọc màng để tối ưu hóa quá trình lọc và giảm thiểu sự bám dính của sản phẩm vào màng lọc.

3. Lọc mẫu — Lọc một lượng sản phẩm bằng nhau vào cả hai bình chứa. Vi sinh vật được giữ lại bởi bộ lọc có kích thước lỗ 0,45 µm.

4. Rửa — Tất cả các hợp chất ức chế được rửa sạch bằng dung dịch rửa thích hợp.

5. Đổ môi trường nuôi cấy — Thiết bị lọc màng được đổ đầy môi trường nuôi cấy vô trùng TSB và FTM.

6. Thời gian ủ — 14 ngày.

7. Kết quả kiểm tra cuối cùng — Kiểm tra độ đục bằng mắt thường / không có độ đục.