[Direkt zum Inhalt](https://www.sigmaaldrich.com#main-content) [![Merck](https://www.sigmaaldrich.com/static/logos/purple/merck.svg)](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de) Produkte Warenkorb0 ATDE Produkte [Anmelden / Registrieren](https://www.sigmaaldrich.com/oidc-sign-in) [Bestellungssuche](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/order-lookup) [Schnelleinkauf](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/quick-order) Warenkorb0 [Startseite](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de)[Anwendungen](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/applications)[Genomik](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/applications/genomics)Klonierung & Expression # Klonierung & Expression ![Rekombinante Proteinexpression in Säugerzellen](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/applications/genomics/recombinant-protein-expression.jpg "Rekombinante Proteinexpression in Säugerzellen") __Rekombinante Proteinexpression in Säugerzellen__ Klonierungs- und Genexpressionstechnologien werden von Wissenschaftlern in verschiedenen Bereichen für zahlreiche biologische Fragestellungen eingesetzt, wie z.B. Aufklärung der Genfunktion, Analyse molekularer Signalwege, embryonale Entwicklung, Krankheitsforschung und Bioprocessing von Biologika und Therapeutika, um nur einige zu nennen. Nachdem das Gen oder die Gensequenz identifiziert wurde, müssen Wissenschaftler die beste molekulare Klonierungsstrategie und das beste zellbasierte Proteinexpressionssystem für die spezifischen Anwendungsanforderungen wählen. Weitere Informationen zur Genexpression unter Anwendung der CRISPR-Technologie oder zur Genstummschaltung mithilfe von RNAi-Reagenzien finden Sie auf unserer Webseite zu [Genexpression und Genstummschaltung](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/applications/genomics/gene-expression-and-silencing).   * * * ## Zugehörige Produkte Slide 1 of 17 1 of 4 [![X-GlcA reagent for selection of recombinant bacterial clones](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/structures/401/113/46d77bfc-a3b7-4d7b-b47d-5699c063454d/640/46d77bfc-a3b7-4d7b-b47d-5699c063454d.png) \ Sigma-Aldrich \ B6650 \ X-GlcA](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/sigma/b6650) Schnellansicht [![Blue-White Select™ Screening Reagent for selection of recombinant bacterial clones](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/106/579/ecdb7ef1-2040-43e2-9699-4f30fde34faa/640/ecdb7ef1-2040-43e2-9699-4f30fde34faa.jpg) \ Sigma-Aldrich \ B3928 \ Blue-White Select™ Screening Reagent](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/sigma/b3928) Schnellansicht [![5-Brom-4-Chlor-3-indolyl-β-D-Galactopyranosid ≥98%](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/structures/247/263/57654e94-ae59-485c-ae90-4a5da7fb51a9/640/57654e94-ae59-485c-ae90-4a5da7fb51a9.png) \ Sigma-Aldrich \ B9146 \ 5-Brom-4-Chlor-3-indolyl-β-D-Galactopyranosid](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/sigma/b9146) Schnellansicht [![Desoxyribonukleinsäure, einsträngig aus Lachshoden For hybridization](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/394/949/b2878be0-2c3c-481f-9eee-43eb6c27d386/640/b2878be0-2c3c-481f-9eee-43eb6c27d386.jpg) \ Sigma-Aldrich \ D9156 \ Desoxyribonukleinsäure, einsträngig aus Lachshoden](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/sigma/d9156) Schnellansicht [![Dimethylsulfoxid Molecular Biology](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/structures/351/937/4fba03cc-7107-47d4-8c4f-0193e7565d4d/640/4fba03cc-7107-47d4-8c4f-0193e7565d4d.png) \ Sigma-Aldrich \ D8418 \ Dimethylsulfoxid](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/sigma/d8418) Schnellansicht [![Yeast Transformation Kit reagents for introducing plasmid DNA into yeast](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/313/425/f658de66-8206-40b5-ab0b-417b15654a4f/640/f658de66-8206-40b5-ab0b-417b15654a4f.jpg) \ Sigma-Aldrich \ YEAST1 \ Yeast Transformation Kit](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/sigma/yeast1) Schnellansicht [![SOC-Medium For use in transformation](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/292/349/70b932fe-a654-484f-94ba-6225df0c97b9/640/70b932fe-a654-484f-94ba-6225df0c97b9.jpg) \ Sigma-Aldrich \ S1797 \ SOC-Medium](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/sigma/s1797) Schnellansicht [![LB-Bouillon mit Agar (Lennox) EZMix powder microbial growth medium](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/382/185/cc0c5161-cfc0-4e41-81fb-0fa32b75ea05/640/cc0c5161-cfc0-4e41-81fb-0fa32b75ea05.jpg) \ Sigma-Aldrich \ L7533 \ LB-Bouillon mit Agar (Lennox)](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/sigma/l7533) Schnellansicht [![IPTG ≥99% (TLC), ≤0.1% Dioxane](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/structures/149/921/f1edb4f0-5065-4a15-b45d-3dddbf7bbf2f/640/f1edb4f0-5065-4a15-b45d-3dddbf7bbf2f.png) \ Sigma-Aldrich \ I6758 \ IPTG](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/sial/i6758) Schnellansicht [![Roche](https://www.sigmaaldrich.com/assets/images/pdp-no-image-sq/pdp-no-image-sq_w640.png) \ Roche \ APAI-RO \ Apa I](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/roche/apairo) Schnellansicht [![Not I from Nocardia otitidis-caviarum](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/312/291/01db4d1f-c7d2-4169-ba85-9594823a6e1f/640/01db4d1f-c7d2-4169-ba85-9594823a6e1f.jpg) \ Roche \ NOTI-RO \ Not I](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/roche/notiro) Schnellansicht [![SuRE/Cut™ Buffer A pH 8.1-8.3 (37 °C), suitable for molecular cloning](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/352/091/ef743cea-ccd8-44f1-8f3b-dec5a1e4f5d1/640/ef743cea-ccd8-44f1-8f3b-dec5a1e4f5d1.jpg) \ Roche \ 11417959001 \ SuRE/Cut™ Buffer A](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/roche/11417959001) Schnellansicht [![Xba I from recombinant E.Coli](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/134/118/4b31ef78-2405-48bf-aa47-37116ef0bd4c/640/4b31ef78-2405-48bf-aa47-37116ef0bd4c.jpg) \ Roche \ XBAI-RO \ Xba I](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/roche/xbairo) Schnellansicht [![X-tremeGENE™ HP DNA-Transfektionsreagenz High-performance polymer reagent for transfecting many cell lines](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/692/303/5faf5dfd-8ee1-4e6a-a9e7-307f9550e79d/640/5faf5dfd-8ee1-4e6a-a9e7-307f9550e79d.jpg) \ Roche \ XTGHP-RO \ X-tremeGENE™ HP DNA-Transfektionsreagenz](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/roche/xtghpro) Schnellansicht [![X-tremeGENE™ 360 Transfektionsreagenz Universal polymer reagent for delivering DNA, siRNA, miRNA and CRISPR/RNP to many cell lines](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/674/981/75e1e62d-e14d-4679-bf08-7c061570067d/640/75e1e62d-e14d-4679-bf08-7c061570067d.jpg) \ Roche \ XTG360-RO \ X-tremeGENE™ 360 Transfektionsreagenz](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/roche/xtg360ro) Schnellansicht [![X-tremeGENE™ 9 DNA-Transfektionsreagenz Polymer reagent for transfecting common cell lines](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/389/482/88dc320e-930c-45e5-af64-e0d8b1895968/640/88dc320e-930c-45e5-af64-e0d8b1895968.jpg) \ Roche \ XTG9-RO \ X-tremeGENE™ 9 DNA-Transfektionsreagenz](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/roche/xtg9ro) Schnellansicht [![pSF-CMV-NEO-NH2-PPT-3XFLAG (plasmid vector for molecular cloning)](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/172/092/882627d4-30f4-4950-8e3b-acb21a6e893c/640/882627d4-30f4-4950-8e3b-acb21a6e893c.jpg) \ Sigma-Aldrich \ OGS626 \ pSF-CMV-NEO-NH2-PPT-3XFLAG](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/product/sigma/ogs626) Schnellansicht * * * ## Ausgewählte Kategorien [![Mit einem Thermometer wird die Temperatur einer klaren blassblauen Flüssigkeit in einem Glasgefäß gemessen.](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/categories/biochemistry/biological-buffer-solution-in-beaker.jpg "Biologische Puffer")](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/biological-buffers) [Biologische Puffer](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/biological-buffers) Unser umfangreiches Portfolio an hochreinen biologischen Puffern in verschiedenen Formulierungen und Verpackungsformaten bietet eine hervorragende Lösungsstabilität und pH-Kontrolle für Ihre Bioprozess-Workflow-Anwendungen. [Produkte anzeigen](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/biological-buffers) [![Nahaufnahme einer blau beleuchteten Laborumgebung. Im Fokus liegt ein kleines, leuchtendes rechteckiges Objekt, das rosarot leuchtet. Das Objekt liegt auf einem Gerät mit dunkler Oberfläche.](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/categories/biochemistry/agarose-lightbox.jpg "Agarose")](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/agarose) [Agarose](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/agarose) Wir bieten eine breite Auswahl an Agaroseprodukten mit unterschiedlichen Gelstärken, Schmelztemperaturen, Geliertemperaturen und Elektroendosmose(EEO)-Stärken für Ihre Forschungsanwendungen an. [Produkte anzeigen](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/agarose) * * * Überblick Zugehörige Artikel und Protokolle Unterstützung ## Proteinexpressionsvektoren Plasmide, oder Proteinexpressionsvektoren, sind zirkuläre DNA-Stücke, die zahlreiche funktionelle Elemente zur Klonierung und Expression des gesuchten Proteins enthalten. Die Auswahl des geeigneten Expressionsvektors wird zum Teil durch die Proteinart, den Organismus, der das Protein exprimieren wird sowie die spezifische Anwendung und die zu klärenden wissenschaftlichen Fragen bestimmt. Die Vielzahl an verfügbaren Expressionsvektoren ermöglicht es Wissenschaftlern, die am besten für ihre Studie geeigneten Klonierungs-, Klonselektions- und Proteinexpressionselemente zu wählen. Nach der Auswahl der Gensequenz von Interesse und des Expressionsvektors verwenden Wissenschaftler häufig Nukleasen, um den Vektor an spezifischen Stellen präzise zu schneiden, damit die gewählte Gensequenz im Leserahmen kloniert und schließlich in einem Wirtsorganismus exprimiert werden kann. Wichtig ist dabei, dass häufig chemisch kompetente Zellen und bakterielle Transformation eingesetzt werden, um die rekombinanten DNA-Plasmide aufzunehmen, da sie in gefrorenem Zustand bei -70 °C stabil sind. ## Transfektion von Zellen Zelltransfektion ist der Prozess des Einbringens von DNA, RNA oder Proteinen in eukaryotische Zellen. Wissenschaftlern stehen verschiedene physikalische, chemische und biologische Technologien zur Verfügung, um diesen Arbeitsschritt der Proteinexpression durchzuführen. Physikalische Methoden wie Elektroporation oder chemische Methoden wie Calciumphosphat (CaPi), Polyethylenimin (PEI) and Lipofektionsreagenzien werden häufig eingesetzt. Virale Transduktionssysteme, einschließlich lentiviraler, onkoretroviraler und adenoviraler Systeme, stehen ebenfalls zur Verfügung. Die Anwendung viraler Transportmethoden erfordert jedoch oftmals zusätzliche Eindämmungs- und Überwachungsmaßnahmen aus Gründen der biologischen Sicherheit. ## Proteinexpressionssysteme Wissenschaftler setzen verschiedene Organismen zur Expression des sie interessierenden Proteins ein. Bakterien werden häufig verwendet, da sie Expressionsvektoren effizient aufnehmen, kurze Verdopplungszeiten aufweisen und große Mengen rekombinanter Proteine unter optimalen Bedingungen produzieren können. Bakterien sind jedoch prokaryotische Organismen und daher nicht in der Lage, posttranslationale Proteinmodifikationen bereitzustellen, die manche Proteine erfordern. Eukaryotische Zellen, einschließlich Hefe- und Säugerzelllinien, erleichtern posttranslationale Proteinmodifikation und werden auch häufig von Wissenschaftlern verwendet. Die Auswahl der besten Zelllinie für die rekombinante Proteinexpression und der Proteinexpressionsstrategie hängt in hohem Maß von den spezifischen Anwendungsanforderungen und den zu klärenden wissenschaftlichen Fragen ab. [![Dokumentensuche](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/ecommerce/document-search.png "Dokumentensuche")](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) [Sie suchen genauere Informationen?](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) Besuchen Sie unsere Dokumentensuche, wo Sie Datenblätter, Zertifikate und technische Dokumentation finden. [Dokumentensuche](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) ## Zugehörige Artikel - [Restriction Endonucleases - The Molecular Scissors](https://www.sigmaaldrich.com/AT/en/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/restriction-endonucleases-the-molecular-scissors) The term “Restriction enzyme” originated from the studies of Enterobacteria phage λ (lambda phage) in the laboratories of Werner Arber and Matthew Meselson. - [Klonierung von Zielgenen in einen Plasmidvektor](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/restriction-enzyme-cloning-manual-cloning) Dieses Klonierungsprotokoll umfasst die Auswahl des Klonierungssystems und des Plasmidvektors, den Restriktionsverdau des Plasmids, den Restriktionsverdau des Fragments, das Ausschneiden von Gel (Gel-Exzision), die Dephosphorylierung der DNA und mehr. - [Introduction to Cell Transfection](https://www.sigmaaldrich.com/AT/en/technical-documents/technical-article/cell-culture-and-cell-culture-analysis/transfection-and-gene-editing/transfection-reagents) Transfection introduces genetic material into cells, aiding research in gene expression and cell biology. - [3xFLAG® System Expression Vectors for Ultra-Sens](https://www.sigmaaldrich.com/AT/en/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/3x-flag) The 3xFLAG system enhances fusion protein detection, offering improved sensitivity over traditional methods. - [SIG10 Chemically Competent Cells](https://www.sigmaaldrich.com/AT/en/technical-documents/protocol/genomics/cloning-and-expression/sig10-chemically-competent-cells) For best results, ligation reactions must be heat inactivated at 70º C for 15 minutes before transformation. Alternately, the reactions may be purified. - [Alle anzeigen (30)](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) ## Zugehörige Protokolle - [Protokoll Restriktionsenzymverdau](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/technical-documents/protocol/genomics/cloning-and-expression/restriction-enzyme-digest-protocol) Die Restriktionsenzymsammlung wurde für den Verdau mit fünf verschiedenen Puffern optimiert. - [pGEX-Vektoren](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/technical-documents/protocol/genomics/cloning-and-expression/pgex-vectors) Auf dieser Seite werden die Eigenschaften der pGEX-Expressionsvektoren beschrieben, die mit Cytiva-Produkten eingesetzt werden. - [DNA Ligation Protocol](https://www.sigmaaldrich.com/AT/en/technical-documents/protocol/genomics/cloning-and-expression/dna-ligation-kit) Cloning process, joining linear DNA into a vector, is crucial for biotechnological experiments, enabling DNA fragment recombinant technology. - [Competent Cell Protocols](https://www.sigmaaldrich.com/AT/en/technical-documents/protocol/cell-culture-and-cell-culture-analysis/microbial-cell-culture/competent-cells) Technical Article on competent cells. Transformation is a process by which some bacteria take up foreign genetic material (naked DNA) from the environment. - [Dephosphorylation Procedures for DNA and Proteins](https://www.sigmaaldrich.com/AT/en/technical-documents/protocol/genomics/cloning-and-expression/dephosphorylation) Dephosphorylation of DNA using Calf Intestinal Alkaline Phosphatase, Shrimp Alkaline Phospha, Bovine Intestinal Alkaline Phosphatase - [Alle anzeigen (33)](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) ### Mehr Artikel und Protokolle finden Suchbegriff eingeben Suchen ## Wie wir weiterhelfen können Sollten Sie Fragen haben, reichen Sie bitte eine [Anfrage beim Kundensupport](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/support/customer-support) ein oder sprechen Sie mit unserem Kundenservice: E-Mail [custserv@sial.com](mailto:custserv@sial.com) oder telefonisch unter +1 (800) 244-1173 ## Weitere Unterstützung - [Rechner & Apps](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/support/calculators-and-apps) Web-Toolbox - wissenschaftliche Forschungstools und Informationsquellen für die Bereiche analytische Chemie, Life Science, chemische Synthese und Materialwissenschaft. - [Customer Support Request](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/support/customer-support) Customer support including help with orders, products, accounts, and website technical issues. - [FAQ](https://maestro.my.site.com/knowledgeportal/s/) Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services. * * * __Empfohlene Artikel__ [Blau-Weiß-Screening und Protokolle für die Kolonieauswahl](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/blue-white-screening) In diesem Beitrag erhalten Sie Informationen und Protokolle für das Blau-Weiß-Screening, das in der molekularbiologischen Forschung verwendet wird, um rekombinante bakterielle Klone für weitere Analysen zu identifizieren. [Restriction Endonucleases - The Molecular Scissors](https://www.sigmaaldrich.com/AT/en/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/restriction-endonucleases-the-molecular-scissors) The term “Restriction enzyme” originated from the studies of Enterobacteria phage λ (lambda phage) in the laboratories of Werner Arber and Matthew Meselson. [Protokolle zur Bakterientransformation](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/competent-cells) Allgemeine Protokolle zum Wachstum kompetenter Zellen und ihrer Transformation (Aufnahme von DNA). [T7-Promoter-System](https://www.sigmaaldrich.com/AT/de/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/t7-promoter-system) Bakterielle Expressionsvektoren: T7-Promoter-System. T7-Vektoren für höchste Expressionsniveaus in Bakterien. Oben __Melden Sie sich an, um fortzufahren.__ Um weiterzulesen, melden Sie sich bitte an oder erstellen ein Konto. 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