[コンテンツへスキップ](https://www.sigmaaldrich.com#main-content) [![Merck](https://www.sigmaaldrich.com/static/logos/purple/merck.svg)](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja) 製品 カート0 JPJA 製品 [ログイン / 登録](https://www.sigmaaldrich.com/oidc-sign-in) [注文検索](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/order-lookup) [クイックオーダー](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/quick-order) カート0 [ホーム](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja)Applications[ゲノミクス](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/applications/genomics)クローニング・発現 # クローニング・発現 ![哺乳類細胞中の組換えタンパク質発現](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/applications/genomics/recombinant-protein-expression.jpg "哺乳類細胞中の組換えタンパク質発現") __哺乳類細胞中の組換えタンパク質発現__ クローニングおよび遺伝子発現技術は、遺伝子機能の理解、分子経路分析、胚発生、疾患研究、生物学的および治療法のバイオプロセシングなど、さまざまな分野の研究者が幅広い生物学的問題を調査するために使用されています。遺伝子または遺伝子配列が特定されたら、研究者は特定のアプリケーションのニーズに基づいて、最良のモレキュラークローニング戦略と細胞ベースのタンパク質発現システムを選択する必要があります。CRISPR技術を用いた遺伝子発現、RNAi試薬を用いた遺伝子サイレンシングに関する追加情報については、[遺伝子発現および遺伝子サイレンシングのページ](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/applications/genomics/gene-expression-and-silencing)をご覧ください。   * * * ## 関連製品 Slide 1 of 17 1 of 4 [![X-GlcA reagent for selection of recombinant bacterial clones](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/structures/401/113/46d77bfc-a3b7-4d7b-b47d-5699c063454d/640/46d77bfc-a3b7-4d7b-b47d-5699c063454d.png) \ Sigma-Aldrich \ B6650 \ X-GlcA](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/sigma/b6650) クイックビュー [![Blue-White Select™スクリーニング試薬 for selection of recombinant bacterial clones](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/106/579/ecdb7ef1-2040-43e2-9699-4f30fde34faa/640/ecdb7ef1-2040-43e2-9699-4f30fde34faa.jpg) \ Sigma-Aldrich \ B3928 \ Blue-White Select™スクリーニング試薬](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/sigma/b3928) クイックビュー [![5-ブロモ-4-クロロ-3-インドリル β-D-ガラクトピラノシド ≥98%](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/structures/247/263/57654e94-ae59-485c-ae90-4a5da7fb51a9/640/57654e94-ae59-485c-ae90-4a5da7fb51a9.png) \ Sigma-Aldrich \ B9146 \ 5-ブロモ-4-クロロ-3-インドリル β-D-ガラクトピラノシド](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/sigma/b9146) クイックビュー [![デオキシリボ核酸, 一本鎖 サケ精巣由来 For hybridization](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/394/949/b2878be0-2c3c-481f-9eee-43eb6c27d386/640/b2878be0-2c3c-481f-9eee-43eb6c27d386.jpg) \ Sigma-Aldrich \ D9156 \ デオキシリボ核酸, 一本鎖 サケ精巣由来](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/sigma/d9156) クイックビュー [![ジメチルスルホキシド Molecular Biology](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/structures/351/937/4fba03cc-7107-47d4-8c4f-0193e7565d4d/640/4fba03cc-7107-47d4-8c4f-0193e7565d4d.png) \ Sigma-Aldrich \ D8418 \ ジメチルスルホキシド](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/sigma/d8418) クイックビュー [![酵母トランスフェクションキット reagents for introducing plasmid DNA into yeast](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/313/425/f658de66-8206-40b5-ab0b-417b15654a4f/640/f658de66-8206-40b5-ab0b-417b15654a4f.jpg) \ Sigma-Aldrich \ YEAST1 \ 酵母トランスフェクションキット](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/sigma/yeast1) クイックビュー [![SOC培地 For use in transformation](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/292/349/70b932fe-a654-484f-94ba-6225df0c97b9/640/70b932fe-a654-484f-94ba-6225df0c97b9.jpg) \ Sigma-Aldrich \ S1797 \ SOC培地](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/sigma/s1797) クイックビュー [![寒天入りLB培地（Lennox） EZMix powder microbial growth medium](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/382/185/cc0c5161-cfc0-4e41-81fb-0fa32b75ea05/640/cc0c5161-cfc0-4e41-81fb-0fa32b75ea05.jpg) \ Sigma-Aldrich \ L7533 \ 寒天入りLB培地（Lennox）](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/sigma/l7533) クイックビュー [![IPTG ≥99% (TLC), ≤0.1% Dioxane](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/structures/149/921/f1edb4f0-5065-4a15-b45d-3dddbf7bbf2f/640/f1edb4f0-5065-4a15-b45d-3dddbf7bbf2f.png) \ Sigma-Aldrich \ I6758 \ IPTG](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/sial/i6758) クイックビュー [![Roche](https://www.sigmaaldrich.com/assets/images/pdp-no-image-sq/pdp-no-image-sq_w640.png) \ Roche \ APAI-RO \ Apa I](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/roche/apairo) クイックビュー [![Not I from Nocardia otitidis-caviarum](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/312/291/01db4d1f-c7d2-4169-ba85-9594823a6e1f/640/01db4d1f-c7d2-4169-ba85-9594823a6e1f.jpg) \ Roche \ NOTI-RO \ Not I](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/roche/notiro) クイックビュー [![SuRE/Cut™バッファーA pH 8.1-8.3 (37 °C), suitable for molecular cloning](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/352/091/ef743cea-ccd8-44f1-8f3b-dec5a1e4f5d1/640/ef743cea-ccd8-44f1-8f3b-dec5a1e4f5d1.jpg) \ Roche \ 11417959001 \ SuRE/Cut™バッファーA](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/roche/11417959001) クイックビュー [![Xba I from recombinant E.Coli](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/134/118/4b31ef78-2405-48bf-aa47-37116ef0bd4c/640/4b31ef78-2405-48bf-aa47-37116ef0bd4c.jpg) \ Roche \ XBAI-RO \ Xba I](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/roche/xbairo) クイックビュー [![X-tremeGENE™ HP DNA トランスフェクション試薬 High-performance polymer reagent for transfecting many cell lines](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/692/303/5faf5dfd-8ee1-4e6a-a9e7-307f9550e79d/640/5faf5dfd-8ee1-4e6a-a9e7-307f9550e79d.jpg) \ Roche \ XTGHP-RO \ X-tremeGENE™ HP DNA トランスフェクション試薬](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/roche/xtghpro) クイックビュー [![X-tremeGENE™ 360トランスフェクション試薬 Universal polymer reagent for delivering DNA, siRNA, miRNA and CRISPR/RNP to many cell lines](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/674/981/75e1e62d-e14d-4679-bf08-7c061570067d/640/75e1e62d-e14d-4679-bf08-7c061570067d.jpg) \ Roche \ XTG360-RO \ X-tremeGENE™ 360トランスフェクション試薬](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/roche/xtg360ro) クイックビュー [![X-tremeGENE™ 9 DNAトランスフェクション試薬 Polymer reagent for transfecting common cell lines](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/389/482/88dc320e-930c-45e5-af64-e0d8b1895968/640/88dc320e-930c-45e5-af64-e0d8b1895968.jpg) \ Roche \ XTG9-RO \ X-tremeGENE™ 9 DNAトランスフェクション試薬](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/roche/xtg9ro) クイックビュー [![pSF-CMV-NEO-NH2-PPT-3XFLAG (plasmid vector for molecular cloning)](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/172/092/882627d4-30f4-4950-8e3b-acb21a6e893c/640/882627d4-30f4-4950-8e3b-acb21a6e893c.jpg) \ Sigma-Aldrich \ OGS626 \ pSF-CMV-NEO-NH2-PPT-3XFLAG](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/product/sigma/ogs626) クイックビュー * * * ## 注目のカテゴリー [![ガラス容器に入っている青く澄んだ液体の温度を温度計で測定している。](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/categories/biochemistry/biological-buffer-solution-in-beaker.jpg "生化学用バッファー")](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/biological-buffers) [生化学用バッファー](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/biological-buffers) さまざまな組成および包装形態の高純度な生物学的バッファーの幅広いポートフォリオにより、お客様のバイオプロセスワークフローの用途全体に適した、優れた溶液安定性とpHコントロールを提供します。 [対象製品はこちら](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/biological-buffers) [![青色ライトの実験環境のクローズアップ画像。ピンク色がかった赤色の光を放つ小さな四角い物体に焦点が合っている。物体は、別の機器の暗い表面の上に置かれている。](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/categories/biochemistry/agarose-lightbox.jpg "アガロース")](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/agarose) [アガロース](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/agarose) 試験研究をサポートするために、さまざまなゲル強度、溶解温度、ゲル化温度、電気浸透（EEO）レベルの幅広いアガロース製品を提供しています。 [対象製品はこちら](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/agarose) * * * 概要 関連資料・プロトコル サポート ## タンパク質発現ベクター プラスミド、つまりタンパク質発現ベクターは、標的タンパク質のクローニングおよび発現のための多くの機能的要素を含む環状DNA断片です。適切な発現ベクターの選択は、タンパク質の種類、タンパク質を発現する生物、および研究者が取り組むことを目的とする特定のアプリケーションと科学的検証によって部分的に決定されます。多様な発現ベクターが利用可能であることにより、研究者は、どのクローニング、クローン選択、タンパク質発現要素が研究に最良であるかを選択することができます。標的遺伝子配列および発現ベクターを選択した場合、研究者は通常、ヌクレアーゼを用いて特定の部位で正確にベクターを切断し、標的遺伝子配列をインフレームでクローニングして、最終的に宿主生物で発現できるようにします。重要なこととして、研究者は一般に、組換えDNAプラスミドを導入するために化学的コンピテントセルおよび細菌形質転換を使用します。－70℃で凍結保存した場合に安定しているためです。 ## 細胞トランスフェクション方法 細胞トランスフェクションは、DNAまたはRNAまたはタンパク質を真核細胞に導入するプロセスのことです。研究者は、タンパク質発現作業工程のこの部分を達成するために、多様な物理的、化学的、生物学的技術を利用できます。エレクトロポレーションなどの物理的方法、またはリン酸カルシウム（CaPi）、ポリエチレンイミン（PEI）、リポフェクション試薬などの化学的方法はすべて、一般的な手法です。レンチウイルス、オンコレトロウイルス、アデノウイルスなどのウイルス導入システムも、利用可能です。しかし、ウイルス送達法を用いるには、しばしば、バイオセーフティの理由から、さらなる生物学的封じ込めとモニタリングが必要になります。 ## タンパク質発現系 さまざまな生物が、標的タンパク質の発現のために研究者に使用されています。細菌は、発現ベクターを効率的に取り込み、倍加時間が短く、最適条件下で大量の組換えタンパク質を生成できるため、よく利用されます。しかし、細菌は原核生物なので、一部のタンパク質が必要とするタンパク質翻訳後修飾を提供することができません。酵母や哺乳類細胞株などの真核細胞は、タンパク質翻訳後修飾を促進することを目的として一般的に用いられています。組換えタンパク質発現のための最良の細胞株およびタンパク質発現戦略の選択は、具体的なアプリケーションニーズと、科学者が解明しようとする疑問に強く依存します。 [![文書の検索](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/ecommerce/document-search.png "文書の検索")](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) [詳細はこちら](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) データシート、証明書、技術文書については、文書の検索をご利用ください。 [文書の検索](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) ## 関連資料 - [制限エンドヌクレアーゼ - 分子のハサミ](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/restriction-endonucleases-the-molecular-scissors) 「制限酵素」という用語は、ヴェルナー・アーバーとマシュー・メセルソンの研究所で行われた腸内細菌ファージλ（ラムダファージ）の研究に由来しています。 - [プラスミドベクターへの標的遺伝子のクローニング](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/restriction-enzyme-cloning-manual-cloning) このクローニングプロトコルには、クローニングシステムおよびプラスミドベクターの選択、プラスミドの制限酵素消化、フラグメントの制限酵素消化、ゲル抽出、DNA脱リン酸化その他が含まれています。 - [細胞へのトランスフェクション入門](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/technical-documents/technical-article/cell-culture-and-cell-culture-analysis/transfection-and-gene-editing/transfection-reagents) トランスフェクションは、遺伝子を細胞に導入して、遺伝子発現や細胞生物学の研究に役立ちます。 - [超高感度検出のための3xFLAG®システム発現ベクター](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/3x-flag) 3xFLAGシステムは、融合タンパク質の検出を強化して、従来法を上回る感度を実現します。 - [SIG10 Chemically Competent Cells](https://www.sigmaaldrich.com/JP/en/technical-documents/protocol/genomics/cloning-and-expression/sig10-chemically-competent-cells) For best results, ligation reactions must be heat inactivated at 70º C for 15 minutes before transformation. Alternately, the reactions may be purified. - [すべて表示 (44)](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) ## 関連プロトコル - [pGEX Vectors](https://www.sigmaaldrich.com/JP/en/technical-documents/protocol/genomics/cloning-and-expression/pgex-vectors) This page describes the characteristics of pGEX expression vectors used with Cytiva products. - [DNA Ligation Protocol](https://www.sigmaaldrich.com/JP/en/technical-documents/protocol/genomics/cloning-and-expression/dna-ligation-kit) Cloning process, joining linear DNA into a vector, is crucial for biotechnological experiments, enabling DNA fragment recombinant technology. - [Competent Cell Protocols](https://www.sigmaaldrich.com/JP/en/technical-documents/protocol/cell-culture-and-cell-culture-analysis/microbial-cell-culture/competent-cells) Technical Article on competent cells. Transformation is a process by which some bacteria take up foreign genetic material (naked DNA) from the environment. - [Dephosphorylation Procedures for DNA and Proteins](https://www.sigmaaldrich.com/JP/en/technical-documents/protocol/genomics/cloning-and-expression/dephosphorylation) Dephosphorylation of DNA using Calf Intestinal Alkaline Phosphatase, Shrimp Alkaline Phospha, Bovine Intestinal Alkaline Phosphatase - [すべて表示 (33)](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) ### 技術資料・プロトコルの検索 キーワードを入力 検索 ## お問い合わせ ご不明な点がございましたら、[お問い合わせページ](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/support/customer-support)をご覧いただくか 、テクニカルサービスまでお問い合わせください。 メール：[jpts@merckgroup.com](mailto:custserv@sial.com) 電話：03-6756-8245 ## サポート - [計算ツール・アプリ](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/support/calculators-and-apps) ウェブツールボックス－分析化学、ライフサイエンス、化学合成および材料科学のためのサイエンスリサーチツールとリソース - [Customer Support Request](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/support/customer-support) お問い合わせページでは、製品のお問い合わせや、注文や納期、お取引やアカウント、ウェブサイトに関するお問い合わせをお申込みいただけます。 - [FAQ](https://maestro.my.site.com/knowledgeportal/s/) Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services. * * * __注目の記事__ [コロニー選択のための青／白スクリーニングとそのプロトコル](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/blue-white-screening) さらなる解析のために、遺伝子組換え細菌コロニーを同定する分子生物学研究で用いられる青／白スクリーニング技法のプロトコルについて説明します。 [制限エンドヌクレアーゼ - 分子のハサミ](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/restriction-endonucleases-the-molecular-scissors) 「制限酵素」という用語は、ヴェルナー・アーバーとマシュー・メセルソンの研究所で行われた腸内細菌ファージλ（ラムダファージ）の研究に由来しています。 [細菌形質転換プロトコル](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/competent-cells) コンピテントセルの増殖とその形質転換（DNAの取込み）の一般的なプロトコル。 [T7 Promoter System](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/technical-documents/technical-article/genomics/cloning-and-expression/t7-promoter-system) Bacterial Expression Vectors: T7 Promoter System. T7 Vectors for Highest Expression Levels in Bacteria. TOP __ログインして続行__ 続きを確認するには、ログインするか、新規登録が必要です。 ログイン__アカウントをお持ちではありませんか？__お客様情報を登録 An unknown error has occured.