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[Accueil](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr)[Applications](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/applications)[Génomique](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/applications/genomics)qPCR
# qPCR

La PCR quantitative en temps réel (qPCR) utilise des molécules rapporteuses fluorescentes pour permettre la quantification des produits amplifiés. Comme dans la PCR classique, une matrice d'ADN, d'ADNc ou d'ARN est amplifiée, mais à chaque cycle, les signaux fluorescents sont surveillés afin de procéder à une quantification relative ou absolue.
Cette technique est utile dans de nombreux domaines de recherche, notamment l'analyse de l'expression génique, le génotypage, l'analyse des microARN, l'analyse des variations génétiques et l'analyse des protéines.
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## Produits associés
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Sigma-Aldrich
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STR1
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Enhanced Avian First Strand Synthesis Kit](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/product/sigma/str1)
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Roche
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RNAINH-RO
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Inhibiteur de RNases Protector](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/product/roche/rnainhro)
Aperçu rapide
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Sigma-Aldrich
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AMPD1
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DNase I](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/product/sigma/ampd1)
Aperçu rapide
[
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Sigma-Aldrich
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RDRT
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ReadyScript® cDNA Synthesis Mix](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/product/sigma/rdrt)
Aperçu rapide
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Roche
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FSUPMMRO
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Mélange maître FastStart Universal Probe (avec ROX™)](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/product/roche/fsupmmro)
Aperçu rapide
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Roche
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FSUSGMMRO
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Mélange maître SYBR Green universel FastStart (avec ROX™)](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/product/roche/fsusgmmro)
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Roche
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FSSGMMRO
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FastStart SYBR Green Master](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/product/roche/fssgmmro)
Aperçu rapide
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Roche
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FSTMPMMRO
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FastStart TaqMan® Probe Master](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/product/roche/fstmpmmro)
Aperçu rapide
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Roche
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EAGLETMMRO
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EagleTaq Universal Master Mix (ROX)](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/product/roche/eagletmmro)
Aperçu rapide
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## Catégories à la une
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[Réactifs et kits PCR](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/pcr-and-amplification/pcr-reagents-and-kits)
La réaction en chaîne par polymérase (PCR) est un pilier des laboratoires de biologie moléculaire. La PCR permet d'amplifier l'ADN de plusieurs ordres de grandeur, et nos réactifs et ressources sont adaptés à de nombreux protocoles de recherche, notamment l'analyse de l'expression génique, le génotypage, le séquençage et les applications de mutagenèse.
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[Clonage moléculaire et expression protéique](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/cloning-and-expression/molecular-cloning-and-protein-expression)
Méthodes et protocoles de clonage moléculaire et d'expression protéique permettant un clonage fiable et une expression protéique robuste à partir de vecteurs d'expression protéique issus d'insectes, de bactéries et de mammifères.
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[Épigénétique](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/epigenetics)
Réactifs et ressources épigénétiques destinés à l'étude des espèces d'ARN, de la méthylation de l'ADN, des modifications de la chromatine et des modifications des histones.
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[Microbiome](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/microbiome)
Analyse complète du microbiome intestinal : découvrez une solution globale couvrant la préparation des échantillons, le séquençage, la bio-informatique et les statistiques. Du séquençage 16S au séquençage du génome complet (WGS).
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Présentation générale
Articles et protocoles connexes
Assistance
## Comment analyser les données de qPCR
La fluorescence des molécules rapporteuses est mesurée et quantifiée ; il s’agit généralement soit de colorants (par exemple, SYBR® Green, bromure d’éthidium) qui s’intercalent entre les bases de l’ADN double brin, soit de sondes conçues pour se lier à une séquence spécifique (par exemple, les balises moléculaires, les sondes TaqMan®) sur l’ADN.
## Quantification relative des données de qPCR
Il existe deux grandes méthodes de quantification des données de qPCR. La quantification relative, qui est la méthode la plus courante, utilise les informations ΔΔCt, grâce auxquelles le rapport d’expression ou d’abondance du gène cible dans l’échantillon est déterminé par rapport à un gène témoin, puis normalisé par rapport au rapport d’expression d’un gène de référence. Étant donné que les valeurs d’efficacité E diffèrent entre le gène cible et le gène de référence, cette méthode tient également compte de ces différences. Cette méthode est plus fréquemment utilisée dans l’analyse de l’expression génique.
## Quantification absolue des données de qPCR
La deuxième méthode, la quantification absolue, est plus courante en microbiologie environnementale et utilise la courbe étalon (SC). La méthode de la courbe étalon utilise une série de dilutions d’une concentration connue en matrice, N0, pour établir une courbe étalon à partir de la régression linéaire entre log(N0) et le CT (cycle seuil). Celle-ci sert ensuite à calculer les concentrations en matrice de l’échantillon. Cette méthode repose sur l’hypothèse que la valeur d’efficacité de l’échantillon est identique à celle de l’étalon.
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## Articles connexes
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Après une PCR traditionnelle, l'analyse des données de la PCR/qPCR est effectuée par résolution à travers un gel d'agarose ou, plus récemment, à travers un capillaire.
- [Principes de base de la PCR quantitative](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/technical-documents/technical-article/genomics/qpcr/quantitative-pcr)
L'amplification en chaîne par polymérase en temps réel permet d'estimer la quantité de matériel de départ présente dans un échantillon. Elle présente une plage dynamique d'analyse bien plus large que la PCR classique.
- [PCR Assay Optimization and Validation](https://www.sigmaaldrich.com/FR/en/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/assay-optimization-and-validation)
PCR assay guide navigates you through primer validation and other assay optimization factors to ensure high sensitivity and specificity for optimum DNA/ RNA quantification.
- [PCR/qPCR/dPCR Assay Design](https://www.sigmaaldrich.com/FR/en/technical-documents/protocol/genomics/pcr/pcr-qpcr-dpcr-assay-design)
PCR workflow's variability influenced by sample source, reverse transcription, and assay design, impacting reproducibility.
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## Protocoles associés
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Notre protocole SYBR Green qPCR est une méthode conçue pour quantifier avec précision l'expression des gènes et les réactions RT-PCR.
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- [Tout afficher (29)](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search)
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Après une PCR traditionnelle, l'analyse des données de la PCR/qPCR est effectuée par résolution à travers un gel d'agarose ou, plus récemment, à travers un capillaire.
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L'amplification en chaîne par polymérase en temps réel permet d'estimer la quantité de matériel de départ présente dans un échantillon. Elle présente une plage dynamique d'analyse bien plus large que la PCR classique.
[RT-qPCR (PCR quantitative après transcription inverse)](https://www.sigmaaldrich.com/FR/fr/technical-documents/technical-article/genomics/qpcr/rt-qpcr)
La RT-qPCR, ou PCR quantitative après transcription inverse, combine les effets de la transcription inverse et de la PCR quantitative, ou PCR en temps réel, pour amplifier et détecter des cibles spécifiques. La RT-qPCR trouve de multiples applications, notamment dans la quantification du niveau d'expression génique, la validation de l'interférence par ARN ou la détection d'agents pathogènes comme les virus.
[How qPCR Works](https://www.sigmaaldrich.com/FR/en/technical-documents/technical-article/genomics/qpcr/how-qpcr-works)
Watch these videos to learn how real time or quantitative PCR (qPCR) works and the benefits of both the SYBR Green-based and probe-based methods of qPCR assay.
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