[Accéder au contenu](https://www.sigmaaldrich.com#main-content) [](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr) Produits Panier0 BEFR Produits [Connexion / S'inscrire](https://www.sigmaaldrich.com/oidc-sign-in) [Recherche de commande](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/order-lookup) [Commande rapide](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/quick-order) Panier0 [Accueil](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr)[Applications](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/applications)[Génomique](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/applications/genomics)PCR quantitative # PCR quantitative  La PCR quantitative en temps réel (qPCR) utilise des molécules rapporteuses fluorescentes pour permettre la quantification des produits amplifiés. Comme dans la PCR classique, une matrice d'ADN, d'ADNc ou d'ARN est amplifiée, mais à chaque cycle, des signaux fluorescents sont contrôlés pour une quantification relative ou absolue. Cette technique est utile dans de nombreux domaines de la recherche, notamment l'analyse de l'expression génique, du génotypage, des micro-ARN, des variations génétiques et des protéines. * * * ## Produits apparentés Slide 1 of 9 1 of 2 [ \ Sigma-Aldrich \ STR1 \ Enhanced Avian First Strand Synthesis Kit](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/product/sigma/str1) Aperçu rapide [ \ Roche \ RNAINH-RO \ Inhibiteur de RNases Protector](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/product/roche/rnainhro) Aperçu rapide [ \ Sigma-Aldrich \ AMPD1 \ DNase I](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/product/sigma/ampd1) Aperçu rapide [ \ Sigma-Aldrich \ RDRT \ ReadyScript® cDNA Synthesis Mix](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/product/sigma/rdrt) Aperçu rapide [ \ Roche \ FSUPMMRO \ Mélange maître FastStart Universal Probe (avec ROX™)](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/product/roche/fsupmmro) Aperçu rapide [ \ Roche \ FSUSGMMRO \ Mélange maître SYBR Green universel FastStart (avec ROX™)](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/product/roche/fsusgmmro) Aperçu rapide [ \ Roche \ FSSGMMRO \ FastStart SYBR Green Master](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/product/roche/fssgmmro) Aperçu rapide [ \ Roche \ FSTMPMMRO \ FastStart TaqMan® Probe Master](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/product/roche/fstmpmmro) Aperçu rapide [ \ Roche \ EAGLETMMRO \ EagleTaq Universal Master Mix (ROX)](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/product/roche/eagletmmro) Aperçu rapide * * * ## Catégories à la une [](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/pcr-and-amplification/pcr-reagents-and-kits) [Kits et réactifs pour PCR](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/pcr-and-amplification/pcr-reagents-and-kits) L'amplification en chaîne par polymérase (PCR) est un outil incontournable des laboratoires de biologie moléculaire. La PCR permet d'amplifier l'ADN de plusieurs ordres de grandeur. Nos ressources et réactifs sont adaptés à de nombreuses procédures de recherche dont les applications d'analyse de l'expression génique, de génotypage, de séquençage et de mutagenèse. [Commander maintenant](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/pcr-and-amplification/pcr-reagents-and-kits) [](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/cloning-and-expression/molecular-cloning-and-protein-expression) [Clonage moléculaire et expression protéique](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/cloning-and-expression/molecular-cloning-and-protein-expression) Méthodes et protocoles de clonage moléculaire et d'expression des protéines permettant un clonage fiable et une expression protéique robuste avec des vecteurs d'expression d'insectes, de bactéries et de mammifères. [Commander maintenant](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/cloning-and-expression/molecular-cloning-and-protein-expression) [](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/epigenetics) [Épigénétique](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/epigenetics) Ressources et réactifs d'épigénétique permettant d'étudier les espèces d'ARN, la méthylation de l'ADN, les modifications de la chromatine et les modifications des histones. [Commander maintenant](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/epigenetics) [](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/microbiome) [Microbiome](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/microbiome) Analyse complète du microbiome intestinal : découvrez une solution globale englobant la préparation des échantillons, le séquençage, la bio-informatique et les statistiques. De l'analyse de l'ARN 16S au séquençage du génome entier (WGS). [Commander maintenant](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/products/molecular-biology-and-functional-genomics/microbiome) Aperçu Articles et protocoles apparentés Support ## Comment analyser les données de qPCR ? La fluorescence des molécules rapporteuses est mesurée et quantifiée ; en général, ce sont soit des colorants (SYBR® Green, bromure d'éthidium) qui s'intercalent entre les bases sur l'ADN double brin, soit des sondes conçues pour se lier à une séquence spécifique (sondes Molecular Beacons, sondes TaqMan®) sur l'ADN. ## Quantification relative des données de qPCR Il existe deux grandes méthodes de quantification des données de qPCR. La quantification relative, méthode la plus courante, utilise la comparaison des Ct (ΔΔCt), qui permet de déterminer le différentiel d'expression ou d'abondance du gène cible dans l'échantillon, comparé à un gène témoin et normalisé avec le différentiel d'expression d'un gène de référence. Puisque les valeurs d'efficacité E sont différentes pour le gène cible et le gène de référence, cette méthode tient également compte des différences entre les valeurs E. Cette méthode est plus souvent employée dans l'analyse de l'expression génique. ## Quantification absolue des données de qPCR La seconde méthode, la quantification absolue, est plus courante en microbiologie environnementale et s'appuie sur la courbe étalon (SC pour "Standard Curve"). La méthode de la courbe étalon utilise une série de dilutions d'une concentration en matrice connue (N0) pour créer une courbe étalon en utilisant la régression linéaire du log(N0) en fonction du cycle seuil (Ct pour "Cycle threshold"). Cette courbe sert ensuite à calculer les concentrations en matrice de l'échantillon. Cette méthode repose sur l'hypothèse que la valeur d'efficacité de l'échantillon est identique à celle de l'étalon.  [Consulter tous les produits de qPCR](https://www.sigmaaldrich.com/search/facet-search?focus=products&page=1&perpage=30&sort=relevance&term=facet-search&type=product) [](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) ### [Vous recherchez des informations plus spécifiques ?](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) Consultez notre recherche de documents pour trouver des fiches de données de sécurité, des certificats et de la documentation technique. [Trouver des documents](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) ## Articles techniques apparentés - [Analyse des données PCR/qPCR](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/technical-documents/technical-article/genomics/qpcr/data-analysis) Après une PCR traditionnelle, l'analyse des données de la PCR/qPCR est effectuée par résolution à travers un gel d'agarose ou, plus récemment, à travers un capillaire. - [Principes de base de la PCR quantitative](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/technical-documents/technical-article/genomics/qpcr/quantitative-pcr) L'amplification en chaîne par polymérase en temps réel permet d'estimer la quantité de matériel de départ présente dans un échantillon. Elle présente une plage dynamique d'analyse bien plus large que la PCR classique. - [PCR Assay Optimization and Validation](https://www.sigmaaldrich.com/BE/en/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/assay-optimization-and-validation) PCR assay guide navigates you through primer validation and other assay optimization factors to ensure high sensitivity and specificity for optimum DNA/ RNA quantification. - [PCR/qPCR/dPCR Assay Design](https://www.sigmaaldrich.com/BE/en/technical-documents/protocol/genomics/pcr/pcr-qpcr-dpcr-assay-design) PCR workflow's variability influenced by sample source, reverse transcription, and assay design, impacting reproducibility. - [Hot Start PCR](https://www.sigmaaldrich.com/BE/en/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/hot-start-pcr) The purpose of Hot Start PCR is to inhibit the PCR reaction in order to reduce nonspecific amplification, prevent the formation of primer dimers, and increase product yields. - [Afficher tout (37)](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) ## Protocoles apparentés - [Protocole universel de qPCR SYBR Green](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/technical-documents/protocol/genomics/qpcr/sybr-green-qpcr) Notre protocole SYBR Green qPCR est une méthode conçue pour quantifier avec précision l'expression des gènes et les réactions RT-PCR. - [ChIP-qPCR Data Analysis](https://www.sigmaaldrich.com/BE/en/technical-documents/protocol/genomics/qpcr/chip-qpcr-data-analysis) Chromatin Immunoprecipitation qPCR for studying gene regulation across conditions. - [Primer Concentration Optimization](https://www.sigmaaldrich.com/BE/en/technical-documents/protocol/genomics/qpcr/primer-concentration-optimization) Primer Concentration Optimization Protocol creates reaction matrix for testing primer concentrations against various partners. - [qPCR Efficiency Determination Protocol](https://www.sigmaaldrich.com/BE/en/technical-documents/protocol/genomics/qpcr/qpcr-efficiency-determination) Optimization of qPCR conditions is important for the development of a robust assay. The two main approaches are optimization of primer concentration and/or annealing temperatures. - [Multiplex Real-Time PCR](https://www.sigmaaldrich.com/BE/en/technical-documents/protocol/genomics/pcr/kapa-multiplex-rtpcr) Multiplex qPCR employing probe-based chemistries is a demanding application that often requires extensive optimization and validation. - [Afficher tout (29)](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) ### Trouver d'autres articles et protocoles Saisir des mots-clés Rechercher ## Comment pouvons-nous vous aider ? Pour toute question, veuillez formuler une [demande d'assistance](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/support/customer-support) ou vous adresser à notre Service Clients : par e-mail à l'adresse [custserv@sial.com](mailto:custserv@sial.com) ou en appelant le +1 (800) 244-1173 ## Autre support - [Calculateurs et Applis](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/support/calculators-and-apps) Boîte à outils disponible sur Internet - Outils et ressources pour la recherche scientifique en chimie analytique, sciences de la vie, synthèse chimique et science des matériaux. - [Customer Support Request](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/support/customer-support) Support client, y compris l'aide pour les commandes, les produits, les comptes et les problèmes techniques du site Web. - [FAQ](https://maestro.my.site.com/knowledgeportal/s/) Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services. * * * __Articles à la une__ [Analyse des données PCR/qPCR](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/technical-documents/technical-article/genomics/qpcr/data-analysis) Après une PCR traditionnelle, l'analyse des données de la PCR/qPCR est effectuée par résolution à travers un gel d'agarose ou, plus récemment, à travers un capillaire. [Principes de base de la PCR quantitative](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/technical-documents/technical-article/genomics/qpcr/quantitative-pcr) L'amplification en chaîne par polymérase en temps réel permet d'estimer la quantité de matériel de départ présente dans un échantillon. Elle présente une plage dynamique d'analyse bien plus large que la PCR classique. [RT-qPCR (PCR quantitative après transcription inverse)](https://www.sigmaaldrich.com/BE/fr/technical-documents/technical-article/genomics/qpcr/rt-qpcr) La RT-qPCR, ou PCR quantitative après transcription inverse, combine les effets de la transcription inverse et de la PCR quantitative, ou PCR en temps réel, pour amplifier et détecter des cibles spécifiques. La RT-qPCR trouve de multiples applications, notamment dans la quantification du niveau d'expression génique, la validation de l'interférence par ARN ou la détection d'agents pathogènes comme les virus. [How qPCR Works](https://www.sigmaaldrich.com/BE/en/technical-documents/technical-article/genomics/qpcr/how-qpcr-works) Watch these videos to learn how real time or quantitative PCR (qPCR) works and the benefits of both the SYBR Green-based and probe-based methods of qPCR assay. Haut __Connectez-vous pour continuer__ Pour continuer à lire, veuillez vous connecter à votre compte ou en créer un. Se connecter__Vous n'avez pas de compte ?__S'inscrire An unknown error has occured.