[Passa al contenuto](https://www.sigmaaldrich.com#main-content) [](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it) Prodotti Carrello0 ITIT Prodotti [Login / Registrati](https://www.sigmaaldrich.com/oidc-sign-in) [Ricerca di ordini](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/order-lookup) [Ordine rapido](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/quick-order) Carrello0 [Home](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it)[Applicazioni](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/applications)[Genomica](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/applications/genomics)qPCR # qPCR  La PCR quantitativa in tempo reale (qPCR) si avvale di molecole reporter fluorescenti per consentire la quantificazione dei prodotti amplificati. Come nella PCR convenzionale si amplificano stampi di DNA, cDNA o RNA, ma ad ogni ciclo si misura la fluorescenza per la quantificazione relativa o assoluta. Questa tecnica è utile in numerose aree della ricerca come l’analisi di espressione genica, la genotipizzazione, l’analisi di microRNA, l’analisi di variazioni genetiche e l’analisi di proteine. * * * ## Prodotti correlati Slide 1 of 9 1 of 2 [ \ Sigma-Aldrich \ STR1 \ Enhanced Avian First Strand Synthesis Kit](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/product/sigma/str1) Visualizzazione rapida [ \ Roche \ RNAINH-RO \ Protettore inibitore di RNasi](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/product/roche/rnainhro) Visualizzazione rapida [ \ Sigma-Aldrich \ AMPD1 \ DNase I](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/product/sigma/ampd1) Visualizzazione rapida [ \ Sigma-Aldrich \ RDRT \ ReadyScript® cDNA Synthesis Mix](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/product/sigma/rdrt) Visualizzazione rapida [ \ Roche \ FSUPMMRO \ Sonda Universale Master FastStart (Rox)](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/product/roche/fsupmmro) Visualizzazione rapida [ \ Roche \ FSUSGMMRO \ Master mix FastStart Universal SYBR Green Master (Rox).](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/product/roche/fsusgmmro) Visualizzazione rapida [ \ Roche \ FSSGMMRO \ Master mix Fast Start SYBR Green](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/product/roche/fssgmmro) Visualizzazione rapida [ \ Roche \ FSTMPMMRO \ FastStart TaqMan® Probe Master](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/product/roche/fstmpmmro) Visualizzazione rapida [ \ Roche \ EAGLETMMRO \ EagleTaq Universal Master Mix (ROX)](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/product/roche/eagletmmro) Visualizzazione rapida * * * ## Categorie in evidenza [](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/products/molecular-biology-and-functional-genomics/pcr-and-amplification/pcr-reagents-and-kits) [Reagenti e kit per PCR](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/products/molecular-biology-and-functional-genomics/pcr-and-amplification/pcr-reagents-and-kits) La reazione a catena della polimerasi (PCR) è una tecnica di cui i laboratori di biologia molecolare non possono fare a meno. serve per amplificare di diversi ordini di grandezza il DNA. I reagenti e le risorse che proponiamo sono adatti a svariati protocolli di ricerca, quali analisi dell'espressione genica, genotipizzazione, sequenziamento e mutagenesi. [Per acquistare](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/products/molecular-biology-and-functional-genomics/pcr-and-amplification/pcr-reagents-and-kits) [](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/products/molecular-biology-and-functional-genomics/cloning-and-expression/molecular-cloning-and-protein-expression) [Clonaggio ed espressione di proteine](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/products/molecular-biology-and-functional-genomics/cloning-and-expression/molecular-cloning-and-protein-expression) Metodi e protocolli per un clonaggio affidabile e un'espressione proteica robusta mediante vettori di espressione introdotti in cellule batteriche, di insetto o di mammifero. 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SYBR®green, bromuro di etidio) che si intercalano fra le basi di DNA a doppio filamento, o sonde disegnate per legare una determinata sequenza di DNA (es. fari molecolari, sonde TaqMan®). ## Quantificazione relativa dei dati della qPCR Per quantificare i dati della qPCR, si può ricorrere fondamentalmente a due metodi. La quantificazione relativa, il metodo più comune, utilizza il valore di ΔΔCt da cui si ricava il rapporto tra l'espressione, o l'abbondanza, del gene bersaglio nel campione rispetto a un gene di controllo, normalizzando i risultati in base all'espressione di un gene di riferimento. Poiché i valori dell'efficienza di amplificazione E del gene bersaglio e del gene di riferimento sono diversi, questo metodo deve tenere conto delle differenze dei valori di E. Questo metodo è impiegato più di frequente nelle analisi dell'espressione genica. ## Quantificazione assoluta dei dati della qPCR Il secondo metodo, la quantificazione assoluta, è utilizzata più comune nei lavori di microbiologia ambientale e ricorre a una curva standard (SC). Si avvale di diluizioni seriali di una molecola stampo a concentrazione nota, N0, per creare una curva standard applicando la regressione lineare ai valori di CT (ciclo soglia) in funzione di log(N0). La curva ottenuta viene poi usata per calcolare le concentrazioni dello stampo nel campione. Il metodo si basa sull’assunzione che l'efficienza di amplificazione del campione sia uguale a quella dello standard.  [Per l'acquisto dei prodotti per qPCR](https://www.sigmaaldrich.com/search/facet-search?focus=products&page=1&perpage=30&sort=relevance&term=facet-search&type=product) [](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) ### [Cercate informazioni più specifiche?](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) Fate una ricerca tra i numerosi documenti disponibili: schede tecniche, certificati e documentazione tecnica. [Per leggere i documenti](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) ## Articoli tecnici correlati - [Analisi dei dati PCR/qPCR](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/technical-documents/technical-article/genomics/qpcr/data-analysis) Dopo aver completato una PCR tradizionale, l'analisi dei dati della PCR/qPCR viene condotta mediante risoluzione attraverso un gel di agarosio o, più recentemente, attraverso un capillare. - [Quantitative PCR Basics](https://www.sigmaaldrich.com/IT/en/technical-documents/technical-article/genomics/qpcr/quantitative-pcr) Quantitative PCR detection builds on basic PCR techniques and allows researchers to estimate the quantity of starting material in a sample with a much wider dynamic range. - [PCR Assay Optimization and Validation](https://www.sigmaaldrich.com/IT/en/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/assay-optimization-and-validation) PCR assay guide navigates you through primer validation and other assay optimization factors to ensure high sensitivity and specificity for optimum DNA/ RNA quantification. - [PCR/qPCR/dPCR Assay Design](https://www.sigmaaldrich.com/IT/en/technical-documents/protocol/genomics/pcr/pcr-qpcr-dpcr-assay-design) PCR workflow's variability influenced by sample source, reverse transcription, and assay design, impacting reproducibility. - [Hot Start PCR](https://www.sigmaaldrich.com/IT/en/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/hot-start-pcr) The purpose of Hot Start PCR is to inhibit the PCR reaction in order to reduce nonspecific amplification, prevent the formation of primer dimers, and increase product yields. - [Visualizza tutto (36)](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) ## Protocolli correlati - [Protocollo universale SYBR Green qPCR](https://www.sigmaaldrich.com/IT/it/technical-documents/protocol/genomics/qpcr/sybr-green-qpcr) Il nostro protocollo SYBR Green qPCR è un metodo progettato per la quantificazione accurata dell'espressione genica e delle reazioni RT-PCR. - [ChIP-qPCR Data Analysis](https://www.sigmaaldrich.com/IT/en/technical-documents/protocol/genomics/qpcr/chip-qpcr-data-analysis) Chromatin Immunoprecipitation qPCR for studying gene regulation across conditions. - [Primer Concentration Optimization](https://www.sigmaaldrich.com/IT/en/technical-documents/protocol/genomics/qpcr/primer-concentration-optimization) Primer Concentration Optimization Protocol creates reaction matrix for testing primer concentrations against various partners. - [qPCR Efficiency Determination Protocol](https://www.sigmaaldrich.com/IT/en/technical-documents/protocol/genomics/qpcr/qpcr-efficiency-determination) Optimization of qPCR conditions is important for the development of a robust assay. 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