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问题:我应该用什么SPME纤维来提取一类分析物?

应考虑两个因素:

  • 分析物的极性
  • 分析物的挥发性和分子大小

极性分析物被吸引到极性相(例如聚丙烯酸酯和聚乙二醇PEG涂层)。薄膜较厚(100微米)的纤维对挥发物较好,但也可用于挥发性较弱的化合物(需要较长的提取时间)。多孔纤维(带有羧基或二乙烯基苯涂层)也可以留存较小的分析物,是C2-C6分析物的理想选择薄膜纤维(7微米和30微米聚二甲基硅氧烷),更适合大分子。 

有关详细信息,请参阅SPME纤维选择

问题:如何提高SPME复原?

  • 选择最合适的纤维(参见上一个问题)。
  • 搅动或搅拌样品。
  • 如果您正在进行顶空采样,请尽量减少顶空体积(<30%),选择合适的温度(40-90°C)。如果温度过高,分析物可从纤维上解吸。
  • 样品中加入25%的NaCl,调节pH值(对酸降低pH值,对碱升高pH值)。
  • 尽量减少样品中有机溶剂的用量。


问题:SPME是定量的吗?

是的。每种分析物都需要校准曲线来确定线性范围。使用与样品中分析物性质相似的内标可提高精度。标准添加的用法最适用于复杂的矩阵。对于气相色谱/质谱分析,同位素是理想的内标。需要一致的提取条件和搅动或搅拌。


问题:如何量化手动SPME的结果?

对于手动SPME提取的可靠定量结果,我们推荐以下指南:

样品体积必须在样品间保持一致。对于直接浸入式应用,完全填充样品容器。对于顶空应用,将容器填充到1/2至3/4之间。

提取半挥发物时,使用一致的搅拌速度。如果速度不一致,精度会下降,特别是对于分配常数高的分析物。

保持样品中有机物含量的最低水平(<1%),并在所有样品中保持一致。大量的有机溶剂会极大地影响分配常数。一些溶剂(如甲醇)作为与水的共溶剂,可以降低提取的分析物的回收率。

使用与您的分析物相似的内标。内标有助于抵消提取变量。标准品制备很重要。按1-2mg/mL溶剂配制标准品,然后在提取前将0.05-5uL的标准品加入水样中。

保持样品间提取时间和温度的一致。提取时间一般为挥发物10分钟,半挥发物20-30分钟。

有关SPME一致结果的详细信息,请参阅公告923


问题:如何延长SPME纤维寿命?

大多数纤维损伤是由针头弯曲导致的。弯曲通常发生在纤维刺穿小瓶隔膜时。调整黑针深度计,使针头仅露出0.5-1厘米。刺穿小瓶隔膜,然后旋转针头深度计以便将针头拧入小瓶中。
保持注射口温度低于纤维的最高推荐温度。在可能的情况下进行顶空取样,以尽可能减少高分子量化合物的提取或结转。


问题:背景太吵闹。如何减少外来峰值?

  • 在使用前对纤维进行适当的调理。对纤维进行较长时间的再处理。
  • 检查入口衬垫。大多数峰值噪声是由衬垫中的隔膜颗粒引起的。
  • 更换小瓶隔膜。
  • 把进口温度降低20°C左右。使用产生峰值的最低温度,并尽量减少结转。


问题:可以用SPME从有机溶剂中提取分析物吗?

我们不建议从有机溶剂中提取。但是,您可以使用极性有机溶剂上方的顶部空间提取分析物,但存在分布常数降低、溶胀造成纤维损伤以及色谱图上出现较大溶剂峰的风险。


问题:顶空SPME与顶空分析仪相比有哪些优势?

在分析半挥发性和挥发性分析物时,顶空SPME与顶空分析仪相比具有几个重要的优点。

使用顶空分析仪捕集水基样品中的半挥发性分析物时,必须将样品加热至110°C或更高。许多水分将与分析物一起转移。通常含分析物的体积较大,您必须在低温状态将分析物重新聚焦在色谱柱入口处。与分析物一起转移的水分可以冻结在细胞系上。

对于顶空SPME,样品通常只需要升温至40-60°C。分析物会集中在纤维上,水蒸气很少。然后,由于纤维在进样口快速解吸,分析物通常解吸成聚焦的塞子——不需要低温。此外,顶空SPME样品体积很小,例如在4毫升小瓶中为3毫升。

即使是挥发性有机化合物(VOC)也可以以足够的速度从SPME纤维上解吸,从而消除对低温的需求。使用Carboxen™/聚二甲基硅氧烷纤维,以留存极易挥发的分析物(室温下的气体)。只有乙烷、甲烷和一些固定气体太小而不能留存在羧基颗粒的孔隙中。其它SPME纤维适用于顶空SPME提取半挥发物。

使用顶空SPME或纤维浸没SPME的决定几乎完全取决于分析物的蒸汽压。如果有明显的蒸汽压,那么顶空SPME是有利的;分析物的回收率比浸入式SPME更清洁、更快,纤维的使用寿命更长。如果您拥有坚实的样品矩阵,那么顶空SPME是强制性的。

有关挥发性分析物的SPME的更多信息,请参阅应用说明11应用说明56。有关半挥发性物质的SPME的详细信息,请参阅应用说明6应用说明17应用说明81


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(KB)
页码编号
T199925 SPME应用指南 公告925 334   135
T101928 固相微萃取疑难解答指南 公报928 282   12 
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