生物缓冲液

缓冲液参考中心

选定生物缓冲液的有效pH缓冲范围(25°C,0.1M)
 

缓冲液 有效pH缓冲范围 pKa
(20°C)
pKa
(25°C)
pKa
(37°C)
试剂等级 生物性能认证级 医药级
MES 5.5–6.7 6.16 6.10 5.97 M8250 M2933 PHG0003
Bis-Tris 5.8–7.2 n/a 6.50 6.36 B9754 B4429 RES1161B-A7, PHG0004
ADA 6.0–7.2 6.65 6.59 6.46 A9883 n/a n/a
ACES 6.1–7.5 6.88 6.78 6.54 A9758 A3594 RES1000A-A7
PIPES 6.1–7.5 6.80 6.76 6.66 P6757 P1851 RES0703P-A7
MOPSO 6.2–7.6 n/a 6.90 6.75 M8389 n/a RES0196M-B7
Bis-Tris Propane 6.3–9.5 n/a 6.8, 9.0 n/a B6755 B4679 PHG0005
BES 6.4–7.8 7.17 7.09 6.90 B9879 B4554 n/a
MOPS 6.5–7.9 7.28 7.20 7.02 M1254 M3183 PHG0007
TES 6.8–8.2 7.50 7.40 7.16 T1375 T5691 n/a
HEPES 6.8–8.2 7.55 7.48 7.31 H3375 H4034 RDD002, RES6003H-B7
DIPSO 7.0–8.2 n/a 7.60 7.35 D9648 n/a n/a
MOBS 6.9–8.3 n/a 7.60 n/a M3295 n/a n/a
TAPSO 7.0–8.2 n/a 7.60 7.39 T9269 T5566 n/a
Trizma 7.0–9.0 8.20 8.06 7.72 T1503 T6066 RES3137T-A7, RES3193T-A7
HEPPSO 7.1–8.5 n/a 7.80 6.66 H3137 n/a n/a
POPSO 7.2–8.5 n/a 7.80 7.63 P3405 n/a n/a
TEA 7.3–8.3 n/a 7.80 n/a T1377 n/a n/a
EPPS 7.3–8.7 n/a 8.00 n/a E9502 E0276 n/a
Tricine 7.4–8.8 8.16 8.05 7.80 T0377 T5816 RES3077T-A7
Gly-Gly 7.5–8.9 n/a 8.20 n/a G1002 G3915 G0674
Bicine 7.6–9.0 8.35 8.26 8.04 B3876 n/a RES1151B-B7
HEPBS 7.6–9.0 n/a 8.30 n/a H6903 n/a n/a
TAPS 7.7-9.1 8.49 8.40 8.18 T5130 T5316 n/a
AMPD 7.8–9.7 n/a 8.80 n/a A9754 n/a n/a
TABS 8.2–9.6 n/a 8.90 n/a T1302 n/a n/a
AMPSO 8.3–9.7 n/a 9.00 9.10 A6659 n/a n/a
CHES 8.6–10.0 9.55 9.49 9.36 C2885 n/a RES1299C-B7
CAPSO 8.9–10.3 n/a 9.60 9.43 C2278 n/a n/a
AMP 9.0–10.5 n/a 9.70 n/a A9879 n/a n/a
CAPS 9.7–11.1 10.56 10.40 10.02 C2632 n/a n/a
CABS 10.0–11.4 n/a 10.70 n/a C5580 n/a n/a

 


Trizma缓冲液表 - pH与温度的关系

在不同温度下的pH值   0.05M溶液的g / L
5 °C 25 °C 37 °C   Trizma HCL Trizma 碱
7.76 7.20 6.91   7.02 0.67
7.89 7.30 7.02   6.85 0.80
7.97 7.40 7.12   6.61 0.97
8.07 7.50 7.22   6.35 1.18
8.18 7.60 7.30   6.06 1.39
8.26 7.70 7.40   5.72 1.66
8.37 7.80 7.52   5.32 1.97
8.48 7.90 7.62   4.88 2.30
8.58 8.00 7.71   4.44 2.65
8.68 8.10 7.80   4.02 2.97
8.78 8.20 7.91   3.54 3.34
8.88 8.30 8.01   3.07 3.70
8.98 8.40 8.10   2.64 4.03
9.09 8.50 8.22   2.21 4.36
9.18 8.60 8.31   1.83 4.65
9.28 8.70 8.42   1.50 4.90
9.36 8.80 8.51   1.23 5.13
9.47 8.90 8.62   0.96 5.32
9.56 9.00 8.70   0.76 5.47

 


磷酸盐缓冲液表 - 0.2M溶液

无水磷酸二氢钾g / L 七水磷酸氢二钠g / L 23 °C pH   无水磷酸二氢钾g / L 二水磷酸氢二钠g / L 23 °C pH
22.4 3.49 5.7   10.80 29.51 6.9
22.08 4.29 5.8   9.36 32.73 7.0
21.60 5.37 5.9   7.92 35.95 7.1
21.05 6.60 6.0   6.72 38.63 7.2
20.40 8.05 6.1   5.52 41.31 7.3
19.56 9.93 6.2   4.56 43.46 7.4
18.60 12.07 6.3   3.84 45.07 7.5
17.64 14.22 6.4   3.12 46.68 7.6
16.44 16.90 6.5   2.52 48.55 7.7
15.00 20.12 6.6   2.04 49.09 7.8
13.56 23.34 6.7   1.68 49.89 7.9
12.24 26.29 6.8   1.27 50.81 8.0

 

柠檬酸 – Na2HPO4 缓冲液,pH约为 2.6–7.61

柠檬酸一水合物, C6H8O7 • H2O, M. wt. 210.14; 0.1M的溶液中含有21.01 g/l。 Na2HPO4, M. wt. 141.98; 0.2M的溶液中含有28.40g / l 或 Na2HPO4 • 2H2O, M. wt. 178.05; 0.2M的溶液中含有35.61 g/l。

xml 0.1M的柠檬酸和yml 0.2M 的Na2HPO4 混合。

pH x ml 0.1M的柠檬酸 y ml 0.2M 的Na2HPO4
2.6 89.10 10.90
2.8 84.15 15.85
3.0 79.45 20.55
3.2 75.30 24.70
3.4 71.50 28.50
3.6 67.80 32.20
3.8 64.50 35.50
4.0 61.45 38.55
4.2 58.60 41.40
4.4 55.90 44.10
4.6 53.25 46.75
4.8 50.70 49.30
5.0 48.50 51.50
5.2 46.40 53.60
5.4 44.25 55.75
5.6 42.00 58.00
5.8 39.55 60.45
6.0 36.85 63.15
6.2 33.90 66.10
6.4 30.75 69.25
6.6 27.25 72.75
6.8 22.75 77.25
7.0 17.65 82.35
7.2 13.05 86.95
7.4 9.15 90.85
7.6 6.35 93.65

 

柠檬酸 - 柠檬酸钠缓冲液,pH 为3.0–6.21

柠檬酸一水合物,C6H8O7 • H2O, M. wt. 210.14; 0.1M的溶液中含有21.01 g/l。柠檬酸三钠二水合物,C6H5O7Na3 • 2H2O, M. wt. 294.12; 0.1M的溶液中含有29.41 g/l。

xml 0.1M的柠檬酸和yml 0.1M 的柠檬酸三钠混合。

pH x ml 0.1 M的柠檬酸 y ml 0.1M的柠檬酸三钠
3.0 82.0 18.0
3.2 77.5 22.5
3.4 73.0 27.0
3.6 68.5 31.5
3.8 63.5 36.5
4.0 59.0 41.0
4.2 54.0 46.0
4.4 49.5 50.5
4.6 44.5 55.5
4.8 40.0 60.0
5.0 35.0 65.0
5.2 30.5 69.5
5.4 25.5 74.5
5.6 21.0 79.0
5.8 16.0 84.0
6.0 11.5 88.5
6.2 8.0 92.0

 

乙酸钠 - 乙酸缓冲液,pH为3.7–5.61

乙酸钠三水合物,CH3COONa • 3H2O, M. wt. 136.09; 0.2M的溶液中含有27.22 g/l。

X ml 0.2M的NaOAc和y ml 0.2M的HOAc混合。

pH, 18 °C x ml 0.2M的NaOAc y ml 0.2M的HOAc
3.7 10.0 90.0
3.8 12.0 88.0
4.0 18.0 82.0
4.2 26.5 73.5
4.4 37.0 63.0
4.6 49.0 51.0
4.8 59.0 41.0
5.0 70.0 30.0
5.2 79.0 21.0
5.4 86.0 14.0
5.6 91.0 9.0

 

Na2HPO4 – NaH2PO4缓冲液,pH 为5.8–8.0 ,25 °C1

Na2HPO4 • 2H2O, M. wt. 178.05; 0.2M的溶液中含有35.61 g/l。 Na2HPO4 • 12H2O, M. wt. 358.22; 0.2M 的溶液中含有71.64 g/l。 NaH2PO4 • H2O, M. wt. 138.01; 0.2M的溶液中含有27.6 g/l。 NaH2PO4 • 2H2O, M. wt. 156.03; 0.2M的溶液中含有31.21 g/l。

x ml 0.2M的Na2HPO4, y ml 0.2M的NaH2PO4;用水稀释至100ml。

pH, 25 °C x ml 0.2M-Na2HPO4 y ml 0.2M-NaH2PO4
5.8 4.0 46.0
6.0 6.15 43.85
6.2 9.25 40.75
6.4 13.25 36.75
6.6 18.75 31.25
6.8 24.5 25.5
7.0 30.5 19.5
7.2 36.0 14.0
7.4 40.5 9.5
7.6 43.5 6.5
7.8 45.75 4.25
8.0 47.35 2.65

 

咪唑(乙二醛)-HCl缓冲液, 25℃,pH为 6.2-7.81

咪唑,C3H4N2, M. wt. 68.08.

25 ml 0.2M-imidazole (13.62 g/l), x ml 0.2M-HCl, diluted to 100 ml with H2O.

pH, 25 °C x ml 0.2M的HCl
6.2 21.45
6.4 19.9
6.6 17.75
6.8 15.2
7.0 12.15
7.2 9.3
7.4 6.8
7.6 4.65
7.8 3.0

 

碳酸钠 - 碳酸氢钠缓冲液,pH 为9.2–10.81

Na2CO3 • 10H2O, M. wt. 286.2; 0.1M的溶液中含有28.62 g/l。NaHCO3, M. wt. 84.0; 0.1M的溶液中含有8.40 g/l。

x ml 0.1M的Na2CO3和 y ml 0.1M的Na2HCO3 混合。

pH x ml 0.1M的Na2CO3 y ml 0.1M的NaHCO3
20 °C 37 °C
9.2 8.8 10 90
9.4 9.1 20 80
9.5 9.4 30 70
9.8 9.5 40 60
9.9 9.7 50 50
10.1 9.9 60 40
10.3 10.1 70 30
10.5 10.3 80 20
10.8 10.6 90 10

 


有用的公式

重量百分比(w / v)
(%所需的缓冲液/ 100)×最终缓冲液体积(ml)=所需起始材料克数。
摩尔解决方案
所需摩尔浓度x 分子量 x 溶液最终体积(L)=所需克数
Henderson-Hasselbach 方程

参考文献

  1. Dawson, R. M. C.; Elliot, D. C.; Elliot, W. H.; Jones, K. M. Data for Biochemical Research; 3rd ed., Oxford Science Publ., 1986.

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