表观遗传学

Imprint® 染色质免疫共沉淀试剂盒

 最为快速和便捷的ChIP试剂盒!

Sigma在Imprint染色质免疫共沉淀试剂盒(CHP1)中将速度、便捷性和性能进行了全面的兼顾,为染色质免疫共沉淀提供了一套完整的解决方案,包括用于DNA纯化的纯化柱、试剂以及基于GenomePlex®全基因组扩增试剂盒(WGA2)对ChIP DNA进行扩增的整合方案。灵活的格式可实现以便捷的联孔形式免疫沉淀和纯化哺乳动物细胞或组织DNA。

 

  • 快速 – 总实验时长不到6小时,使得Imprint Kit成为市场上最为快速的方法
  • 灵敏 – 单个ChIP样本最低仅需20,000个细胞
  • 便捷 – 相比于任何现有ChIP实验方案,所需要的步骤最少
  • 灵活 – 可提供针对细胞、组织的实验方案,并为高通量应用提供便捷的联孔格式
  • 完整 – 包括用于DNA纯化的纯化柱和试剂,以及基于GenomePlex技术的整合扩增流程

 

Figure 1 - Protocol Time Graph

图1. 从固定至纯化,采用不同染色质免疫共沉淀试剂盒所需的时间比较。相应ChIP实验均采用各自厂家推荐的实验方案,对所需的总时间进行比较。

 

图2: 1天时间足够完成通过Sigma Imprint ChIP实验方案进行的ChIP DNA富集。单次ChIP实验针对10,000和100,000个SW480细胞采用IgG、H3K9ac、RNAP和H3K27me3鼠抗进行完成。在进行抗体亲和吸附前,留下一定比例(1%)的超声后染色体作为“input” DNA。在完成解交联之后进行DNA纯化。富集后的DNA使用特异的GAPDH引物进行qPCR扩增。Percent input通过100 x 2^(Ctadjusted Input — CtEnriched)进行计算。Input DNA的Ct通过减去6.644或Log2100的Ct值并根据1%到100%的当量进行调整。

 

Figure 3 - RNA Pol2 Antibody Percent Input Profile Graph Figure 4 - H3K9ac Antibody Percent Input Profile Graph

图3和4. 一种高度灵敏的ChIP检测方法。 H对HeLa细胞进行计数、固定,并根据Imprint CHP1的说明采用可选的高灵敏度方法进行免疫沉淀。并使用抗H3K9ac(H9286)和试剂盒提供的针对人RNA聚合酶II和非特异性小鼠IgG的抗体进行ChIP测定。为了评估ChIP的富集效果,针对GAPDH启动子区域(高度表达的管家基因)进行了SYBR qPCR检测。 Percent Input代表了在有和没有抗体选择情况下的DNA量。对于这些抗体,由于减少了非特异性的沉淀,在较少的细胞情况下也能获得有较为明显提升的富集效果。

 

订购信息

    货号 产品名称
CHP1-24RXN
CHP1-96RXN
Imprint染色质免疫共沉淀试剂盒

 

使用该试剂盒进行表观遗传学分析的相关产品

DNA提取和修饰

        产品编号 产品名称
G1N10 GenElute™哺乳动物基因组DNA小提试剂盒
NA2010 血液基因组DNA试剂盒
G2N10 植物基因组DNA小提试剂盒
MOD50 Imprint DNA 修饰试剂盒

 

DNA-蛋白互作和ChIP验证抗体

        货号 产品名称
A5463

抗乙酰化蛋白兔抗

H0913 抗乙酰组蛋白H3(Ac-Lys9)单克隆鼠抗
H2663 抗组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)单克隆鼠抗
H7162 抗甲基组蛋白(Me-Lys9)兔抗
H7789 抗乙酰组蛋白H1.4(Ac-Lys26)兔抗
H9161 抗乙酰化&磷酸化组蛋白H3(Ac-Lys9, pSer10)兔抗
H9286 抗乙酰组蛋白H3(Ac-Lys9)兔抗
R4279 抗RbAp46 C末端兔抗

 

用于功能基因组学研究的MISSION® shRNA

        货号 产品名称
SH3011 MISSION人基因家族shRNA套装,表观遗传学调节因子的甘油冻存菌株
SH3021 MISSION人基因家族shRNA套装,DNA表观遗传学调节因子
SH3031 MISSION人基因家族shRNA套装,表观遗传学调节因子的慢病毒颗粒

 

Imprint ChIP验证抗体

成功的染色质免疫共沉淀需要有效、特异的高质量抗体。而并非所有的抗体都能用于ChIP,因为抗原表位可能在交联后被阻断或发生改变。 Sigma的Imprint抗体都在ChIP应用中进行了验证,并逐批进行检测,以确保实现成功的染色质免疫共沉淀实验。有关ChIP验证抗体的完整列表请点击此处