功能基因组学和RNAi

MicroRNA

 mirPremier™ microRNA分离试剂盒

更快、纯度更高、更少危害、更少的手动操作

TmirPremier microRNA分离试剂盒补充了成熟的MISSION® RNAi产品线,后者包含广泛的MISSION siRNA和shRNA产品,文库等服务,mRNA检测试剂,抗体和用于蛋白质水平检测的AQUA 肽以及覆盖全部工作流程的支持试剂(细胞培养细胞生物学化合物和检测、转染试剂等)。想要获取更多信息,请访问功能基因组学和RNAi主页

MicroRNA (miRNA)是一类长度约为21个核苷酸的小RNA分子,可通过多种方式调节基因表达,包括翻译抑制、mRNA切割和脱腺苷酸化。Sigma开发的mirPremier microRNA分离试剂盒是MISSION® RNAi产品系列新成员,为从各种生物样本中纯化和富集miRNA及其他小RNA提供了快速高效的方法,使研究人员能够从细胞或组织中直接纯化高品质miRNA,其过程与总RNA制备一样快速简单。

  • 经过优化,可从各种生物样本中直接纯化microRNA和其他小RNA
  • 在30分钟内为下游应用快速纯化和富集miRNA
  • 可获得高纯度的miRNA,不含可检测到的大RNA
  • 无需使用有害的有机溶剂提取

 

 从各种生物样本中纯化miRNA

使用mirPremier microRNA分离试剂盒,研究人员可以从各种生物来源样本中纯化miRNA/小RNA,包括哺乳动物培养物、动物组织、微生物培养物和植物组织(图1)。mirPremier microRNA分离试剂盒还可以从葡萄叶等“难提取”组织中分离出高产量的miRNA/小RNA(图2)。此外,如果对信使RNA或其他大RNA感兴趣,也可以使用该试剂盒分离总RNA。

Figure 1

图 1
使用mirPremier microRNA分离试剂盒从各种生物材料中纯化miRNA样品。使用RNA Nano试剂盒在Agilent Bioanalyzer上分析各样品。

 

Figure 2



图 2
使用不同的microRNA分离试剂盒从难提取植物组织——葡萄叶——分离小RNA。首先在液氮中将葡萄叶组织研磨成细粉,然后使用不同的microRNA分离试剂盒分别提取100 mg粉末。使用含溴化乙锭的4%琼脂糖凝胶分析5%总回收体积的各纯化样品。DNA标记物为puc18的MspI消化产物(分子量—67、89、110、147、190、242、353、404、49和501个碱基)。每个泳道加入250ng酵母tRNA。

 在30分钟内快速纯化和富集miRNA

从细胞或组织中及时提取miRNA对于下游应用至关重要。mirPremier™ microRNA分离试剂盒提供了一个强大的实验方案,使科学家可在30分钟内纯化miRNA,是理想的miRNA快速制备方案(图34)。

Figure 3

图 3
miRNA纯化时间对比。

Figure 4

图 4
小RNA纯化工作流程对比。

 出色的miRNA/小RNA质量,不含任何可检测到的大RNA

与其他miRNA分离方法不同,mirPremier microRNA分离试剂盒能够获得高品质的miRNA/小RNA,不含可检测到的大RNA(图5)。

Figure 5

图 5
Sigma mirPremier microRNA 分离试剂盒(A)与竞品A miRNA分离试剂盒所得的miRNA质量对比。图5B右侧的两个峰为rRNA污染。从40 mg小鼠肝脏组织中分离出各样品,并使用RNA Nano试剂盒在Agilent 生物分析仪上对1%总回收体积的样品进行分析。

 无需有害的有机溶剂提取

mirPremier microRNA分离试剂盒利用新型纯化化学技术,以简单合理的方法分离miRNA和其他小RNA,无需使用苯酚和氯仿等有害的有机溶剂提取。

 为每一批产品提供质量保证和服务

与生命科学产品一样,mirPremier microRNA分离试剂盒获得了质量生产标准、客户服务、技术支持和其它各种产品的支持,这些支持成为生命科学技术领域最值得信赖的品牌。

 

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SNC10 mirPremier microRNA分离试剂盒(10次制备)
SNC50 mirPremier microRNA分离试剂盒(50次制备)


参考文献

  1. Ausubel, F. M. et al. Current Protocols in Molecular Biology; John Wiley & Sons: New York, 1995; Sections 4.1–4.10.
  2. Farrell, Robert E., Jr. RNA Methodologies, 2nd Edition; Academic Press: New York, 1998; pp 37–53.
  3. Sambrook, J. et al. Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd edition; Cold Spring Harbor Laboratory Press: Plainview, New York, 1989; pp 7.3–7.5.

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