功能基因组学和干扰RNA

慢病毒包装混合物

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MISSION®慢病毒包装混合物是可在HEK293T细胞中产生高滴度慢病毒的优化配方。

  • 通过省略冗余但重要的多变量质粒优化来加速病毒生产。
  • 使用MISSION shRNA质粒和随附的易用实验方案来产生高滴度的慢病毒。
  • 利用带有具有自灭活、长末端重复(SIN / LTR)区域的三个质粒系统安全地生产慢病毒。
  • 250微升或1.7毫升方便您选择慢病毒生产规模。

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产品概述
病毒递送系统的比较
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 产品概述

包含在慢病毒包装混合物中的质粒(图1)可编码病毒包装基因和异源病毒包膜基因的关键结构。当与MISSION shRNA pLKO.1质粒联合使用时,可产生有效的高滴度慢病毒,参见表1。病毒可以感染最坚韧的细胞系。因此,病毒系统在过去几十年中被遗传工程改造以便安全地将目标转基因递送至靶细胞。每种病毒系统都有其理想的应用特性,慢病毒系统是经过多代工程改造的特定逆转录病毒系统的一个例子,参见表2。制备病毒颗粒具有挑战性。我们向新老用户强烈推荐MISSION TRC shRNA克隆的病毒形式。Sigma®完善了各种规模的慢病毒颗粒生产。

Packaging Vector
Transfer Vector Envelope Vector

图 1为了增强安全性,生产病毒颗粒所必需的结构和复制基因被分离到多个质粒上。所有野生型毒力和辅助基因被删除。MISSION TRC转移载体含有修饰过的自我失活的3'长末端重复序列(SIN / LTR),使慢病毒颗粒无法复制。慢病毒颗粒在HEK293T等细胞系中包装。共转染质粒的所需序列都可用于生产和包装含目标转基因的病毒颗粒。只有转移载体的病毒长末端重复序列之间的区域被包装在病毒衣壳内。



表1. MISSION慢病毒包装系统的特点

特点 结果
多质粒方法 单个质粒不含生产包装的慢病毒所需的全部基因结果是颗粒无法复制。
缺失启动子 - 增强子区域的3'长末端重复序列的U3部分缺失 避免启动子干扰问题,并进一步消除病毒复制的可能性。
去除大多数慢病毒基因(?vpr,vif,vpu和nef) 去除shRNA包装系统以外非必要的毒力基因

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表2.病毒递送系统的比较

特点 腺病毒 腺相关病毒 逆转录病毒 慢病毒
感染非分裂细胞 X X   X
稳定整合到宿主基因组中   X X X
可作假型   X X X
接受大片段插入 X   X X
缺乏干扰素反应     X X
没有基因组转录沉默的问题 N/A     X

*腺相关病毒

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60毫米培养皿反应

产品编号 产品名称 96孔板反应 60毫米培养皿反应 加入购物车
SHP001 - 0.25 ml MISSION慢病毒包装混合物 250 25
SHP001 - 1.70 ml MISSION慢病毒包装混合物 1700 170

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