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枯草杆菌蛋白酶

本页内容

产品

物理性质和特异性

活性测定和最佳条件

储存和稳定性

溶解性和溶液稳定性

参考文献

 

同义词:枯草溶菌素,枯草杆菌蛋白酶A,细菌碱性蛋白酶
CAS #: 9014-01-1
EC #: 3.4.21.62

 Sigma公司的枯草杆菌蛋白酶由地衣芽孢杆菌发酵产生。我们提供几种等级和配方,包括高纯度冻干粉以及经济的工业级解决方案。

物理性质和特异性

MW:枯草杆菌蛋白酶是不具有二硫键的非糖基化单链多肽,分子量为27 KDa。2

特异性:枯草杆菌蛋白酶A是丝氨酸S8内切蛋白酶家族的成员。它具有宽谱特异性,优先选择P1位置的大分子无电荷残基,可水解天然蛋白和变性蛋白,在碱性条件下有活性。

等电点:pI = 9.4

E1%(280nm) = 8.6

沉降系数:S20,w = 2.77

Alcalase®(货号P4860)液体密度:1.25 g/ml

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活性测定和最佳条件

单位定义:在37℃、pH 7.5下,一Sigma单位水解酪蛋白,每分钟产生相当于1.0 mmol (181 µg) 酪氨酸的颜色(福林试剂显色)。

以Anson单位报告活性碱性蛋白酶。(一个Anson单位定义为,在特定条件下,以初始速率消化血红蛋白,使每分钟释放的TCA可溶性产物的量以以苯酚试剂显示的颜色与一毫当量的酪氨酸以苯酚试剂(即25℃、pH 7.5和10分钟的反应时间)显示的颜色相同的酶量。)2基于平均值,一Anson单位 = 370个Sigma单位。1

 

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储存和稳定性

枯草杆菌蛋白酶A(货号P5380)以粉末形式供应,基本不含缓冲盐。供应商研究表明,如果在4℃下储存,该固体每年丧失的活性小于10%。应避免在超过20℃的温度下长期储存。

 碱性蛋白酶2.4L(货号P4860)以水溶液形式提供。在2-8℃储存可至少稳定保存一年,在25℃储存可稳定保存3个月。

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溶解性和溶液稳定性

正常使用过程中,枯草杆菌蛋白酶通常可以形成所有浓度的水溶液。出于测定目的,Sigma在含有5 mM醋酸钙、pH 7.5的10 mM醋酸钠缓冲液中测试P5380,并得到澄清溶液。1

在4℃下,该酶在含有0.1 M氯化钙、pH 8.0的0.1 M硼酸盐中的100-200 mg/mL溶液可稳定1-2天。3

据报道,枯草杆菌蛋白酶A在一些有机溶剂(例如无水辛烷)中有活性。4

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产品

货号 产品名称 加入购物车
P5380 地衣芽孢杆菌来源蛋白酶,VIII型,冻干粉,7-15 units/mg固体
P4860 地衣芽孢杆菌来源Alcalase®,≥2.4  U/g
P8038 细菌来源蛋白酶,XXIV型,7-14 units/mg固体,冻干粉
P5459 地衣芽孢杆菌来源蛋白酶,7-15 units/mg蛋白质(缩二脲),丙二醇水溶液
P3910 地衣芽孢杆菌来源蛋白酶,冻干粉,用于总膳食纤维测定,TDF-100A
抑制剂
货号 产品名称 加入购物车
A1153 牛肺来源抑肽酶,冻干粉,3-8 TIU/mg固体
D0879 氟磷酸二异丙酯
P7626 苯甲基磺酰氟≥98.5% (GC)

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References

  1. Sigma quality control.
  2. Supplier information.
  3. P. Boyer, The Enzymes, ed., vol. III, 3rd ed., p. 564.
  4. Zaks, A. and Klibanov, A.M., J. Biol. Chem.263, 3194?3201 (1988).

Additional References
Neidhart, D.J. and Petsko, G.A., Protein Engineering2, 271-276 (1988). Crystal structure of subtilisin Carlsberg. 
Jacobs, Myra, et al., Nucleic Acids Research13, 8913-8926 (1985). Cloning, sequencing and expression of subtilisin Carlsberg. 
Ottesen, M. and Svendsen, I., Methods in Enzymology, XIX, 199. Subtilisins. 
Hannappel, E., et al., Archives of Biochem. Biophysics214, 293-298 (1982). Limited proteolysis of aldolases.