小量细菌基因组试剂盒

用于纯化多种培养细菌的基因组DNA

描述

我们的GenElute细菌基因组试剂盒提供了一种简单方便的技术,可从革兰氏阴性(图1)和革兰氏阳性细菌(图2)中分离出高质量的DNA。该试剂盒结合了硅胶基质系统和融合蛋白模式的优点,无需昂贵的树脂和危险的有机化合物。首先将细菌与合适的酶一起孵育,以确保细胞有效裂解并释放DNA。

快速查找

NA2100NA2110NA2120

流程

首先将细菌与合适的酶一起孵育,以确保细胞有效裂解并释放DNA。然后将细菌溶解在含有离液盐的溶液中。DNA与硅胶基膜结合,通过离心除去剩余的裂解物。洗涤去除污染物后,用缓冲液洗脱DNA,并收集到试管中。洗脱的DNA长度可达50kb(图3),适用于限制性内切酶酶切、PCR和Southern印迹等下游应用。

GenElute细菌基因组DNA试剂盒包含所需的所有试剂,用以纯化革兰氏阴性菌基因组DNA(图3)。然而大多数革兰氏阳性菌需要用溶菌酶(产品编号L7651),这种酶必须单独购买,来彻底裂解厚厚的肽聚糖细胞壁。每个GenElute试剂盒搭配革兰氏阳性裂解液,作为制备溶菌酶原液的稀释液。

功能和优势

  • 提供革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的方案
  • 纯化的DNA具有介于1.6和1.9之间的A260/A280比率
  • 典型的DNA产量为15微克-20微克(见表1)
  • 溶菌酶稀释液和核糖核酸酶A溶液提供了额外的便利

存储:室温
R22-36/37/38-42 S:26-36
 

我们的GenElute细菌基因组试剂盒提供了

订单信息

 

产品编号 名称 纯化
/试剂盒
技术
手册.pdf

协议.pdf
NA2100 GenElute细菌基因组DNA试剂盒 10 X X
NA2110 GenElute细菌基因组DNA试剂盒 70 X X
NA2120 GenElute细菌基因组DNA试剂盒 350 X X


居民申请表

纯化的DNA适用于限制性内切酶酶切、PCR、Southern印迹等下游应用。


示例数据

GenElute细菌基因组DNA试剂盒的典型DNA产量。
 

资料(或数据)来源 媒体类型 过夜培养量 外径600每毫升过夜培养物* 典型的DNA产量(用核糖核酸酶处理)**
大肠埃希菌,
ATCC#11775
超级肉汤
(产品编号.T9179)
0.8 毫升 12.5 20 微克
大肠埃希菌,
ATCC#11775
LB肉汤培养基
(产品编号L7658)
1.5毫升 5 20 微克
大肠埃希菌,
DH10B
LB肉汤培养基
(产品编号.L7658)
1.0 毫升 5 15 微克
荧光假单胞菌,
ATCC#13525
超级肉汤
(产品编号T9179)
0.8 毫升 16 25 微克
荧光假单胞菌,
ATCC#13525
营养肉汤
(产品编号.N7519)
1.5毫升 2 20 微克
枯草芽孢杆菌,
ATCC# 6051
Todd Hewitt肉汤
(产品编号T1438)
1.5毫升 6 25 微克
变形链球菌,
ATCC#35668
Todd Hewitt肉汤
(产品编号T1438)
1.5毫升 1.3 15 毫克***
表皮葡萄球菌,
ATCC#14990
营养肉汤
(产品编号N7519)
1.5毫升 2 8 毫克****

*已根据稀释系数调整价值。

**基于进行两个200微升洗脱。

***溶菌酶溶液中加入250单位/毫升变溶菌素(产品编号:M9901).

***溶菌酶溶液中加入200单位/毫升溶葡萄球菌酶(产品编号:L7386).

返回顶部

革兰氏阴性细菌基因组DNA分离试剂盒的比较。
 

革兰氏阴性细菌基因组DNA分离试剂盒的比较。

图1。琼脂糖凝胶分析从指示的革兰氏阴性菌中分离的基因组DNA,使用基因工程细菌基因组DNA试剂盒与其他供应商的试剂盒进行比较。在1%,1X TBE琼脂糖凝胶上分离等比例的DNA。The Lambda Hind III阶梯(产品编号:D9780)被用作标准尺寸(米)。。


革兰氏阳性菌基因组DNA分离试剂盒的比较。
 

革兰氏阳性菌基因组DNA分离试剂盒的比较。

图2。琼脂糖凝胶分析从指示的革兰氏阴性菌中分离的基因组DNA,使用基因工程细菌基因组DNA试剂盒与其他供应商的试剂盒进行比较。在1%,1X TBE琼脂糖凝胶上分离等比例的DNA。The Lambda Hind III阶梯(产品编号:D9780)被用作标准尺寸。


细菌DNA的脉冲场凝胶电泳(PFGE)。
 

细菌DNA的脉冲场凝胶电泳(PFGE)。

图3。使用GenElute细菌基因组DNA试剂盒从各种细菌种类中分离纯化基因组DNA。150伏下,,使用BioRad CHEF DRII系统,将1微克来自各细菌样品的DNA,在0.5X TBE的1%琼脂糖凝胶上解析16小时。初始脉冲时间为2秒,最终脉冲时间为13秒,启动比为1.0,泵速设定为70,PFGE在4℃下进行。标记(M)代表0.1-200kb脉冲标记(产品编号:D2291).


溶菌酶可以通过上下吸移混合物而不是涡旋更容易溶解。这也减少了涡流可能产生的泡沫。.

 

返回顶部