DNA和RNA纯化

哺乳动物基因组DNA小量制备试剂盒

用于纯化多种哺乳动物来源的基因组DNA

说明:GenElute哺乳动物基因组DNA纯化试剂盒提供了从各种哺乳动物细胞和组织中分离纯的高分子量DNA的简便方法。(图1图2)。这些试剂盒使用专门为基因组DNA纯化而选择的硅胶膜,采用方便的离心柱形式。

快速浏览:G1N10G1N70G1N350

操作步骤:用含离液盐的缓冲液裂解哺乳动物细胞和组织,以确保大分子的变性。DNA与旋转柱膜结合,并通过离心去除剩余的裂解物。过滤柱去除细胞碎片。洗涤去除污染物后,用缓冲液将DNA洗脱到收集管中。纯化的DNA可用于测序、克隆、印迹、限制性消化、连接和PCR等诸多许多应用中。

特点和优点:

  • 2 x 106个培养细胞通常产生25 μg DNA或者25 mg组织产生30 μg DNA(图4
  • 裂解后仅需20分钟准备
  • 纯化的基因组DNA具有1.6-1.9的A260/A280
  • 不需要机械均化
  • 比其他领先供应商提供的纯化制剂多40%


储存:室温

R: 20/21/22 S: 26-36

应用:纯化的DNA可用于测序、克隆、印迹、限制性消化(图3)、连接和PCR(图4)等诸多应用。

GenElute Mammalian Genomic Flow Chart




利用基因组DNA小量制备试剂盒可节省时间!

与市场上的大多数试剂盒不同,Sigma试剂盒中的洗脱缓冲液不必加热。

 

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样品数据


 

表1. 使用GenElute哺乳动物基因组DNA纯化试剂盒(用RNA酶和蛋白酶K处理)的产量。
材料 典型产量
Jurkat 细胞(人类) 2 x 106 Cells 5 - 10 µg
HEK293 细胞(人类) 2 x 106 Cells 10 - 20 µg
HeLa 细胞(人类) 2 x 106 Cells 15 - 25 µg

小鼠胰腺组织

20 mg 10 - 25 µg
小鼠脾组织 10 mg 10 - 25 µg
小鼠胸腺组织 16 mg 10 - 25 µg
小鼠肺组织 20 mg 5 - 15 µg
小鼠脑组织 16 mg 5 - 15 µg
小鼠肾组织 20 mg 10 - 25 µg
小鼠肝组织 25 mg 10 - 30 µg

 

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由哺乳动物组织中纯化的基因组DNA.

图1. 由哺乳动物组织中纯化的基因组DNA。用GenEluteTM哺乳动物基因组DNA小量制备试剂盒分离来自指定小鼠组织的纯化基因组DNA。在0.8%琼脂糖凝胶上分析基因组DNA(200 ng/泳道)以阐明产量和完整性。标记物是用Hind II消化的λDNA。(货号D9780

Genomic DNA purified from mammalian tissues

使用GenElute哺乳动物基因组DNA纯化试剂盒从细胞中纯化基因组DNA。


图2. 由哺乳动物细胞纯化的基因组DNA。
 用GenElute哺乳动物基因组DNA纯化试剂盒从2x106个指定来源的细胞中分离纯化的基因组DNA。在0.8%琼脂糖凝胶上分析基因组DNA(200 ng/泳道)。标记物是Lambda Hind III消化液 (0.5-23 kb)。

Genomic DNA purified from mammalian cells

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用GenElute哺乳动物基因组DNA纯化试剂盒纯化的基因组DNA适用于限制性内切酶消化。


图3.
 基因组DNA (200 ng) 用EcoR I消化(20 μl 10个单位,37℃消化4小时),随后在0.8%琼脂糖凝胶上电泳(150 ng/泳道)。未消化的DNA在相同的条件下孵育,但不含EcoR I。标记物是Lambda Hind III消化液 (0.5-23 kb)。

 Mammalian Restriction Enzyme

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产量比较

图4. 与使用2 x 200 μl洗脱液的领先供应商Q相比的基因组DNA产量.

GenElute Mammalian Genomic Yield



订购信息

货号 名称 每个试剂盒可纯化的次数 技术手册.pdf 简要方案.pdf
G1N10 哺乳动物基因组DNA小量制备 10 X X
G1N70 GenElute哺乳动物基因组DNA小量制备 70 X X
G1N350 GenElute哺乳动物基因组DNA小量制备 350 X X

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