抗生素 - 植物组织培养方案

一般来说,抗生素需要储存在冰箱或冰柜中。氨基糖苷类(如卡那霉素)具有吸湿性,应贮存在干燥器中。不建议在-20°C储存大量粉状抗生素,其会增加水冷凝的风险。所有抗生素应避免阳光直射。利福平和两性霉素B对光非常敏感,应存放在黑暗处。

抗生素容器的标签通常以μg/ mg或单位/ mg粉末的形式表示产品的活性(效能,每份粉末的活性物质的量)。某一种抗生素的粉末用量会根据产品的活性而有所改变。例如,如果一种产品的活性为1000单位/毫克,则其会比活性为2000单位/毫克的相同产品需要高两倍的粉末量。

抗生素的使用量(mg)、粉末的活性(μg/ mg或单位/ mg)、制备所用溶液的体积(ml)、以及所需抗生素的浓度(μg/ ml) 之间的关系是:

使用量=(体积×浓度)/活性

大多数抗生素溶液在-0°C能够稳定保存长达3个月。但是,利福平应该在每次使用前进行制备。大多数抗生素是热不稳定的,应使用最小化吸附的膜(例如醋酸纤维素)进行过滤除菌。

选择抗生素的制备

制霉菌素的制备(货号 N9767)

制霉菌素是由链霉菌属(Streptomyces spp)产生的抗真菌剂。在水悬浮液状态,其表现出杀真菌和抑真菌活性。制霉菌素仅微溶于水和乙醇。无菌悬浮液可以通过在少量二甲基亚砜(DMSO)(以润湿粉末)中对粉末进行表面灭菌,然后将粉末悬浮在无菌水中来制备。 该操作过程应在无菌设备(玻璃器皿等)的无菌条件下进行。

制霉菌素制剂具有热不稳定性。水悬浮液应储存在-0°C避光条件下。制霉菌素悬浮液应保持在约6.5-8.0的pH范围内,在pH低于2.0或高于9.0时会导致其分解。

羧苄青霉素制剂(货号 C3416)

羧苄青霉素是一种白色至灰白色吸湿性粉末,可溶于水或酒精中。羧苄青霉素对革兰氏阴性菌最有效,但对革兰氏阳性菌也有一定的作用。 据报道,羧苄青霉素水溶液在室温下可保持稳定长达24小时,并且可在0-5℃下储存多达72小时。

头孢噻肟制剂(货号 C7039)

头孢噻肟是一种白色至灰白色粉末,易溶于水。新鲜制备的溶液颜色的变化不一定表明效力的变化。将本产品存放在避光的密闭容器中。 当在0-5℃下储存时,头孢噻肟在pH 4.3-6.2的水溶液可保持稳定达14-21天。头孢噻肟对革兰氏阴性菌最有效。

G418二硫酸盐(货号 G1279)

虽然它与庆大霉素有关,但G418二硫酸盐通常不被用作标准抗生素。其最常见的应用是作为分子生物学选择剂。G418二硫酸盐对细菌、酵母、原生动物、蠕虫和哺乳动物细胞具有毒性。对其的抗性由细菌来源的两个显性基因之一表现,并且该基因可以在真核细胞中表达。

G418二硫酸盐是水溶性的,可以在室温下储存长达1年。水溶液应该进行冷冻保存。选择所需的G418二硫酸盐的量随每种细胞类型和生长周期而变化。虽然正在倍增的细胞会比不在此过程的细胞更易受到影响,但处于对数阶段的细胞仍需要3到7天才能进行细胞选择。

潮霉素B(货号 H9773)

潮霉素B是一种对原核和真核微生物和细胞有效的氨基糖苷类抗生素。与G418二硫酸盐类似,其最常见的应用是作为分子生物学选择剂。用编码潮霉素B磷酸转移酶的hph基因转化的昆虫和哺乳动物细胞对潮霉素B具有抗性。潮霉素B以粉末形式提供。用作选择剂的推荐浓度范围是10 - 400μg/ ml。

原核生物 - 100 µg/ml
低等真核生物 - 200 µg/ml
高等真核生物 - 150-400 µg/ml

有关更具体的应用信息,请参阅相关的科学参考文献。

 

抗生素参考指南

产品 产品编号 摩尔质量 革兰氏阳性菌

革兰氏阴性菌

分枝杆 支原体 对微生物的毒性(μg/ ml) 对植物组织的毒性(μg/ ml) 工作浓度 (μg/ ml)和应用1 产品溶解度 液体储存
羧苄青霉素 C3416 422.4 X XX     500 >1000 up to 500 (CC,PR,EC) Water -0°C
2-8°C
3 days
头孢噻肟 C7039 477.4 X XX     90 >100 up to 500 (CC,PR,EC) Water -0°C
2-8°C
22 days
氯霉素 C1919 323.1 XX XX X X 128 >1 10-35 (TS) EtOH 2-8°C
30 days
G418 二硫酸盐 G1279 692.7             10-500 Water -20°C
6 mo.
硫酸庆大霉素 G1264   X XX   XX 50 >50 up to 250 (CC) Water 2-8°C
12 mo.
潮霉素 B H9773 527.5             100-200 Water 2-8°C
6 mo.
卡那霉素 K1377 582.6 XX XX   XX 100 >2 16 (SSC);
up to 40
(CC,PR,EC)
Water 2-8°C
12 mo.
巴龙霉素 P8692 615.6 XX X           Water 2-8°C
21 days
青霉素G,钾盐 P7794 372.5 XX X     1005   up to 100 Water 2-8°C
7 days
青霉素G,钠盐 P3032 356.4 XX X     1005   up to 100 Water 2-8°C
7 days
利福平 R7382 823.0 XX XX XX   15 >25 50 (TS);
up to 25
(PC,TEC)
DMSO 2-8°C
1 day
万古霉素 V1130 1485.7 XX       5 >100 up to 10 (PC);
up to 40
(cc,EC,STM)
Water 2-8°C
7 days

XX = 对大多数物种有效
X = 对某些物种有效

1应用关键词

:CC =愈伤组织培养; PR =植物再生; EC =子叶,下胚轴或叶盘培养物

 

TS = 转化体选择; SSC =茎节培养; PC =原生质体培养; TEC =块茎外植体培养;

STM = 芽尖微繁殖

 

抗真菌剂参考指南

产品 产品编号 摩尔质量 酵母 霉菌 对微生物的毒性(μg/ ml) 对植物组织的毒性(μg/ ml) 工作浓度 (μg/ ml)和应用1 产品溶解度 液体储存
放线菌酮 C7698 281.4           EtOH 2-8°C
30 days
五氯硝基苯 P8556 295.3   XX       EtOH
DMSO
 
噻菌灵 T5535 201.2   XX       1 N HCl
DMSO
 

XX = 对大多数物种有效
X = 对某些物种有效

1应用关键词:CC =愈伤组织培养; PR =植物再生; EC =子叶,下胚轴或叶盘培养物;

TS = 转化体选择; SSC =茎节培养; PC =原生质体培养; TEC =块茎外植体培养;

STM = 芽尖微繁殖