蛋白定量

蛋白定量工具


可信赖的蛋白检测产品

可信赖的传统蛋白定量技术产品,如BCA和Bradford,以及Lowry、Micro Pyrogallol和FluoroProfile®等总蛋白测定分析替代产品

荧光法

比色法


FluoroProfile 检测法

 FluoroProfile蛋白定量 (FPQ) 试剂盒FP0010

提供完整的蛋白定量检测。FPQ试剂盒比现有的标准比色法(Bradford和二喹啉甲酸 (BCA) )灵敏,而且比其他荧光蛋白检测试剂盒的线性动态范围大。该技术固有的高灵敏度使用户可以简单地稀释可能存在于各种蛋白样品中的潜在干扰化合物。荧光强度与蛋白浓度成正比;因此,蛋白浓度的巨大差异会在荧光强度上产生相应大的差异。此外,FPQ试剂盒可生成直观的结果,而且增强了对仪器变化的鲁棒性。

FluoroProfile Quantification Kit

FluoroProfile 定量试剂盒, FP0010

FluoroProfile使用水溶性荧光团epicocconone,可安全经济地处理。可在20分钟内得到结果,并且荧光团的可逆结合可进行质谱和其他下游检测。


特点和优点

  • 灵敏 - 检测三个数量级以上,低至40 ng/ml
  • 简单 –可在20分钟内获得结果,且6小时内稳定
  • 安全 - 水溶性,可生物降解的荧光团可实现安全经济的处理

成分:

  • FluoroProfile 荧光试剂, 10 ml
  • 定量缓冲液, 10 ml
  • BSA 标准品, 2 mg

 

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FP0010 FluoroProfile Quantification Kit 1 kit

 

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BCA 检测法

蛋白测定是生化研究中最常见的操作之一。二喹啉甲酸 (BCA) 检测法的原理类似于Lowry法,均在碱性条件下形成Cu2+ - 蛋白络合物、随后将Cu2+还原成Cu1+。还原量与存在的蛋白量成正比。研究表明,半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸和肽键能够将Cu2+还原成Cu1+。在碱性环境中,BCA与Cu1+形成蓝紫色络合物,从而为监测蛋白还原碱性Cu2+提供依据。

BCA检测法比双缩脲法或Lowry法更加灵敏和适用。另外,它比Bradford检测法的变异性更小。与其他蛋白检测技术相比,BCA检测法具有许多优点:

  • 颜色络合物稳定
  • 对洗涤剂的敏感度较低
  • 适用于多种蛋白浓度


二喹啉甲酸蛋白测定试剂盒,BCA

200-1000 µg/ml 蛋白

蛋白以浓度依赖性方式将碱性Cu(II)还原成Cu(I)。二喹啉甲酸是Cu(I)的高度特异性显色剂,可形成紫色络合物,其最大吸光度在562 nm处。吸光度与蛋白浓度成正比。这是用于蛋白检测的福林酚试剂的替代试剂。


成分:

  • 二喹啉甲酸溶液
  • 4%(w/v) CuSO4 • 5H2O溶液
  • BSA蛋白标准品
Bicinchoninic Acid Kit for Protein Determination

 

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BCA Bicinchoninic Acid Kit for Protein Determination 1 kit
B9643 Bicinchoninic Acid solution 1 l

 

QuantiPro™BCA检测试剂盒,QPBCA
0.5-30 µg/ml 蛋白

可用于测量非常少量的样品中非常稀的蛋白浓度。管检测可准确地测量0.5至30 µg/ml的蛋白浓度,96或384孔板检测可测量1至20 µg/ml的蛋白浓度。


成分:

  • Quantipro缓冲液QA
  • Quantipro缓冲液QB
  • BSA蛋白标准溶液
  • 4%五水硫酸铜(II) 溶液
QuantiPro BCA Assay Kit

 

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QPBCA QuantiPro™ BCA Assay Kit 1 kit

 

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Bradford 检测法

 Bradford试剂B6916可用于测定溶液中的蛋白浓度。该方法基于染料、亮蓝G和溶液中蛋白之间形成络合物。蛋白 - 染料络合物导致染料的最大吸收从465 nm转移到595 nm。吸收量与存在的蛋白量成正比。Bradford试剂不需要稀释,适用于微量、多孔板和标准检测。使用BSA(牛血清白蛋白)作为蛋白标准品,线性浓度范围为0.1-1.4 mg/ml蛋白。

Bradford试剂与还原剂相容,后者常用于稳定溶液中的蛋白质。 其他蛋白检测方法(Lowry和BCA)与还原剂不相容。如果存在还原剂,应使用Bradford试剂代替这些蛋白检测。但是,Bradford试剂只与低浓度的洗涤剂相容。如果待检测蛋白样品的缓冲液中存在洗涤剂,则建议使用BCA蛋白检测法。

Bradford Reagent

Bradford 试剂, B6916

该蛋白检测基于蛋白质与亮蓝G的络合。将蛋白样品与试剂混合,然后在室温下短暂孵育后在595 nm处读数。



特点和优点:

  • 试剂可直接使用,不需要混合或稀释
  • 显色快。只需孵育5分钟,然后在595 nm处读取样品
  • 还原糖和还原物质以及硫醇不会干扰该试剂
  • 试剂适用于微量 (1-10 μg/ml) 和标准 (50-1400 μg/ml) 检测
  • 可用于微孔板检测

 

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B6916 Bradford 试剂 500 ml

 

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Lowry 检测法

 Lowry检测L3540是定量可溶性蛋白的常用方法。其灵敏、简便且准确,因而成为首选方法。该方法基于两个化学反应:第一个是碱性酒石酸铜与蛋白质的肽键络合,第二个是用福林酚试剂F9252进行还原。该反应产生紫色,可在500和800 nm之间读取吸光度。该测定可直接用蛋白质溶液进行,或者可使用涉及DOC和TCA的沉淀方法。沉淀消除了通常由Tris、硫酸铵、EDTA、蔗糖、柠檬酸盐等其他试剂造成的干扰。然后可使用校准曲线确定蛋白浓度。

Total Protein Kit, Micro Lowry,                                    Peterson's Modification

总蛋白试剂盒,Micro Lowry, Peterson改进, TP0300

Micro Lowry总蛋白试剂盒基于Peterson对micro Lowry方法的改进,利用Lowry 试剂中的十二烷基硫酸钠促进相对不溶性脂蛋白的溶解。1


成分:

  • Lowry试剂,粉末
  • 0.15%脱氧胆酸盐 (DOC) 溶液
  • 三氯乙酸 (TCA) 溶液
  • 福林酚试剂
  • BSA标准品,2 mg

参考文献:

  1. Peterson, G.L., Analyt. Biochem., 83, 346 (1977).

 

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TP0300 总蛋白试剂盒,Micro Lowry,Peterson改良版 1 kit
L3540 Lowry 试剂 5 × 2 g
F9252 福林酚试剂 1 btl
P5619 蛋白标准品 5 × 1 vial

 

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微量焦酚红法

Sigma的微量焦酚红法是对已发表方法的改进。该方法测量焦酚红钼酸盐络合物与蛋白分子的碱性氨基酸基团结合时发生的吸收变化。600 nm处吸光度的增加与样品中的蛋白浓度成正比。该方法的线性范围为0.01-2.0 mg/ml。

Total Protein Kit, Micro Pyrogallol Red Method

总蛋白试剂盒,微量焦酚红法, TP0400

Sigma的微量焦酚红试剂盒含有足够用于240次检测的试剂。该试剂盒包含两瓶120 ml总蛋白试剂T2074和5 ml蛋白标准品溶液


成分:

  • 总蛋白试剂
  • 蛋白标准溶液;人血清白蛋白

参考文献:

  1. Fujita, Y., et al., Color reaction between pyrogallol red-molybdenum (VI) complex and protein. (abstract) Bunseki Kagaku, 32, E379–386 (1983).

 

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TP0400 总蛋白试剂盒,微量焦酚红法 1 kit
T2074 总蛋白试剂,微量焦酚红法 2 × 120 ml
P8369 蛋白标准品溶液 5 ml

 

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