CelLytic B

这是一种高效(图1 a图1 b)而又温和的试剂,用于从细菌(大肠杆菌)中提取蛋白质。该试剂是两性离子去污剂在0 mM Trizma®-HCl(pH 值为8.0)中的专有配方。用CelLytic B处理细菌细胞,可以快速、高效地提取适合亲和纯化和分析的蛋白。CelLytic B是从大肠杆菌中提取和纯化重组蛋白的首选方法。经证实,它可以用于Anti-FLAG®和HIS-Select™纯化系统(图2)。

CelLytic B 2X的强度是CelLytic B的两倍,用于小体积萃取。只需5 ml的CelLytic B 2X试剂,即可从1克湿细胞糊中裂解提取蛋白。因此,当需要更高的蛋白浓度或更低的体积时,可以使用CelLytic B 2X。对于原来的配方CelLytic B,1克湿细胞糊剂需要10-20毫升的试剂。

CelLytic B 10X作为CelLytic B中发现的专有洗涤剂的浓缩混合物,不含任何缓冲成分。因此,用户通过选择对于其感兴趣的蛋白质的提取和纯化理想的洗涤剂浓度和缓冲成分来定制提取试剂。CelLytic B 10X也适用于酵母和哺乳动物细胞的裂解。

功能和优势

  • 基于细菌细胞浆量,具有可伸缩性
  • 不干扰亲和层析、免疫沉淀、Western blotting等下游应用
  • 加入溶菌酶后,经过两次简单的洗涤(使用CelLytic IB,C5236),包涵体准备好重新溶解
  • 与蛋白酶抑制剂、抑制剂混合物、离液剂、盐、螯合剂、还原剂相容
产品# 产品名称 包装大小
B7435 CelLytic B细胞裂解试剂
(标准强度)
50ml
500ml
B7310 CelLytic B 2X细胞裂解试剂
(2x强度)
50ml
250ml
C8740 CelLytic B 10X细胞裂解试剂 10ml
50ml
100ml


使用溶菌酶B、溶菌酶或溶菌酶与超声处理的组合提取1克大肠杆菌细胞糊

 
图1 a——使用溶菌酶B、溶菌酶或溶菌酶与超声处理的组合提取1克大肠杆菌细胞糊。以每克细胞糊10毫升的比例使用CelLytic B。使用1mg/ml溶菌酶(L6876)和10 mM EDTA(E5134)在冰上进行溶菌酶处理15分钟。超声处理时间为冰上2分钟。提取的总蛋白用BCA法测定。


使用CelLytic b、溶菌酶、超声处理、溶菌酶和超声处理的组合或市售的细菌提取试剂提取1克大肠杆菌细胞糊。

 图1 b——使用CelLytic b、溶菌酶、超声处理、溶菌酶和超声处理的组合或市售的细菌提取试剂提取1克大肠杆菌细胞糊。均以每克细胞糊剂10ml的比例使用CelLytic B、竞品N和竞品P。使用1mg/ml溶菌酶(L6876)和10 mM EDTA(E5134)在冰上进行溶菌酶处理15分钟。超声处理时间为冰上2分钟。提取的总蛋白用BCA法测定。


用亲和纯化的CelLytic B制备的大肠杆菌细胞提取物的SDS-PAGE凝胶。

图2——用亲和纯化的CelLytic B制备的大肠杆菌细胞提取物的SDS-PAGE凝胶。泳道1和8:低分子量标志物(M3913)。泳道2、4和6:含有GST、FLAG和HIS标记的融合蛋白的粗制细胞提取物。泳道3、5和7:亲和纯化后的GST、FLAG和HIS标记的融合蛋白。

 

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