解决方案:荧光法Western

荧光法Western blot检测因具有多重检测的方便性而变得越来越受研究者的欢迎,但这种检测仍需要专门优化的工具来获得理想的实验结果。这里我们推荐一个最佳组合,以帮助大家在荧光检测中快速获得稳定、易重复的数据。

Immobilon®-FL荧光专用转印膜

截至2011年初,关于Immobilon®-FL的引用文献已超过9,000多篇

为什么Immobilon®-FL转印膜具有优异的性能?

这种0.45 μm膜是最早被设计用于荧光WB检测的转印膜。自身超低荧光背景保证了在任何荧光检测中,这种膜都能通过降低背景而提高检测的灵敏度。

产品特点

  • 是市售产品中唯一可用于近红外波长(700-800nm)范围检测的转印膜

  • 蛋白载量更大、吸附力更好带来更强的反应信号

  • 背景极低,用于检测低丰度样品时优势更加显著

  • 很好的韧性便于多次杂交操作

欢迎访问www.millipore.com/FLWestern了解更多详细信息。

Bløk®-FL荧光报告专用封闭剂:显著减少噪音背景

封闭印迹膜上所有非特异性结合位点对于避免高背景至关重要。蛋白类的封闭剂,如脱脂奶,覆盖在膜表面,本身会与抗体发生非特异性结合。而且,由于蛋白降解、微生物污染等容易使这些封闭剂变质,而造成性能不稳定。

Bløk®-FL 是如何改善实验结果的?

这种无蛋白化学试剂作为封闭剂不会像牛奶一样在膜表面形成厚而粘稠的一层,对降低背景非常有效。

Bløk®-FL保证最好的信噪比经系列稀释的 EGF刺激的A431细胞的裂解液样品上样(2-0.5μg/道,12-110),两个Immobilon®-FL印迹膜采用图示的封闭剂封闭,抗体检测:(A)1:10,000, anti-GAPDH抗体(目录号MAB374);(B)1:2,000 anti-Actin抗体(目录号MAB1501),采用图示的封闭剂稀释抗体。二抗采用抗小鼠IgG抗体(A)IRDye680或(B)IRDye800,真空干燥1小时后用Odyssey®扫描仪(LI-COR)扫描。

   

产品特点

  • 荧光Western检测专用优化配方,显著降低背景

  • 即用型试剂,方便直接取用

  • 室温下稳定达2年

  • 膜经荧光检测后还可以继续用于染色

 
 
目录号 产品描述 规格
WBAVDFL01 Bløk®-FL Reagent for fluorescence detection 500 mL
IPFL0010 Immobilon®-FL Membrane, 0.45μm
26.5 cm x 3.75 m 
1 roll
IPFL07810 7 x 8.4 cm 10/pk
PFL10100 10 x 10 cm 10/pk
 

不再只为考染而多跑一次胶

Bløk®封闭剂与Immobilon®-PVDF膜组合使用可以使同一张膜在荧光检测后继续用于染色,保存数据。

荧光检测后染色

A431细胞裂解液检测,其中包括新鲜制备样品(跑道2-4)和以前的样品(跑道5-6),统一以总蛋白10μg/跑道上样(左)。采用Bløk®-FL封闭,anti-phosphotyrosine抗体(克隆号4G10)荧光检测。5和6在两种检测中信号均明显弱于3和4。在检测后采用考马斯亮蓝染色(右)能帮助发现是否有上样差异及转膜过程中的差错带来问题。

 

荧光标记抗体

我们提供品种繁多的荧光标记二抗,这些高质量的产品在免疫荧光(IF),免疫组织化学(IH),流式细胞(FC)等检测应用中表现卓越。这些抗体包括各种种属来源的Ig或抗体片段(如Fc或Fab),以不同的荧光基团(包括FITC,DyLight®,Cy染料及罗丹明(TRITC))等标记。查看我们提供的所有二抗及同型对照请访问www.millipore.com/antibodies

  

显示SH-SY5Y 细胞用Hoechst HCS 进行和染色(蓝色)和 Anti-βIII tubulin抗体(目录号05-559)/FITC标记的驴抗小鼠二抗(目录号AP191F)的结合信号(绿色)
显示大鼠 cortex primaryneurons (E18) 用DAPI染色(蓝色)和 Pan Neuronal Marker (目录号MAB2300)/FITC标记的山羊抗小鼠二抗(目录号AP181F) 标志的信号(绿色)

  

目录号 产品名称 规格
IPFL10100 Immobilon FL 10x10cm sheet 10/pk PVDF 0.45μm 10
IPFL20200 Immobilon FL 20x20cm sheet 10/pk PVDF 0.45μm 10
IPFL00010 Immobilon FL 26.5cm x3.75m Roll PVDF 0.45μm 1
IPFL07810 Immobilon FL 7x8.4cm sheet 10/pk PVDF 0.45μm 10
WBAVDFL01 Blok  FL Fluorescent Blocker, 500mL 500ml
AP124F Goat anti-Mouse, FITC conjugate 2 mg
AP182C Donkey anti-Rabbit, Cy3 conjugate 500 μg
AP192C Donkey anti-Mouse, Cy3 conjugate 500 μg
AP182B Donkey anti-Rabbit, Biotin conjugate 500 μL
AP181SD Goat anti-Mouse IgG, DyLight® 649 conjugate 500 μg
AP192SD Donkey anti-Mouse IgG, DyLight® 649 conjugate 500 μg

*国内常备现货

目录号 产品名称 规格
AP132JD Goat anti-Rabbit IgG, DyLight® 488 conjugate 2 mg
AP132F Goat anti-Rabbit, FITC conjugate 2 mg
AP192F Donkey anti-Mouse, FITC conjugate 500 μg
AP132C Goat anti-Rabbit, Cy3 conjugate 2 mg
AP182F Donkey anti-Rabbit, FITC conjugate 500 μg
AP180C Donkey anti-Goat, Cy3 conjugate 500 μg
AP124C Goat anti-Mouse, Cy3 conjugate 500 μg
AP307F Goat anti-Rabbit, FITC conjugate 1 mL
AP308F Goat anti-mouse, FITC conjugate 1 mL
AP193P Donkey anti-Guinea Pig, HRP conjugate 500 μL
AP147P Rabbit anti-Sheep, HRP conjugate 1.5 mL