MILLIPLEX®在COVID-19及其细胞因子风暴中的研究策略

 

 MILLIPLEX®蛋白多因子检测技术

1.   COVID-19细胞因子风暴研究的重要性

      细胞因子风暴(Cytokine Storm)又名细胞因子综合释放征(Cytokine release syndrome, CRS)。

      细胞因子在特殊情况下,发生短时剧烈的释放,造成大量免疫细胞涌入感染部位,引起人体过度的炎症反应,
      这就产生了所谓的“细胞因子风暴”,简言之:细胞因子风暴就是机体对感染发生的过度反应。

      近期柳叶刀发表的新型冠状病毒感染肺炎相关的文章“Clinical features of patients infected with 2019 novel coronavirus in Wuhan, China.”,
      针对细胞因子风暴对COVID-19患者的影响,使用xMAP®蛋白多因子检测技术进行了27种细胞因子检测并得到如下结果:

  • 在感染了新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的患者中,研究人员发现与健康人对比COVID-19感染患者如下细胞因子表达明显升高:IL-1b, IL-1RA, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, basic FGF, GCSF, GMCSF, IFNγ, IP-10, MCP1, MIP1A, MIP1B,PDGF, TNFα, 以及 VEGF);
  • COVID-19重症患者与轻度感染患者相比中发现其中还有如下细胞因子:IL-2, IL-7, IL-10, G-CSF, IP-10,MCP1, MIP1A, 及 TNFα高水平表达。

    这充分说明:
    a) COVID-19感染患者中出现了“细胞因子风暴”;
    b) 同时也说明了细胞因子风暴的严重程度,与COVID-19患者感染的严重程度之间可能存在相关性。

      在病毒感染所致的肺炎中,细胞因子风暴反应可导致肺炎、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、呼吸衰竭、休克、器官
      衰竭、继发性细菌性肺炎等症状,严重者可能导致死亡。以前在对SARS和中东呼吸综合征患者以及埃博拉病毒感染
      患者观察中,也发现了细胞因子风暴与疾病严重程度之间类似的相关性。

2.   MILLIPLEX®蛋白多因子检测技术

      一般情况下,细胞因子风暴生会造成大量不同种类细胞因子同时分泌,因为发生迅速,并且涉及大量不同种类的细胞因子,
      需要大数据支持,同时检测大量样本来保证结果的可靠性。因此MILLIPLEX®更加适合细胞因子风暴研究。

      MILLIPLEX®技术基于Luminex®xMAP®蛋白多因子检测技术平台,仅需少量样本(仅需25ul)就可以在一个样本反应
      孔内同时检测分析多达几十种生物标志物,使细胞因子风暴研究更加高效。

      MILLIPLEX®特点:

  • 技术特点:
    -  多重检测:Luminex®xMAP®技术可满足同时检测1-500种蛋白(理论值)。
    -  高灵敏度:精密的光学设计提升检测灵敏度,区别衡量样本微小区别,最高可达0.01pg/ml。
    -  快速/高通量:自动化设备高通量的多重检测,每个试剂盒可检测78-80个样本*(*需要跟据具体试剂盒情况而定)。
    -  微量反应体系:10-50μl的样本量使得跟踪研究模型的阶段性变化成为可能,避免个体差异带来的实验误差。
  • n  产品特点:
    -  高质量数据保障:每个试剂盒均配备两个质控品(QC),用于监控标准品以及数据质量。
    -  精准数据结果:每个试剂盒配备相应血清基质,保证精确检测血液中蛋白浓度。
    -  试剂盒特异性:严格检测试剂盒抗体交叉反应。
    -  提供全方位试剂盒检测服务,从样本到数据,不具备仪器平台,也可得到优质检测数据。

3.    MILLIPLEX®在COVID-19疾病相关机理及治疗研究中涉及的领域

  • 细胞因子风暴:COVID-19引起患者发生细胞因子风暴,需要检测不同样本大量细胞因子进行比较确认。
  • 呼吸系统病毒感染研究:COVID-19致病机理以及治疗研究,近期已有大量研究文献发表于《柳叶刀》等医学期刊,在这方研究中,涉及到细胞因子的变化来说明感染的程度,以及在致病机理方面需要检测细胞信号通路等。
  • 肿瘤方面研究:肿瘤患者感染新型冠状病毒研究,目前研究发现肿瘤患者感染COVID-19,病情发展可能更快,恶性程度更高,其中可能会涉及相关炎症细胞因子或者肿循环瘤标志物研究。
  • 疫苗以及药物研究:COVID-19疫苗以及治疗相关药物研究中,在免疫原性及安全性方面等,另外,COVID-19疫苗研究也会涉及到疫苗注射后可能会发生细胞因子风暴的问题。

4.    MILLIPLEX® 在COVID-19细胞因子风暴研究中的相关产品:

  • MILLIPLEX® Human Cytokine/Chemokine/Growth Factor Magnetic Bead Panel A48因子检测试剂盒

    针对于细胞因子风暴研究的快速,多样本数量,大量因子检测需求的特点,{ 默克 }推出可以满足您对于Th1与Th2相关炎症因子检测需求,一次性即可完成48因子检测的试剂盒,快速完成细胞因子风暴研究相关细胞因子检测及鉴定。

MILLIPLEX® Human Cytokine/Chemokine/Growth Factor Panel A

(Cat. Nos. HCYTA-60K*;
38因子预混包装: HCYTA-60K-PX38, HCYTA-60K-PXBK38;
48因子预混包装: HCYTA-60K-PX48, HCYTA-60K- PXBK48)

*同时提供1-48因子任意组合因子定制预混。

可检测因子: 见下方表格


*HCYTA-60K标准曲线检测示例数据采用4°C,16-18小时过夜孵育检测方案

使用值得您信赖的MILLIPLEX®构建数据分析规范,确保随着时间的推移,检测性能保持一致不变。 

 

Analyte  Standard Curve Range
(pg/mL)
Sensitivity: minDC
(pg/mL)*
 sCD40L 13 – 200,000 5.65
 EGF°  3 – 50,000 3.2
 Eotaxin° 3 – 50,000 3.08
 FGF-2 26 – 400,000 22.3
 FLT-3L 0.96 – 15,000 0.84
 Fractalkine 32 – 500,000 29.75
 G-CSF° 4.8 – 75,000 3.76
 GM-CSF° 2.6 – 40,000 1.55
 GROα 1.3 – 20,000 1.05
 IFNα2° 8 – 125,000 6.56
 IFNγ° 1.3 – 20,000 0.86
 IL-1α° 4.8 – 75,000 2.27
 IL-1β° 1.6 – 25,000 0.52
 IL-1RA°  1.6 – 25,000 1.29
 IL-2°  0.64 – 10,000 0.28
 IL-3°  1.3 – 20,000 0.28
 IL-4°  0.64 – 10,000 0.2
 IL-5°  0.64 – 10,000 0.17
 IL-6°  0.64 – 10,000 0.14
 IL-7°  0.64 – 10,000 0.14
 IL-8°  0.64 – 10,000 0.52
 IL-9 0.64 – 10,000 3.05
 IL-10° 2.6 – 40,000 0.91
 IL-12 (p40)° 6.4 – 100,000 3.24

 

 

Analyte Standard Curve
Range (pg/mL)
Sensitivity:
minDC (pg/mL)*
IL-12 (p70)° 3 – 50,000 0.88
IL-13° 6.4 – 100,000 2.58
IL-15° 3 – 50,000 0.74
IL-17A° 1.3 – 20,000 0.71
IL-17E/IL-25° 40 – 625,000 19.77
IL-17F° 32 – 500,000 28.63
IL-18° 0.64 – 10,000 0.53
IL-22° 13 – 200,000 12.68
IL-27 16 – 250,000 50.78
IP-10/CXCL10° 2.6 – 40,000 2.13
MCP-1° 3 – 50,000 3.05
MCP-3 8 – 125,000 8.61
M-CSF° 40 – 625,000 31.95
MDC 0.64 – 10,000 0.42
MIG° 6.4 – 100,000 3.98
MIP-1α° 3 – 50,000 3.82
MIP-1β° 0.38 – 6,000 0.37
PDGF-AA° 13 – 200,000 10.33
PDGF-AB/BB° 9.6 – 150,000 16.39
RANTES° 1.3 – 20,000 1.58
TGFα 1.3 – 20,000 0.97
TNFα° 6.4 – 100,000 5.39
TNFβ° 1.6 – 25,000 0.8
VEGF-A° 2.6 – 40,000 0.98

MILLIPLEX®其他细胞因子风暴研究相关试剂盒
 

MILLIPLEX® Kit Cat. No.
Human Cytokine/Chemokine Panel II HCYP2MAG-62K
Human Cytokine/Chemokine Panel III HCYP3MAG-63K
Human Cytokine/Chemokine Panel IV HCYP4MAG-64K
Human High Sensitivity T cell Panel HSTCMAG-28SK (96- well)
HSTC384-28K (384-well)
Human Th17 HTH17MAG-14K
Human CD8+ T cell Panel HCD8MAG-15K
Human Soluble Cytokine Receptor HSCRMAG-32K
Human Cytokine/Chemokine Panel I HCYTOMAG-60K

 

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MILLIPLEX®试剂盒的生产符合ISO 9001-2015标准认证,仅供研究使用(RUO),不用于临床或医疗诊断。