用于分化和检测大肠杆菌和其他大肠菌群的选择性生长培养基

By: Jvo Siegrist, AnalytiX Volume 8 Article 4

 大肠杆菌的选择性生长培养基大肠杆菌和其他大肠菌群是食品、
 职业与环境安全等分析生物学最重要领域中病原体存在的重要指示生物。

Jvo Siegrist, Product Manager Microbiology ivo.siegrist@sial.com

 

 大肠杆菌:粪便污染的指示生物

大肠菌群是动物肠道菌群的正常组成,呈杆状,革兰氏阴性,非孢子形成的兼性厌氧菌。当在35-37℃孵育时,它们发酵乳糖产生酸和气体。虽然常见于湖泊、河流、游泳池和便源土壤,但大多数情况下大肠菌群并不会引起疾病。不过它们被用作粪便来源的其他致病生物的指示物。大肠菌群最常见的菌属是柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、埃希氏菌属、克雷伯氏菌属和沙雷氏菌属。

大肠杆菌(图1)是最著名的大肠菌群,也是粪便污染的重要指标,因为它几乎仅发现于粪便中。偶然暴发的食物中毒与某些引起胃肠炎的大肠杆菌菌株有关,例如血清型O157:H7。大肠杆菌是杆状细菌,与大多数其他大肠菌群的区别在于它们在44℃下发酵乳糖的能力,以及它们在某些培养基上的生长特性。大肠杆菌易于培养,常用于分子生物学。

 

粪便污染的指示生物

图1. 大肠杆菌

 

 大肠杆菌的选择性生长培养基

微生物培养基不仅用于培养微生物,而且,基于其生物化学的某些独特性或与众不同的方面,还被用于选择或鉴定特定类型的微生物。大多数这种所谓的“选择性生长”培养基含有蛋白质来源,通常是酪蛋白的水解物、以及可发酵的糖(如乳糖或葡萄糖)。有时候可通过添加指示剂(例如中性红或溴甲酚紫)来检测发酵过程产生的酸。

Sigma-Aldrich提供的新一代选择性培养基使用生色和荧光底物(图2)。这些培养基以β-D-葡糖醛酸酶(GUD)的存在指示大肠杆菌,以β-d半乳糖苷酶的存在指示其他大肠菌群。GUD催化β-D-吡喃葡糖醛酸水解,生成相应的糖苷配基和D-葡糖醛酸。GUD存在于94-96%的大肠杆菌菌株中,但也存在于一些沙门氏菌、志贺氏菌和耶尔森氏菌属中。(1-3) 有范围广泛的培养基可供选用,它们使用各种底物来检测大肠杆菌和大肠菌群(表1)。培养基还配用多种补剂(例如胆汁盐、亮绿、十二烷基硫酸钠和其他物质)来增强其选择性。

 

HiCrome™M-TEC琼脂,用于通过膜过滤技术分化和计数水中的耐热大肠杆菌

图2. HiCrome™M-TEC琼脂,用于通过膜过滤技术分化和计数水中的耐热大肠杆菌。大肠杆菌菌落呈蓝色,因为色原体X-葡糖苷酸被β-葡糖醛酸酶切割。

有关我们的生长和选择性培养基以及我们的其他微生物学产品和资源的完整目录,请访问我们的网站www.sigmaaldrich.com/microbiology

 

表1 用于检测、计数和鉴定大肠菌群和大肠杆菌的专用培养基
 

培养基系列 产品编号 名称
用于鉴定的非选择性培养基 A0715 安德拉德蛋白胨水
  28943 安德拉德蛋白胨水,Vegitone
  70133 血琼脂(基础)
  36408 溴甲酚紫肉汤
  22520 中国蓝乳糖琼脂
  27048 克里斯滕森尿素琼脂
  55420 CLED琼脂
  D2935 脱羧酶肉汤基础,Moeller
  31436 DEV乳糖肉汤
  31437 DEV乳糖蛋白胨肉汤
  31406 DEV色氨酸肉汤
  16447 葡萄糖溴甲酚紫琼脂
  73009 HiCrome™ECC琼脂
  00563 HiCrome™MM琼脂
  16636  HiCrome™UTI琼脂,改良版
  60787 Kligler琼脂
  94792 乳糖肉汤
  70142 乳糖肉汤
  19057 乳糖肉汤, Vegitone
  62915 赖氨酸铁琼脂
  M8802 丙二酸酯肉汤
  39484 甲基红-伏-普二氏肉汤
  69150 甲基红-伏-普二氏盐水肉汤
  17171 矿物质改良谷氨酸肉汤(基础)
  M1053 运动性测试培养基
  17178 粘酸肉汤
  17165 MUG胰蛋白胨黄豆琼脂
  72548 硝酸盐肉汤
  75315 OF测试营养琼脂
  51413 平板计数MUG琼脂
  85463 Simmons柠檬酸盐琼脂
  44940 三糖铁琼脂
  93657 胰蛋白胨培养基
  07507 胰蛋白胨水
  39964 胰蛋白胨水,Vegitone
  51463 尿素肉汤
用于分化的选择性培养基 16016 BRILA MUG肉汤
  31432 DEV ENDO琼脂
  44657 ECD MUG琼脂
  70186 EMB琼脂
  E5399 Endo琼脂
  70137 ENDO琼脂(基础)
  48716 Gassner琼脂
  81938 HiCrome™大肠菌群琼脂
  70722 HiCrome™大肠杆菌琼脂B
  85927 HiCrome™ECC选择性琼脂
  09142 含有MUG的HiCrome™ECD琼脂
用于分化的选择性培养基 83339 HiCrome™Mac Conkey山梨糖醇琼脂
  90924 HiCrome™M-TEC琼脂
  51489 HiCrome™快速大肠菌群肉汤
  54232 含有Tergitol®-7的乳糖TTC琼脂
  62087 Levine EMB琼脂
  62634 LST-MUG肉汤
  70143 Mac Conkey琼脂1号
  19352 Mac Conkey琼脂1号,Vegitone
  94216 MacConkey琼脂,含有结晶紫、氯化钠和0.15%胆汁盐
  M8302 MacConkey琼脂,含有结晶紫、氯化钠和0.15%胆汁盐
  70144 MacConkey肉汤
  75717 MacConkey肉汤紫
  16377 MacConkey肉汤紫
  63014 MacConkey MUG琼脂
  51405 MacConkey琼脂(无盐)
  88902 MacConkey山梨糖醇琼脂
  39734 膜乳糖葡糖苷酸琼脂
  85766 m-Endo琼脂LES
  96961 M-FC琼脂
  19958 m-FC琼脂板(直径55 mm)
  43291 M-FC琼脂,Vegitone
  07348 改良月桂基硫酸盐肉汤
  M1678 MUG EC肉汤
  92435 TBX琼脂
  86455 Tergitol®-7琼脂
  70188 紫红胆汁琼脂
  42376 紫红胆汁琼脂,Vegitone
  79873 紫红胆汁葡萄糖琼脂
  70189 紫红胆汁葡萄糖琼脂
  17213 紫红胆汁葡萄糖琼脂(无乳糖)
  53605 紫红胆汁葡萄糖琼脂(无乳糖),Vegitone
  41270 紫红胆汁乳糖葡聚糖琼脂
  95273 VRB MUG琼脂
  17215 WL鉴别琼脂
  76721 XLT4琼脂(基础)
选择性培养基 17112 A1肉汤
  16025 亮绿胆汁乳糖肉汤
  44653 EC肉汤
  44655 ECD琼脂
  61749 月桂基硫酸盐肉汤
  17349 月桂基硫酸盐肉汤
  17162 M Endo肉汤
  17184 含亮绿的M HD Endo肉汤
  49522 改良月桂基硫酸盐肉汤,Vegitone
  69965 Mossel肉汤
 

 材料

     

 参考文献

2. Hartman, P. A. The MUG glucuronidase test for E. coli in food and water. In Rapid Methods and Automation in Microbiology and Immunology; Turano, A. Ed.; Brixia Academic Press: Brescia, Italy, 1989; 290–308.
M Manafi
International Journal of Food Microbiology 1996-08-01
Rapid detection and identification of microorganisms is extremely important in many fields of applied and research microbiology. In general, fluorogenic and chromogenic substrates have proved to be a powerful tool, utilizing specific enzymatic activities of certain microorganisms, either in parallel with or instead of traditiona...阅读更多