比色碱性磷酸酶和过氧化物酶底物检测系统

BioFiles 2008, 3.4, 6.

 碱性磷酸酶的底物

硝基蓝四唑(NBT)与碱性磷酸酶底物5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐(BCIP)一起用于西方蛋白印迹和免疫组织染色程序。这些底物系统产生不溶的NBT二甲终产物,其颜色为蓝至紫色,可以通过视觉观察到。用BCIP / NBT进行的免疫组织化学染色需要有机封固剂,并且可以用核固红或浅绿色复染。BCIP / NBT法通常比核固红法更敏感。我们还提供BCIP类似物的专有配方,利用NBT和INTX生产专门用于ELISA应用的可溶性终产物。

硝基蓝四唑(NBT)与碱性磷酸酶底物5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐(BCIP

固红TR / 萘酚AS-MX和TR磷酸盐(4-氯-2-甲基苯重氮 / 3-羟基-2-萘甲酸2,4-二甲基苯胺磷酸盐)底物系统,经配制和优化用于免疫组织学和西方蛋白印迹技术,例如作为碱性磷酸酶活性检测的沉淀底物。固红系统产生不溶的大红色终产物。用固红TR / 萘酚AS-MX染色的载玻片必须用水性封固剂盖住,因为反应产物是醇溶性的。

固红TR / 萘酚AS-MX和TR磷酸盐(4-氯-2-甲基苯重氮 / 3-羟基-2-萘甲酸2,4

当用碱性磷酸酶水解时,pNPP底物产生黄色终产物对硝基苯酚。由于该系统形成可溶性终产物,因此适用于ELISA,但不推荐用于印迹法或组织化学。这些产品是含有p-NPP的即用型缓冲碱性磷酸酶底物溶液。可溶性黄色终产物在405 nm处吸收。加入3 M氢氧化钠溶液可以停止反应。使用pNPP的ELISA应用,可以在定时测定中读数,也可用碱性溶液停止反应来延迟读数。已停止的反应的吸光度也在405 nm处读数。对于ELISA应用,通常在ELISA板的每个孔中加入200微升底物,并用50微升3 M NaOH溶液停止反应。
 

 材料