层粘连蛋白细胞附着实验方案

来源:George SitterleyBioFiles 2008, 3.8, 11.
 

BioFiles 20083.8, 11.

 

层粘连蛋白(货号:L2020L6274

必须为每个细胞系和应用确定最佳附着条件。

  1. 在2-8℃下缓慢解冻层粘连蛋白以避免胶凝。
  2. 在平衡盐溶液中稀释,并以最小体积涂覆培养表面。
  3. 在加入细胞和培养基之前至少晾干45分钟。

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货号:L2020(层粘连蛋白)

问题1)我可以在聚L-赖氨酸上涂覆层粘连蛋白以获得更好的粘附吗? 

回答1)当涂覆在神经干细胞(神经球)的盖玻片或载玻片上时,请遵循以下程序。先用100 μg/mL聚L-赖氨酸(货号:P5899)预先涂覆盖玻片。将其在室温下孵育30分钟或更长时间。用无菌水洗涤盖玻片并使其干燥。它们可以保存在室温下直到准备使用(最长保存1个月)。然后用已经预热的30-50 μL层粘连蛋白(50 μg/mL)涂覆盖玻片。在37°C孵育30分钟。除去层粘连蛋白,并用DME(50 μL)洗涤两次。将细胞添加到盖玻片上。

问题2)该产品的纯度是多少?

回答2)我们不确定该产品的纯度。运行SDS PAGE凝胶,花纹(3个条带)与过去的批次相当。

 

 材料