牛血清来源白蛋白

货号 B2518

CAS号: 9048-46-8
别名:牛血清白蛋白;牛血浆白蛋白;BSA

 

结构

BSA的分子量常被引用为66,1201或66,2672,但在1990年修订为66,4303。所有三个值均基于发表时可获得的氨基酸序列信息。BSA是由约583个氨基酸残基组成,不含碳水化合物的单一多肽链。在pH 5-7时,它含有17个链内二硫键和1个巯基。1,3

 

物理属性

 

25°C时水中pI:脂肪酸去除8 - 5.3, 内源性材料5,6,7 – 4.7; 4.9

 

1%溶液pH1,4:5.2-7

 

旋光度:1,9 [α]259: -61°; [α]264: -63°

 

托克斯半径 (rs):10 3.48 nm

 

沉淀常数,1 S20,W X 1013

4.5 (monomer), 6.7 (dimer)

扩散常数,1 D20,W X 107

5.9

微分比容,1 V20

0.733

特性黏度,1 η

0.0413

摩阻比,1 f/f0

1.30

整体尺寸,1 Å

40 X 140

折射率增量1 (578 nm) X 10-3

1.90

光学吸光度,1

0.667

平均残基旋光率,1 [m']233

8443

平均残基椭圆率1

21.1 [θ]209 nm; 20.1 [θ]222 nm

预计α-螺旋,1 %

54

预计β-形,1 %

18

 

溶解度/溶液稳定性

白蛋白易溶于水且只能通过高浓度的中性盐(如硫酸铵)沉淀。BSA溶液稳定性极佳(特别是溶液以冷冻分装液形式储存时)。事实上,白蛋白经常用作其他溶解蛋白(如不稳定酶)的稳定剂。然而,白蛋白很容易通过加热发生凝固11。当加热到50°C或更高温度时,白蛋白会很快形成疏水性聚集体,且在冷却后不会转化为单体。4 在较低温度下,也很可能发生聚集,但速度相对较慢。

 

制备方法

A.  过去1,4 :白蛋白的分离和纯化相对简单。最早的分离方法之一主要利用血清对水的广泛透析。该过程去除了大多数球蛋白。第二种方法是利用白蛋白在低至中等硫酸铵浓度下的良好溶解性,通过降低pH实现沉淀。此外,还可使用电泳分离以及亲和色谱法制备。这些方法均不适合大规模生产

B.  初步分离:通过热处理或乙醇沉淀实现初步分离。如今绝大多数商用的制备方法都是基于由E. J. Cohn及其助理在1940年代开发的乙醇沉淀法(“Fraction V”可生成纯度约为96%的白蛋白)或热处理。12

C.  进一步纯化:1,4 通过结晶、制备电泳、离子交换色谱、亲和色谱(如ConA-琼脂糖去除糖蛋白)、热处理(去除球蛋白),低pH处理,木炭处理、有机溶剂沉淀(即异辛烷)及低温处理可更进一步去除杂质。13 木炭处理和有机溶剂沉淀可去除脂肪酸。13

 

产品描述/用途14

白蛋白是一组在哺乳动物体液和组织及部分植物种子中大量存在的酸性蛋白质。不同于球蛋白,白蛋白分子量相对较低,可溶于水,易结晶并含有过量酸性氨基酸。血清和血浆白蛋白不含碳水化合物,占所有蛋白的55-62%。

白蛋白可结合水、Ca2+、Na+和K+。由于疏水性裂缝,白蛋白可结合脂肪酸、胆红素、激素和药物。白蛋白的主要生物学功能是调节血液的胶体渗透压。人和牛白蛋白含有16%的氮,通常用作蛋白校准研究的标准品。白蛋白可用于溶解脂质,并用作免疫印迹或ELISA应用中的封闭剂。不含球蛋白的白蛋白适用于不存在其他蛋白的应用(如电泳)。

 

选择产品

有关每种产品的完整说明,请参阅下表。根据客户提交、文献报告和Sigma自身的使用,下表列出了已成功用于特定应用的产品货号。该列表并不全面,可能经常替换为未列出的货号。

 

应用 货号
抗体纯化 A2508
结合及转移研究 A4378A7030A0281A3675A3902A6003
血液储存试剂 A2153A4503A7888A3294A3912A7906A7030
培养基(微生物) A2153A4503A3294A3912A7906A9430A7638A6003
细胞培养(通用) A8806A9418
电泳(分子量标准品) A7517
ELISA(封闭剂) A2153A4503A4378A7030A9430A3902
ELISA(非特异性结合) A3294
酶体系 A2153A4503A7888A3294A3912A4378A7906A7030A9430A7638A3675
半抗原载体 A7030A6003A0281
免疫细胞化学 A9647A7906A6793
免疫血液学 A2153A4503A7888A3294A3912A4378A7906A7030A0281A6003
促有丝分裂检测 A2058
分子生物学 B251815B889415B6917B8667B4287
蛋白基质或填料 A2153A4503A3912A4378A7906A7030
蛋白添加剂(对照) A2153A4503A4378A7906A7030A3675
蛋白标准品(分子量、氨基酸、氮) A2153A4503A4378A7030
RIA系统 A7888A4378A7030A3675A3902
血清学 A4503A3912A4378A7906A7030A9430A3675
 

 

参考文献

  1. The Plasma Proteins: Structure, Function and Genetic Control, 2nd ed., Frank W. Putnam, ed., Vol. 1, p. 141, 147, Academic Press, New York (1975).
  2. Reed, R.G. et al., Biochem. J., 191, 867 (1980).
  3. Hirayama, K., BBRC, 173(2), 639 (1990).
  4. Our internal data.
  5. Dawson, R.M.C. et al., Data for Biochemical Research, 3rd ed., p. 381, Clarendon Press, Oxford (1993).
  6. Malamud, D. and Drysdale, J.W., Anal. Biochem., 86, 620 (1978).
  7. Righetti, P.G. and Caravaggio, T., J. Chromatog., 127, 1 (1976).
  8. Kaplan, L.J. and J. F. Fostes. et al., Biochem., 10(4), 630-636 (1971).
  9. CRC Handbook of Biochemistry: Selected Data for Molecular Biology, H.A. Sober, ed., p. C-56, The Chemical Rubber Company, Cleveland (1968).
  10. Axelsson, I., J. Chromatog., 152, 21 (1978).
  11. Lewis, Sr., R.J. Hawley's Condensed Chemical Dictionary, 12th ed., p. 30, Van Nostrand Reinhold Co., New York (1993).
  12. Cohn, E.J. et al., J. Am. Chem. Soc., 68, 459 (1946).
  13. Saifer, A. and Goldman, L. J. Lipid Res., 2(3), 268 (1961).
  14. Scott, T. and Eagleson, M., Concise Encyclopedia: Biochemistry, 2nd ed., pp. 19-20, Walter de Gruyter, New York (1988).
  15. These products are acetylated to inactivate nucleases commonly found in BSA, and are thus not listed in the table of unmodified BSA's on pp. 4-9 of this data sheet. Since tyrosines in the BSA are also derivatized, these preparations are not recommended for use as protein standards.