Transferpette® 测试指南 (SOP)

1. 引言

DIN EN ISO 8655标准描述了Transferpette®.活塞式移液器的设计及测试。下列测试指南说明了在作业中如何应用ISO标准。另外还遵循了 DKD 指引 DKD-R 8-1。

我们建议每隔3-12月测试一次活塞式移液器。这个时间间隔可根据个体要求相应调整。例如,当工作非常频繁或者使用腐蚀性试剂时,应该较频繁地测试仪器。

这些说明还可用作监督测试仪器是否符合DIN EN ISO 9001、DIN EN ISO 10012和DIN EN ISO/IEC 17025等标准的依据。

对于DIN EN ISO 9001、DIN EN ISO 10012、DIN EN ISO/IEC 17025和GLP指引所要求的定期检查,BRAND® 还额外提供校准服务。您的仪器在几天内即可返回,而且附有测试报告。欲悉详情,请联系实验室器皿供应商。

2. 准备测试和目检

2.1 仪器标识

  • 读取仪器的类型和标称容量。⇒ 输入到测试记录 (1)。
  • 读取序号(印在把手上)。⇒ 将序号输入到测试记录 (1)。
  • 读取客户标识(如果有)。⇒ 将标识输入到测试记录 (1)。

2.2 Transferpette® 的最低配置

  • Transferpette® ⇒ 只使用制造商的原装零件。
  • 移液器吸头 ⇒ 只使用合适的吸头。为了获得最佳结果,请使用BRAND® 原装移液器吸头。
  • 校准部件(固定量程)⇒ Transferpette® 9/93 及之后制造的版本。

2.3 清洁

建议:在清洁之前先调节仪器(如果找到)。

  • 清洁移液管杆。⇒ 不得残留试剂!

⇒ 用软布擦干净。

  • 充分清洁外部。⇒ 轻微脏污是允许的。
  • 有剩余液体渗入仪器吗?⇒ 拆卸仪器并予以清洁

⇒ 参见操作手册。

2.4 目检(损坏、泄漏)

  • 外壳 ⇒ 一般损坏?
  • 吸头锥 ⇒ 表面有划痕?
  • 吸头弹出装置
  • 活塞 ⇒ 表面有划痕或脏污?
  • 密封 ⇒ 表面有划痕或脏污?

⇒ 将结果输入到测试记录 (2)。

可能的故障及纠正措施:
 

故障 可能原因 措施
移液器吸头不再紧密 吸头锥上有划痕 ⇒ 订购备件,参见操作手册
仪器难以移动且/或泄漏。 密封/活塞脏污或损坏 ⇒ 订购备件,参见操作手册

2.5 功能测试

  • 安装新的移液器吸头。
  • 设定标称量程。
  • 吸取测试液。⇒ 无法吸液或吸液很慢。参见下表中的说明。
  • 用BRAND® PLT 检漏仪测试。⇒ 如果“出错”,则按下表指示操作。
  • 或者竖直拿着充满的移液管约 10 秒钟,观察移液器吸头是否形成液滴。⇒ 如果形成了液滴,则参见下表的说明。
  • 排出测试液。⇒ 在容器内壁上抿掉移液器吸头上的液滴。⇒ 移液杆必须活动自如,没有卡顿。
  • 弹出吸头。⇒ 将观察结果输入到测试记录 (3)。

可能的故障及纠正措施(关于纠正其他故障的措施,请参见操作手册)
 

故障 可能原因 措施
无法吸液或吸液很慢 移液管杆或吸头锥堵塞 ⇒ 清洁仪器,参见操作手册。
用PLT装置测试时“出错”,或者移液器吸头有液滴形成 移液器吸头安装不良且堵塞 密封或活塞损坏 吸头锥安装不再紧密(这对 Transferpette® 电子和 Transferpette® S 是不可能的) ⇒ 使用新的移液器吸头。紧密安装吸头。 ⇒ 清洁或更换密封和/或活塞,参见操作手册。 ⇒ 重新紧固吸头锥。

3. 测试所需设备

3.1 对标称量程大于 50 µl 的 Transferpette®

  • 接收容器(例如三角烧瓶),装有去离子水或蒸馏水(根据 ISO 3696 标准,水质至少为 3 级)。⇒ 匹配水温和室温,准确度为0.5 °C。防止由于蒸发而冷却容器里的水。
  • 称重容器(例如三角烧瓶),装有一些水。⇒ 必须至少覆盖瓶底。如果测试体积 < 100 µl,防止蒸发(参见 3.2)。
  • 天平,建议的规格
测试V下选定的仪器体积a 分辨率 mg 重复性和线性 mg 测量值的标准不确定性 mg
1 µl < V < 10 µl 0.001 0.002 0.002
10 µl < V < 100 µl 0.01 0.02 0.02
100 µl < V < 1000 µl 0.1 0.2 0.2
1 ml < V < 50 ml 0.1 0.2 0.2
a 实际操作中,可以根据标称量程来选择天平。
  • 温度计,最大测量误差 ⇒ ± 0.2 °C
  • 湿度计:考虑到湿度计的测量容差,应达到40%–60%的大气相对湿度。
  • 将Transferpette®(包括配件)放入测试室至少2个小时(折开包装)。⇒ 让仪器适应到室温,准确度为 0.5 °C。
  • 室内:无漂移,随时间推移和地点的不同,温度只有轻微波动。

3.2 对标称量程小于等于 50 µl 的 Transferpette®

  • 接收容器(例如三角烧瓶),装有去离子水或蒸馏水 (根据ISO 3696,水质至少为3级)。⇒ 匹配水温和室温,准确度为 0.5 °C。防止由于蒸发而冷却容器里的水。
  • 一次性微量移液管 intraEND 100 µl,移液管夹 ⇒ 供应商:BRAND® GMBH + CO KG,Postfach 11 55, 97861 Wertheim ⇒ 订货信息:IntraEND 100 µl,货号:7091 44,移液管夹,货号:7086 05
  • 微量称量管⇒ 订货信息:微量称量管,货号:7084 70
  • 天平,建议的规格 ⇒ 参见上表
  • 温度计的最大测量误差 ⇒ ± 0.2 °C
  • 湿度计:考虑到湿度计的测量容差,应达到40%–60%的大气相对湿度。
  • 将Transferpette®(包括配件)放入测试室至少2个小时(折开包装)。⇒ 让仪器适应到室温。
  • 室内:无漂移,随时间推移和地点的不同,温度只有轻微波动。

国家标准要求的测试结果可跟踪性

使用经校准的测试仪器(天平和温度计),即符合DIN EN ISO 9001、DIN EN ISO 10012以及DIN EN ISO/IEC 17025关于测试的国家标准要求。举例来说,天平的校准可以通过DAkkS校准或官方天平认证执行,亦可通过可跟踪符合国家标准的适当砝码校准天平。温度计、湿度计和气压计的校准,也可以通过DAkkS校准或官方认证执行,亦可通过与可跟踪符合国家标准的温度计进行比较(在规定的条件下)来校准。

4. 重量测试(校准)

4.1 对标称量程大于 50 µl 的机械和电子 Transferpette®

  1. 将标称量程设定为 10 % 或 20%。
  2. 确定受测去离子水的温度。⇒ 将温度输入到测试记录 (4)。
  3. 将称重容器(装有一些去离子水)放在天平上称皮重。
  4. 安装新的移液器吸头。润洗仪器:吸取并排出测试液5次。⇒ 润洗步骤可以提高测试的准确度。
  5. 从接收容器吸取测试液。
    • ⇒ 将手动Transferpette® 移液杆按到第一个止动位(对电动 Transferpette® 不需要这么做)。
    • ⇒ 将 200 µl 至 1000 µl 仪器的移液器吸头浸入液体约 2–3 mm,对 5 ml 和 10 ml 仪器浸入 3–6 mm。
    • ⇒ 平稳地释放手动Transferpette® 的移液杆。对于电动 Transferpette® 则按压移液键吸取液体。
    • ⇒ 让吸头浸没约 1 秒钟,对于 5 ml 和 10 ml 仪器,浸没约 3 秒钟。
  6. 从天平上拿下称重容器。⇒ 如果使用的是专用移液管校准天平,这步省略。
  7. 将测试液排出至称重容器。
    • ⇒ 将移液器吸头以大约 30°- 45° 的角度斜靠在容器壁上。
    • ⇒ 以稳定的速度按压手动移液器的移液杆到其第一个止动位,并停留在那里。对于电动 Transferpette® 则按住移液键不动。
    • ⇒ 按压到第二个止动位以完全排空移液器吸头。(对电动Transferpette®,这个功能是自动执行的)。
    • ⇒ 在容器内壁上抿掉移液器吸头上的液滴(约擦划 10 mm)。
    • ⇒ 平稳地释放手动 Transferpette® 的移液杆。释放电动 Transferpette® 的移液杆。
  8. 将称重容器放到天平上。读取读数。⇒ 将称重值输入到测试记录 (5)。
  9. 重新在天平上称皮重。
  10. 重复步骤 5 至 9 十次。⇒ 将称重值输入到测试记录 (5)。
  11. 用相同的步骤,移液 50 % 和 100 % 标称量程。始终从 4 开始。 ⇒ 只对各种电子仪器!⇒ 将称重值输入到测试记录 (5),其有 30 个值(量程可调型)或 10 个值(固定量程)。

4.2 对标称量程小于等于 50 µl 的机械和电子 Transferpette®

说明:

对标称容量小于等于 50 µl 的移液管,容差级限通常小于 0.5 µl。由于容差极限这么小,在测试过程中蒸发的水对测试结果具有相当大的影响。因此,测试这种大小的移液管要求测试程序能够有效限止蒸发。如果使用的是具有防蒸发井的专用移液管校准天平,可以用4.1中所述的程序。为此,BRAND® 专门制定了下列测试程序。所使用的称重容器是几乎没有蒸发的一次性微量移液管或者微量称量管。

  1. 将标称量程设定为 10 % 或 20%。
  2. 确定受测去离子水的温度。⇒ 将温度输入到测试记录 (4)。
  3. 安装新的移液器吸头。润洗仪器:吸取并排出测试液5次。⇒ 润洗步骤可以提高测试的准确度。
  4. 在移液管夹上装上一个一次性微量移液管。将微量称量管放在天平上然后称重。
  5. 从接收容器吸取测试液。
    • ⇒ 将移液杆按到第一个止动位(对电子 Transferpette® 不需要这么做)。
    • ⇒ 将移液器吸头浸入液体约 2 - 3 mm。
    • ⇒ 平稳地释放手动 Transferpette® 的移液杆。对于电动 Transferpette®  则按压移液键吸取液体。
    • ⇒ 让吸头浸没约 1 秒钟。
  6. 将一次性微量移液管和微量称量管从天平上取下。⇒ 移液管夹方便操作的进行!
  7. 将测试液体排入一次性微量移液管和微量称量管。
    • ⇒ 将一次性微量移液管推入到吸头内,或将移液器吸头插入到微量容器的圆锥里。
    • ⇒ 以平稳的速度按压手动 Transferpette® 的移液杆到其第一个止动位,并停留在那里。对于电动 Transferpette®  则按住移液键不动。
    • ⇒ 按压到第二个止动位以完全排空移液器吸头(对电动 Transferpette® ,这个功能是自动执行的)。一次性微量移液管内部会形成气泡。
    • ⇒ 将移液杆和微量称量管保持在第二个止动位,与此同时拔掉一次性微量移液管的吸头。
  8. 将一次性微量移液管和微量称量管放置在天平上。读取读数。⇒ 将称重值输入到测试记录 (5)。
  9. 在天平上重新称取新的一次性微量移液管和微量称量管的皮重。
  10. 重复步骤 5 至 9 十次。⇒ 将称重值输入到测试记录 (5)。
  11. 用相同的步骤,移液 50 % 和 100 % 标称量程。始终从4开始。
    • ⇒ 只对数字式和电子式仪器!
    • ⇒ 将称重值输入到测试记录 (5),共有 30 个值(量程可调型和电子式移液管)或 10 个值(固定量程移液管)。

5. 评估重量分析测试结果

在重量分析测试中测得的重量值只是分液体积的质量值,未考虑空气的浮力。为了获得实际体积,必须进行修正计算,将水密度和空气浮力考虑进去。为了方便您计算和评估,我们建议使用与Windows兼容的BRAND® 校准软件EASYCAL™ 。

1. 平均称重值:

(举例中是10个称重值)

平均称重值

2. 平均体积:

平均体积

⇒ 关于Z因子,请参见表1。

⇒ 将数值输入到测试记录 (6a)。

3. 体积标准偏差:

⇒ 关于Z因子,请参见表1。

⇒ 将数值输入到测试记录 (6b)。

体积标准偏差

4. 准确度:

准确度

⇒ 将数值输入到测试记录 (6c)。

5. 变差系数:

变差系数

⇒ 将数值输入到测试记录 (6d)。

比较实际 / 标称值:

请参考下列几页上每个仪器的误差极限和准确度表,或者定义您自己的误差极限。⇒ 将数值输入到测试记录 (6e, f)。

结果:⇒ 将数值输入到测试记录 (6g)。

如果计算出来的值A [%] 和 CV [%] 小于等于误差极限,则仪器工作正常。

如果计算出来的值大于误差极限:

  • 检查确认已仔细遵循上述指南步骤。
  • 查看操作手册中的“故障检修”部分中的建议。
  • 按照操作手册中的说明校准 Transferpette®、Transferpette® S 和电动 Transferpette® (只有最新型号才能重新校准)。

如果这些措施都不成功,我们建议您可能需要由BRAND® 校准服务来校准您的仪器。

可能的体积测量误差及纠正措施:
 

故障 可能原因 措施
体积太小 移液器吸头安装不良。 密封或活塞故障 吸头锥安装不再紧密(这对 Transferpette® 电子和 Transferpette® S 是不可能的) ⇒ 使用新的移液器吸头,并紧密安装。 ⇒ 清洁或更换密封和/或活塞,参见操作手册。 ⇒ 重新紧固吸头锥。
体积太大 移液杆按得太远。 ⇒ 请勿按过第一个止动位!
其他原因 仪器校准不正确。 仪器温度、室温和水温的温度适应尚未完成。 ⇒ 恢复到原始校准。 ⇒ 进行温度适应调节。

 

表1:

摘自 DIN EN ISO 8655 第 6 部分,表格是 1013 hPa 下的数据。
 

温度 °C Z 因子 ml/g
15 1.0020
15.5 1.0020
16 1.0021
16.5 1.0022
17 1.0023
17.5 1.0024
18 1.0025
18.5 1.0026
19 1.0027
19.5 1.0028
20 1.0029
20.5 1.0030
21 1.0031
21.5 1.0032
22 1.0033
22.5 1.0034
23 1.0035
23.5 1.0036
24 1.0038
24.5 1.0039
25 1.0040
25.5 1.0041
26 1.0043
26.5 1.0044
27 1.0045
27.5 1.0047
28 1.0048
28.5 1.0050
29 1.0051
29.5 1.0052
30 1.0054

 

表2:

摘自 DIN EN ISO 8655 第 2 部分。
 

标称量程 µl 1 2 5 10 20 50 100 200 500
A ≤ ± % 5.0 4.0 2.5 1.2 1.0 1.0 0.8 0.8 0.8
CV ≤ % 5.0 2.0 1.5 0.8 0.5 0.4 0.3 0.3 0.3
标称量程 ml 1 2 5 10          
A ≤ ± % 0.8 0.8 0.8 0.6          
CV ≤ % 0.3 0.3 0.3 0.3          

 

表3:

活塞式移液器的体积误差极限:

所述体积误差极限是相对于标称容量的最终测试值。这些误差极限指的是新仪器在优化的测试条件下(有资质的操作员和标准化的环境条件)。通常情况下,这些容差在理想测试条件下会好两倍(制造商的经验)。对于部分量程,用对应于标称量程的绝对值 (µl)。

摘自操作手册的值(电动 Transferpette® ):
 

标称量程 µl 准确度 6e ≤ ± % 变差系数 6f ≤ %
10/5/1 1.0/1.5/5.0 0.4/0.8/2.0
20/10/2 1.0/1.5/5.0 0.4/0.8/2.5
200/100/20 0.8/1.2/4.0 0.2/0.3/0.6
1000/500/100 0.6/1.0/3.0 0.2/0.3/0.6
5000/2500/500 0.6/1.0/3.0 0.2/0.3/0.6

 

摘自操作手册的值(机械式 Transferpette®):
 

标称量程 µl 准确度 6e ≤ ± % 变差系数 6f ≤ %
固定量程    
5 1 0.8
10 1 0.8
20 0.8 0.4
25 0.8 0.4
50 0.8 0.4
100 0.6 0.2
200 0.6 0.2
250 0.6 0.2
500 0.6 0.2
1000 0.6 0.2
2000 0.6 0.2
可调量程    
1/0.5/0.1 2/4/20 1.2/2.4/12
10/5/1 1/2/10 0.8/1.6/8
20/10/2 0.8/1.6/8 0.4/0.8/4
50/25/5 0.8/1.6/8 0.4/0.8/4
100/50/10 0.6/1.2/6 0.2/0.4/2
200/100/20 0.6/1.2/6 0.2/0.4/2
250/125/25 0.6/1.2/6 0.2/0.4/2
1000/500/100 0.6/1.2/6 0.2/0.4/2
5000/2500/500 0.6/1.2/6 0.2/0.4/2

 

摘自操作手册的值(手动 Transferpette® S):
 

标称量程 µl 准确度 6e ≤ ± % 变差系数 6f ≤ %
固定量程    
10 1 0.5
20 0.8 0.4
25 0.8 0.4
50 0.8 0.4
100 0.6 0.2
200 0.6 0.2
500 0.6 0.2
1000 0.6 0.2
可调量程    
1/0.5/0.1 2/4/20 1.2/2.4/12
2.5/1.25/0.25 1.4/2.5/12 0.7/1.5/6
10/5/1 1/1.6/7 0.5/1/4
20/10/2 0.8/1.2/5 0.4/0.7/2
50/25/5 0.8/1.2/4 0.3/0.5/2
100/50/10 0.6/0.8/3 0.2/0.4/1
200/100/20 0.6/0.8/3 0.2/0.3/0.6
1000/500/100 0.6/0.8/3 0.2/0.3/0.6
5000/2500/500 0.6/0.8/3 0.2/0.3/0.6
10000/5000/1000 0.6/0.8/3 0.2/0.3/0.6

 

在校准时,操作员将要观察的误差极限必须由用户自行定义。为此,可用下列方法:

  • 如果应用要求,且如果存在优化的条件,所述容差也可以在处于良好工作状态的用过的量具上获得。
  • 类似于德国对官方测试的规定,也允许使用实践中典型的极限值。这些实践极限值相当于官方测试极限值的两倍。在这种情况下,表3中的值应该加倍。
  • 用户还可根据其特定的应用,定义其自己的容差极限,并在其仪器的校准中应用这些误差极限。

上述程序符合DIN EN ISO 9001、DIN EN ISO 10012 和 DIN EN ISO/IEC 17025的要求。

7. BRAND® 校准服务

BRAND® 提供全面的服务,包括 Brand 牌以及外部品牌的仪器的校准和调节,以及必要的保养和维修,后者仅对 BRAND® 仪器。这不仅省钱,而且有益于监管仪器校准的独立审查组织。更多信息以及维修、校准服务订单可以在 www.brand.de 上找到。

7.1 涵盖的仪器范围

  1. 活塞式移液器(单通道和多通道)
  2. 瓶口分液器
  3. 活塞式滴定管(瓶口滴定管)
  4. 连续分液器

7.2 根据DIN EN ISO 8655测试

在BRAND®,有一支训练有素的团队,在温度和湿度严格控制的实验室中,用最先进的天平和校准软件,根据 ISO 8655 校准各种品牌的移液设备。

量程可调的仪器,例如电子式 HandyStep®、Transferpette®、Transferpette® S、电动 Transferpette® 、Transferpette®S -8/-12、Transferpettor、Dispensette®、数字式滴定器或 Titrette® 以标称量程、50%、10% 或 20% 标称量程被测试。

为了记录测试结果,会生成详细的测试报告,该报告完全按所有相关规定编写。

BRAND® 校准服务提供:

  1. 各种品牌液体处理仪的校准
  2. 详细的校准证书
  3. 仪器会在几个工作日内返回
  4. 经济有效的处理

8. EASYCAL™ 软件 — 先进的校准技术

8.1 对于移液设备以及玻璃或塑料量具

EASYCAL™ 简化了移液设备以及玻璃和塑料量具根据DIN EN ISO 9001、DIN EN ISO 10012、DIN EN ISO/IEC 17025和GLP标准校准的烦琐工作。测试程序逐步给出,而且所有计算均自动执行。然后会生成报告记录校准。您所需的只是一个分析天平、一个PC Windows® 98/2000、NT (SP6)、XP、Vista、或7系统、一台打印机(选购件)和EASYCAL™ 软件。

  • 适用于来自所有制造商的仪器。
  • 许多仪器的规格参数已预先装载。
  • 根据 ISO 4787、ISO 8655等测试。

EASYCAL™

8.2 数据输入

  • 连接个人计算机和天平(选购件),然后启动EASYCAL™ 软件。
  • 已经预先编入40个常用天平,以方便安装。

8.3 文件 — 整理清晰

校准证书在一页纸上含有所有重要的测试数据,包括测试结果的图形。

9. BRAND® 提供量具的DAkkS校准服务

9.1 DAkkS — Deutsche Akkreditierungsstelle GmbH(德国认证验证局)以及DKD

DAkkS — Deutsche Akkreditierungsstelle GmbH(德国认证验证局)以及DKD

德国校准服务处 (DKD) 成立于1977年,是一个国家与经济部门的联合项目,在工业及研究实验室测量设备、测试机构、权威机构、以及PTB(德国物理和计量研究院)国家标准之间起着桥梁作用。它有效地补充了现有检定系统,该系统为上述所有机构提供客户保护服务。根据法律要求,DKD认证自2010年转成DAkkS认证(Deutsche Akkreditierungsstelle GmbH,德国认证验证局)。BRAND® 自2013年4月23日已获得认证, 证书编号为D-K-18572- 01-00。

DAkkS — Deutsche Akkreditierungsstelle GmbH(德国认证验证局)以及DKD

9.2 DAkkS校准证书以及校准标志

DAkkS校准证书是官方文件,表示测量结果符合测量设备监督标准DIN EN ISO 9001和DIN EN ISO/IEC 17025所要求的国家和国际标准以及国际SI单位,具有高度可跟踪性。

当需要具有认证资质的实验室进行校准、需要高水平校准、要求符合国家和国际标准、以及需要校准基准仪器时,就会签发DAkkS校准证书。

9.3 DAkkS — 国际认证网络的成员

DAkkS是国际实验室认证合作组织 (ILAC) 的成员,这是国际上最高水平的实验室校准认证机构,而且也是MRA(互相认可协议)的签约成员。

凡是ILAC互相认可协议 (MRA) 的签约认证团体都会认可其他签约成员,签约成员签发的校准证书具有同等效力。而且,签约成员一般负有义务宣传和建议接受其他签约成员的校准证书(不包括工厂校准证书)。

DAkkS是EA(欧洲认证合作组织)成员,也是ILAC(国际实验室认证合作组织)成员。多边协议保证了DAkkS校准证书在世界各个国家必须受到认可。

9.4 BRAND® 的 DAkkS 校准实验室

1998年,BRAND® 的一间量具校准实验室获得德国校准服务处(German Calibration Service)认证符合 DIN EN ISO/ IEC 17 025 标准,因此,我们的校准实验室有权为下列量具签发 DAkkS 校准证书(以多种语言)。另外,我们还提供调节服务,以及BRAND® 移液设备的维修和保养服务。

有关量具的DAkkS校准证书的订购信息,请查看我们的通用产品手册。

9.5 BRAND® 有权签发 DAkkS 校准证书的量具

BRAND® 校准下列量具(新的或已经在用的仪器,不论它们的品牌):

  • 活塞式移液器,0.1 µl至10 ml
  • 多通道活塞式移液器,0.1 µl至300 µl
  • 活塞式滴定管,5 µl至200 ml
  • 分液器、稀释器,5 µl至200 ml
  • 玻璃量具,(TC, In) 量入校准,1 µl至10000 ml
  • 玻璃量具,(TD, Ex) 量出校准,100 µl至100 ml
  • 塑料量具,(TC, In) 量入校准,1 ml至2000 ml
  • 塑料量具,(TD, Ex) 量出校准,1 ml至100 ml
  • 玻璃密度瓶,1 cm3 至 100 cm3


材料