EX-CELL® Advanced™ CHO补料分批培养基和补料系统技术参数表

性能

通过两项研究来评估EX-CELL Advanced CHO补料分批系统,其中第一项研究评估指示性性能指标(活细胞密度和滴度),第二项研究利用相对聚糖分布(%)评估所得蛋白质质量。

 

研究1设计

选取三种不同的CHO细胞模型(CHO-S、CHO-dhfr、CHOZN® GS)对比评估市面领先的生长和补料培养基与SAFC 推出的EX-CELL Advanced CHO补料分批培养基系统对活细胞密度和生产力的影响。通过初始适应步骤为每个细胞模型选出效果最好的培养基,用于后续的对比研究。只有能够在三代内成功适应的培养基才能用于随后的生长和生产力分析。在所有情况下,无论使用哪种细胞库培养基,培养物都能轻松适应EX-CELL Advanced CHO补料分批培养基系统。每天对所有培养物监测活细胞密度并测量抗体(IgG)滴度,直至第14天。

培养条件

  • TTP管培养

− 200rpm / 50mm轨道旋转

− 5% CO2, 37°C, 80% RH

  • 1L生物反应器

− 150rpm和40% DO

 

补料方法

  • 7.5% (v/v) 初始培养体积
  • 第3、5、7、9和11天补料
  • 当葡萄糖浓度低于2g/L时,加入4 g/L葡萄糖


表1:适应方案

研究1结果:VCD、滴度和可扩展性

CHO S 细胞

图1:TTP管培养条件下的活细胞密度和生产力对比


CHO dhfr 细胞

图2: TTP管培养条件下的活细胞密度和生产力对比


CHOZN® GS 细胞

图3:TTP管培养条件下的活细胞密度和生产力对比


CHOZN® GS 细胞:放大培养

图4:证明EX-CELL Advanced培养基系统的可扩展性。使用SAFC小规模模型(TPP管)和1L生物反应器对比市面领先培养基和补料产品对CHOZN细胞培养的影响。

蛋白质质量

研究2设计

通过结合使用EX-CELL Advanced CHO补料分批系统与我们的蛋白质质量补充剂(货号14701C),评估其对蛋白质质量的影响。将CHO GS细胞冻存、解冻并传代3次。按之前所述方法培养细胞,并在第3、5、7、9和11天补充EX-CELL Advanced Feed 1。当培养物的葡萄糖浓度低于2g/L时,补充4 g/L葡萄糖。此外,在14天的补料分批培养中,从第2天开始补充EX-CELL Glycosylation Adjust (GAL+),然后每隔一天补充一次,直至第10天。在第14天收集培养物上清液,用于纯化和分析。结果显示,活细胞密度、细胞活性和滴度均无差异。

 

EX-CELL Advanced补料分批系统中的糖基化

结论

研究 1

在所有细胞模型中,EX-CELL Advanced CHO补料分批系统具有持续的高生物量和高滴度。在每个对比研究中,该生长培养基都能从含水解物或其他化学成分明确的培养基顺利过渡。此外,SAFC推出的优化培养基和补料组合完胜其他市面领先的补料分批培养产品,其滴度比其他同类产品高出2-4倍。通过直接对比经SAFC验证的补料分批培养模型在TPP管和1L生物反应器中的性能,发现1L生物反应器产生的滴度高于4.5 g/L IgG,从而也证明了EX-CELL Advanced CHO补料分批系统具有可扩展性。

 

研究 2

通过在培养物中补充EX-CELL Glycosylation Adjust (GAL+)添加剂,证明EX-CELL Advanced CHO补料分批系统可利用简单有效的方法来保证一致的培养产物质量。

SAFC很荣幸能够提供一套易于使用的先进培养基产品,并帮助在开发过程中获得最高滴度和一致的培养产物质量。两种培养基配方的粉末和液体形式都具有明确的稳定性。单组份低体积添加物的稳定性包括再水化后可在室温条件下稳定保存30天,从而保证生产过程的灵活性和有效性。EX-CELL Advanced CHO补料分批系统为补料分批培养的产品一致性、生产力和可靠性树立了新标杆。

产品处理和储存

为避免污染,务必采用无菌技术处理产品。不得使用混浊或含沉淀物的产品。颜色变化、pH变化或物理性质或性能退化表示产品可能变质。

液体培养基可在2-8°C环境中避光保存长达1年。再水化的补料培养基(货号24367C24368C)可在室温下避光保存长达30天。不要使用超过30天的培养基。有关再水化说明,请阅读产品标签和/或我们的网站www.sigmaaldrich.com/CHOperformance

粉末培养基应置于原始容器中保存在2-8°C,并注意防潮。结块、颜色变化和/或粘稠表示粉末可能变质。

 

预期用途

本品适用于生物制造业的进一步生产用途。不适用于或未被批准用于人类或兽医行业的体外诊断。

 

配方支持

SAFC承诺为独家产品提供所有必要的支持,包括EX-CELL Advanced CHO补料分批系统。用于支持监管备案的信息披露过程非常简单,可根据要求提供。我们的团队将快速回应和解决所有与培养基性能有关的技术问题。如需任何支持,请联系质量服务部。

 

相关产品

SAFC为EX-CELL Advance CHO补料分批培养系统以及其他兼容的CHO补料分批培养系统提供以下配套产品。EX-CELL Glycosylation Adjust (GAL+)让使用者能够通过增加半乳糖在低聚糖上的占位轻松达到理想的 N-连接糖基化目标。

  货号 形式 规格
EX-CELL Glycosylation Adjust (GAL+) 14701C-100ml 液体 100ml
EX-CELL Glycosylation Adjust (GAL+) 14701C-1000ml 液体 1000ml
有关更多信息,请访问我们的网站 www.sigmaaldrich.com/finishfaster

 

材料