感受态细胞选择指南

感受态细胞选择指南

分子生物学指南中可以找到更多的实验方案和选择指南。

Sigma-Aldrich提供一系列大肠杆菌细菌细胞,通过对每种菌株特异的优化程序,使其成为具有最高效率的感受态细胞。共有24种适用于各种应用的新型感受态细胞可供选用,这些应用包括蛋白质表达、常规或困难的克隆、以及文库的生成。有多种试用规格可供选用!

 

应用 产品编号 产品描述 转化效率 基因型 蓝白筛选能力
用于蛋白质表达和DNA质粒产生 CMC0001 SIG10化学感受态细胞 ≥ 1 × 108 F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK rpsL nupG λ- tonA
用于蛋白质表达和DNA质粒产生 CMC0002 SIG10 F‘化学感受态细胞 ≥ 5 × 108 [F´ pro A+B+ lacIqZΔM15::Tn10 (TetR)] /mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK rpsL nupGλ tonA
用于蛋白质表达和DNA质粒产生 CMC0003 SIG10 HIGH电感受态细胞 ≥ 5 × 109 F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara,leu)7697galU galK rpsL nupG λ- tonA (StrR)
用于蛋白质表达和DNA质粒产生 CMC0004 SIG10 MAX电感受态细胞 ≥ 2 × 1010 F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara,leu)7697galU galK rpsL nupG λ- tonA (StrR) 
用于一般克隆和产生文库 CMC0005 SIG10 F' MAX电感受态细胞 ≥ 2 × 1010 [F´ pro A+B+ lacIqZΔM15::Tn10 (TetR)] /mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK rpsL nupG λ- tonA (StrR) 
用于一般克隆和产生文库 CMC0006 SIG10 ULTRA电感受态细胞 ≥ 4 × 1010 F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara,leu)7697galU galK rpsL nupG λ- tonA (StrR) 
用于一般克隆和产生文库 CMC0007 SIG10 5a化学感受态细胞 ≥ 1 × 108 fhuA2Δ(argF-lacZ)U169 phoA glnV44 Φ80 Δ(lacZ)M15 gyrA96 recA1 relA1 endA1 thi-1 hsdR17
用于使用不稳定的DNA产生质粒 CMC0008 STEADY化学感受态细胞 > 1 × 107 recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5 λ– leu mtl-1 F– mcrB mrr hsdS20(rB–, mB–)
用于使用不稳定的DNA产生质粒 CMC0009 STEADY电感受态细胞 > 1 × 107 recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5 λ– leu mtl-1 F– mcrB mrr hsdS20(rB–, mB–)
用于制备诱变用的含尿嘧啶的DNA CMC0010 CHANGER电感受态细胞 1 × 109 [F’ Tra+ Pil+ (CamR)] ung-1 relA1 dut-1 thi-1 spoT1 mcrA
用于BAC和粘粒克隆 CMC0011 XLDNA V2电感受态细胞 ≥ 1 × 1010 F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara,leu)7697 galUgalK rpsL nupG (attL araC-PBAD-trfA250 bla attR) λ-
用于BAC和粘粒克隆 CMC0012 XLDNA SIG10电感受态细胞 ≥ 1 × 1010 F - pro A+B+ lacIqZΔM15::Tn10 (TetR)] /mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK rpsL nupG λ- tonA (StrR)
用于产生生物素化蛋白质 CMC0013 BIOTINYLATER F' 电感受态细胞 >1 ×1010 MC1061 [F´ pro A+B+ lacIqZΔM15::Tn10 (TetR)] araD139 ∆(ara-leu)7696 ∆(lac)l74 galU galK hsdR2(rΚ- mΚ+) mcrB1 rpsL (StrR) birA
用于蛋白质表达 CMC0014 BL21(DE3) 化学感受态细胞 ≥ 1 × 107 F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)
用于蛋白质表达 CMC0015 BL21(DE3) pLysE化学感受态细胞 ≥ 1 × 107 F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)
用于蛋白质表达 CMC0016 BL21(DE3) 电感受态细胞 ≥ 5 x 109 F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)
用于最高蛋白质表达 CMC0017 OverExpress C41(DE3) 化学感受态细胞 ≥ 1 × 106 F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3) 
用于最高蛋白质表达 CMC0018 OverExpress C41(DE3) pLysS化学感受态细胞 ≥ 1 × 106 F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3) pLysS (CmR)
用于最高蛋白质表达 CMC0019 OverExpress C43(DE3) 化学感受态细胞 ≥ 1 × 106 F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)
用于最高蛋白质表达 CMC0020 OverExpress C43(DE3) pLysS化学感受态细胞 ≥ 1 × 106 F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3) pLysS (CmR)
用于最高蛋白质表达 CMC0021 OverExpress C41(DE3) 电感受态细胞 ≥ 1 × 109 F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)
用于最高蛋白质表达 CMC0022 OverExpress C43(DE3) 电感受态细胞 ≥ 1 × 109 F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)
用于受控的蛋白质表达 CMC0023 CONTROLLER SIG10化学感受态细胞 > 1 × 109 mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 ɸ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ (ara,leu)7697 galU galK rpsL (StrR) nupG λ− tonA Mini-F lacIq1 (GentR)
用于受控的蛋白质表达 CMC0024 CONTROLLER BL21(DE3) 化学感受态细胞 > 1 × 107 F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3) Mini-F lacIq1(GentR)

大肠杆菌标记物指南

 

在下文中,标记物被描述为基因或基因产物。
dam 甲基化GATC位点的A 甲基形式的dam用于区分旧(甲基化)与新(未甲基化)链,以进行损伤修复(修复未甲基化的链)。dam甲基化还用于时间复制(在两条链都被dam甲基化之前不要复制)。该甲基化干扰几种限制酶,包括BclI和ClaI。
dcm 甲基化CCWGG。
dnaJ 伴侣蛋白。突变体可以稳定大肠杆菌中的一些蛋白质。
dut dUTP酶,一种通过破坏dUTP防止尿嘧啶掺入DNA的酶。Dut-ung双突变体在其DNA中积累了大量的尿嘧啶。
e14 是一种类似于原噬菌体的元素,存在于K-12中,但缺少许多衍生物。e14携带mcrA基因,因此e14-品系是McrA-。
endA 是end1核酸酶的基因,大肠杆菌的主要内切核酸酶。
F 是一种自身可传递的质粒(100 kb),赋予生成菌毛(即“雄性”)的能力,从而被雄性特异性噬菌体(如M13)感染。
F' 是一种F质粒,从大肠杆菌中选取一些染色体DNA。F' 可以有自己的基因型。有两种流行的模型编码 lacβ肽(ΔM15)或 LacIQ
hsdRSM 是限制系统,将特定序列中的宿主DNA甲基化,并切割未被这样甲基化的DNA。R基因是内切核酸酶,M基因是甲基化酶,S基因是每个基因发挥作用所需的基因。因此,hsdR突变体不具有内切核酸酶功能,但仍然甲基化。HsdS突变体不具有内切核酸酶或甲基化酶。两种流行的模型是大肠杆菌K的K系统和大肠杆菌B的B系统。
lacIQ 过量产生 lacI 基因产物,它是 lac 操纵子的阻遏物。
lacY 乳糖通透酶。LacY突变体不能用于蓝/白筛选,但用于调节 IPTG诱导的基因表达中的基因表达。
lacZ β-半乳糖苷酶基因。Δ(lacZ)M15突变表达β片段。这常见于F' 元素或有缺陷的80φ原噬菌体。许多质粒表达α片段。这两者一起形成功能性β-半乳糖苷酶。
Δlac 除了一些侧翼DNA外,还有三个常见的缺失涉及整个lacZYA操纵子:ΔU169、ΔX111和ΔX74。
Ion 是一种负责降解异常蛋白质和关闭sulA功能的蛋白酶。大肠杆菌B天然缺乏lon。
mal B malB区域包含基因malEFG和malK lamB malM。 Δ (malB) 删除此整个区域的大部分或全部。LamB是 λ 噬菌体的受体。
mcr A 它在某些序列中限制含有甲基胞嘧啶的DNA。当原噬菌体e14丢失时,McrA也丢失。
mcr BC 该系统在某些序列中限制含有甲基胞嘧啶的DNA。Δ(mcrC-mrr) 删除六个基因:mcrC-mcrB-hsdS-hsdM-hsdR-mrr
mrr 是一种甲基胞嘧啶和甲基腺嘌呤限制系统。
recA 是大多数同源重组途径所必需的。
recB ExoV功能所必需的。重组不足。
recC ExoV功能所必需的。
recD ExoV功能所必需的。RecD突变体稳定反向重复,但干扰质粒维持。
recF 是质粒间同源重组所需的重组基因。
recJ 是质粒间同源重组所需的重组基因。
rpoH (或htpR热休克转录因子),是表达一些热休克蛋白酶所必需的。
sbcB 是外切核酸酶 I 功能所必需的。携带recB recC和sbcB的品系通常也是sbcC。这些四重突变品系在 λ 中是高效重组,且增殖反向重复,但是质粒复制是异常的。
sbcC 帮助(用sbcB)抑制recBC突变体的作用。sbcC突变体是Rec+,在质粒中稳定地增殖反向重复。
supE (或glnV),突变体 tRNA在UAG密码子处插入谷氨酰胺,抑制阅读框中的UAG突变。SupE是一些噬菌体突变体裂解生长所必需的。
supF (或tyrT),突变体 tRNA在UAG密码子处插入酪氨酸,从而抑制UAG突变在阅读框中的作用。这种突变是一些 λ 噬菌体(例如 λgt11)裂解生长所必需的。
traD 缀合F质粒的缺陷突变体。
ung 是尿嘧啶N-糖基化酶中的突变体,尿嘧啶N-糖基化酶是一种从DNA中去除尿嘧啶的酶。ung突变体使尿嘧啶持续存在于DNA中。
φ80dlacΔM15 对于φ80的缺陷型原噬菌体衍生物具有溶解性。lacZ ΔM15等位基因为蓝色提供β肽。