酵母培养基简介

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 引言

典型的酵母细胞

典型的酵母细胞

 

酵母是真核微生物,其基因组已被全面研究,一些已被测序。它们在实验室条件下相对容易生长。此外,尽管它们的基因组大小很小,但它们显示出在大多数真核生物中高度保留的细胞特征和过程。例如,它们具有膜结合细胞器、细胞骨架、核DNA和转录机制,其类似于在高等真核生物中发现的那些。此外,酵母具有许多充分表征的分泌蛋白和信息素。几种参与蛋白酶加工和分泌的酵母基因也得到了鉴定。因此,借助于合适的分子生物学工具,酵母可用于几种真核基因和蛋白质研究。酵母培养物的一些应用包括蛋白质表达系统的合成,特定基因或蛋白质功能的研究,以及新蛋白质相互作用的分析。它们还用于许多工业应用,例如发酵、烘焙和生物除污。
 

酵母培养基在支持小规模和大规模培养方面发挥着重要作用。通常,酵母培养基包括蛋白胨、酵母提取物和右旋糖或葡萄糖。甚至培养基组成的微小差异也可以产生具有不同生长特征的酵母。
 

 酵母培养基的种类

复合酵母生长培养基的分类

复合酵母生长培养基的分类

 

合成酵母生长培养基的分类

合成酵母生长培养基的分类

 

最低基本合成培养基可以与营养缺陷型培养基补剂一起使用,作为选择性培养基用于培养营养缺陷型酵母。

此外,可以使用特定的孢子形成培养基使酵母菌株形成孢子。指示剂培养基也可用于区分发酵或不发酵特定糖的酵母菌株,例如半乳糖或麦芽糖。
 

 Sigma的酵母培养基选择

Sigma-Aldrich提供范围广泛的高品质酵母培养基,以满足您独特的研究需求。它们列出如下:

1. YPD培养基
这种营养培养基以液体(肉汤)或固体(琼脂)形式提供,用于酵母培养物的生长和繁殖。它主要含有细菌性生物蛋白胨、酵母提取物和葡萄糖。该培养基非选择性培养念珠菌、毕赤酵母、酿酒酵母和耐盐接合酵母。
 

2. 合成的营养缺陷型酵母培养基补剂
酵母中质粒的选择通常基于营养缺陷型突变菌株的使用,这类菌株不能在没有某种特定培养基成分(如氨基酸、嘌呤或嘧啶)的情况下生长。用含有突变基因的质粒转化使转化体能够在缺乏所需组分的培养基上生长。因此,营养缺陷型培养基补剂可用来选择转化的酵母培养物。
有关更详细的信息,请参见下文的选择指南。
 

3. 酵母氮基(含有或不含氨基酸的YNB)
酵母氮基是一种常用的生长培养基,用于培养酵母。这种营养丰富的微生物培养基含有氮、维生素、微量元素和盐。它适用于根据氨基酸和碳需求对酵母进行分类。通过添加碳源,含有氨基酸的YNB可用于真菌的敏感性测试。
 

 4. EnPressoTM Y已知成分生长系统是含有缓冲盐、氨基酸、碳源和多糖的专利配方。与传统培养基相比,该配方的蛋白质产量至少增加2倍。
 

 Sigma-Aldrich酵母培养基选择指南

YPD和YNB培养基

产品编号 名称 描述 培养基成分 选择性 重组
Y1375 YPD肉汤 酵母的液体生长培养基 20 g/L蛋白胨
10 g/L酵母提取物
20 g/L葡萄糖
非选择性培养念珠菌、毕赤酵母、酿酒酵母和耐盐接合酵母。 -  1L蒸馏水中悬浮50g
- 121℃高温高压灭菌15分钟
Y1500 YPD琼脂 酵母的固体生长培养基 20 g/L蛋白胨
10 g/L酵母提取物
20 g/L葡萄糖
15 g/L琼脂
非选择性培养念珠菌、毕赤酵母、酿酒酵母和耐盐接合酵母。 - 1L蒸馏水中悬浮65g
- 边搅拌边加热煮沸,直至完全溶解所有成分
- 121℃高温高压灭菌15分钟
Y0626 不含氨基酸的酵母氮基 常用酵母生长培养基 由氮源、维生素、微量元素和盐组成 非选择性培养念珠菌、毕赤酵母、酿酒酵母和耐盐接合酵母。 - 搅拌悬浮6.8g酵母氮基粉、5g葡萄糖和5-10mg适当的氨基酸于100mL水中,制成10x浓缩原液
- 如果需要,加热帮助溶解
- 过滤器除菌,并在2-8°C下储存
- 将100mL浓缩原液加入900mL无菌水中,使10x浓缩原液稀释至1x工作溶液
Y1250 含氨基酸的酵母氮基 常用非选择性酵母生长培养基 由氮源、维生素、氨基酸、微量元素和盐组成 非选择性培养念珠菌、毕赤酵母、酿酒酵母和耐盐接合酵母。 - 搅拌悬浮6.7g酵母氮基粉和5g葡萄糖于100mL水中,制成10x浓缩原液
- 如果需要,加热帮助溶解
- 过滤器除菌,并在2-8°C下储存
- 将100mL浓缩原液加入900mL无菌水中,将10倍浓缩原液稀释至1x工作溶液
Y22001 EnPresso Y已知成分培养基 已知成份培养基 含有缓冲盐、氨基酸、碳和多糖的专利配方。 非选择性培养毕赤酵母和酿酒酵母 将片剂加入水中,摇晃溶解制成悬液。

 

营养缺陷型合成培养基补剂

说明:需要将以下氨基酸和其他营养素的混合物添加到不含氨基酸的酵母氮基(货号:Y0626)中。

产品编号 缺失的补剂
氨基酸 其他营养素
Y1501 尿嘧啶 除亮氨酸外,所有标准氨基酸的浓度为76 mg/L,亮氨酸浓度为380 mg/L。 腺嘌呤(18 mg/L),肌醇(7 mg/L),对氨基苯甲酸(8 mg/L)
Y1751 组氨酸 除组氨酸外的所有标准氨基酸。除亮氨酸外,所有氨基酸的浓度为76 mg/L,亮氨酸浓度为380 mg/L。 腺嘌呤(18 mg/L),肌醇(76 mg/L),尿嘧啶(76 mg/L),对氨基苯甲酸(8 mg/L)
Y1896 赖氨酸 除赖氨酸外的所有标准氨基酸。除亮氨酸外,所有氨基酸的浓度为76 mg/L,亮氨酸浓度为380 mg/L。 腺嘌呤(18 mg/L),肌醇(76 mg/L),尿嘧啶(76 mg/L),对氨基苯甲酸(8 mg/L)
Y1376 亮氨酸 除亮氨酸外的所有标准氨基酸。所有氨基酸的浓度均为76 mg/L。 腺嘌呤(18 mg/L),肌醇(76 mg/L),对氨基苯甲酸(8 mg/L),尿嘧啶(76 mg/L)
Y1876 色氨酸 除色氨酸外的所有标准氨基酸。除亮氨酸外,所有氨基酸的浓度均为76 mg/L,亮氨酸浓度为380 mg/L。 腺嘌呤(18 mg/L),肌醇(76 mg/L),对氨基苯甲酸(8 mg/L),尿嘧啶(76 mg/L)
Y0750 亮氨酸和色氨酸 除亮氨酸和色氨酸外的所有标准氨基酸。所有氨基酸的浓度均为76 mg/L。 腺嘌呤(18 mg/L),肌醇(76 mg/L),对氨基苯甲酸(8 mg/L),尿嘧啶(76 mg/L)
Y1771 尿嘧啶、亮氨酸和色氨酸 除亮氨酸和色氨酸外的所有其他标准氨基酸。所有氨基酸的浓度均为76 mg/L。 腺嘌呤(18 mg/L),肌醇(76 mg/L),对氨基苯甲酸(8 mg/L)
Y2146 组氨酸、亮氨酸和色氨酸 除组氨酸、亮氨酸和色氨酸外的所有标准氨基酸。所有氨基酸的浓度均为76 mg/L。 腺嘌呤(18 mg/L),肌醇(76 mg/L),对氨基苯甲酸(8 mg/L),尿嘧啶(76 mg/L)
Y2021 组氨酸、亮氨酸、色氨酸和腺嘌呤 除组氨酸、亮氨酸和色氨酸外的所有标准氨基酸。所有氨基酸的浓度均为76 mg/L。 肌醇(76 mg/L),对氨基苯甲酸(8 mg/L),尿嘧啶(76 mg/L)。
Y2001 组氨酸、亮氨酸、色氨酸和尿嘧啶 除组氨酸、亮氨酸和色氨酸外,所有标准氨基酸的浓度均为76 mg/L。 腺嘌呤(18 mg/L),肌醇(76 mg/L),对氨基苯甲酸(8 mg/L)。

 

其他酵母培养补剂

产品编号 名称
描述 应用 特点及优点
T2559 EZMix™ 胰蛋白胨 蛋白胨来自酪蛋白的酶促消化,富含色氨酸,另外还含有氮、氨基酸和维生素的混合物。 常用于培养基 胰蛋白胨EZMix粉:
- 无尘颗粒,操作更安全,混合更迅速
- 大包装便于扩大规模
G5516 甘油 粘稠液体,广泛应用于分子生物学研究 用于储存微生物原液 该产品为分子生物学级,适用于分子生物学应用。

 

 Sigma-Aldrich合成培养基的成长测试结果

+ = 观察到成长; = 未观察到成长
 

Sigma-Aldrich合成培养基的成长测试结果

 材料

     

参考文献

  1. Atlas, R. M. (2004). Handbook of microbiological media (Vol. 1). CRC press.
  2. F. Sherman, Getting started with yeast, Methods Enzymol. 350, 3-41 (2002)
  3. Kaiser C., Michaelis, S., and Mitchel, A., Methods in Yeast Genetics, a Cold Spring Harbor Laboratory Manual (Cold Spring Harbor, NY: 1994).