Duolink In Situ后复染实验方案

我们建议在Duolink In Situ 荧光用户手册的第7.3节第5步完成扩增步骤后进行复染操作。以下实验方法以使用直接标记的FITC抗α微管蛋白抗体进行复染为例:

在室温下进行以下步骤

  1. 将扩增-聚合物溶液从玻片上移去。
  2. 用1x 洗涤缓冲液B洗涤玻片2 x 10 min。
  3. 将玻片移至1x 洗涤缓冲液A中放置1 min。
  4. 进入至复染操作步骤并将样品用如FITC标记的小鼠抗α-微管蛋白抗体孵育40 min。如果抗体用于复染,则需要与Duolink检测采用不同的稀释比例。建议在复染抗体孵育前加入封闭步骤。
  5. 用1x 洗涤缓冲液A洗涤玻片2 x 2 min。
  6. 用0.01x 洗涤缓冲液B洗涤玻片1 min。
  7. 按照Duolink In Situ 荧光用户手册的第7.3节第7步中的实验方法进行封片。
     
Single recognition of HER2 in SK-BR-3 cells

 

上图:SK-BR-3细胞中HER2的单一识别。红色:PLA信号,每个代表一个HER2蛋白。绿色:α-微管蛋白复染。蓝色:核。PLA可探测抗兔PLUS及MINUS橙色,Duolink In Situ检测试剂。

 

定制服务

您的实验是否有额外的定制需求? 我们将竭诚为您服务。欢迎了解我们的定制服务计划的更多信息,加速您的Duolink®PLA项目。

 

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