采用磁性琼脂糖微珠进行FLAG免疫沉淀的自动化实验方案

 

货号 M8823

将微珠转移至结合板-NUNC 2000ul中

第1步:FLAG免疫沉淀

FLAG磁珠(50 ul 的50%浆)

  • 平板:样品板,NUNC 2 ml深孔板
  • 孵育时间:4小时
  • 搅拌:是

 

注:为了防止微珠在孔底聚集,在每步之间可用24 x 10分钟的微珠收集步骤进行分离。

 


将微珠转移至洗涤板1- NUNC 2000 ul

步骤2:洗涤1

  • 体积:500 µl
  • 孵育时间:5分钟
  • 搅拌:是

 


将微珠转移至洗涤板2- NUNC 2000 ul

步骤3:洗涤2

  • 体积:500 µl
  • 孵育时间:5分钟
  • 搅拌:是

 


将微珠转移至洗涤板3- NUNC 2000 ul

步骤4:洗涤3

  • 体积:500 µl
  • 孵育时间:5分钟
  • 搅拌:是

 


将微珠转移至洗脱板2 – NUNC 300 ul

步骤5:洗脱1

  • 体积:500 µl
  • 孵育时间:30分钟
  • 搅拌:是
 

将微珠转移至洗脱板2 – NUNC 300 ul

步骤6:洗脱1

  • 体积:500 µl
  • 孵育时间:30分钟
  • 搅拌:是

 


IP及洗涤液成分

  • 150 mM NaCl
  • 50 mM Tris pH 7.5
  • 1 mM EDTA
  • 0.5% NP40
  • 10%甘油

 


洗脱液成分:(如上但具有更低的NP40浓度)

  • 150 mM NaCl
  • 50 mM Tris pH 7.5
  • 1 mM EDTA
  • 0.05% NP40
  • 10%甘油
  • FLAG肽:500 µg /ml

 

 

材料