异硫氰酸荧光素葡聚糖

异名:FITC-葡聚糖
 

 结构

葡聚糖是脱水葡萄糖的聚合物。它由大约95%的α-D-(166) 键组成。剩余的(163)键是葡聚糖的分支。1,2,3 分支长度的冲突数据意味着平均分支长度小于三个葡萄糖单位。4,5 但是,其他方法表明,分支大于50的葡萄糖单位存在。6,7 已发现天然葡聚糖的分子量(MW)在900万至5亿之间。8,9,10 较低MW的葡聚糖将表现出略少的分支4,并且具有更窄的MW分布范围。11 MW大于10,000的葡聚糖表现得好像它们是高度支化的。随着MW增加,葡聚糖分子获得更大的对称性。7,12,13 MW为2,000至10,000的葡聚糖,表现出可膨胀线圈的特性。12 MW低于2,000的葡聚糖更像棒状。14 葡聚糖的MW通过以下一种或多种方法测量:低角度激光散射、15 分子筛色谱、16 铜络合、17 蒽酮试剂,18 比色还原糖测定和粘度。12
 

荧光图像

 物理特性

FITC-葡聚糖的近似斯托克斯半径如下:11

 

MW 4,000 约 14 埃
MW 10,000 约 23 埃
MW 20,000 约 33 埃
MW 40,000 约 45 埃
MW 70,000 约 60 埃
MW 150,000 约 85 埃

FITC以每摩尔葡萄糖0.003至0.02摩尔FITC的频率随机缀合至葡聚糖的羟基。
 

 荧光特性

FITC-葡聚糖的激发最大值为490nm。发射最大值为520 nm。11 荧光随pH增加而增加,在pH为8及以上时为最佳。11
 

 制备方法

Sigma葡聚糖衍生自肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides),菌株B 512。通过有限的水解和分馏,产生各种不同的MW。我们供应商的确切方法是专有的。分馏可以通过分子筛色谱16 或乙醇分馏来完成,其中最大MW的葡聚糖首先沉淀。19 与葡聚糖羟基的FITC缀合在DMSO中进行。20
 

 储存 / 稳定性

在2-8°C下避光妥善储存,FITC-葡聚糖粉末应可保持稳定至少两至三年。
 

 溶解度 / 溶液稳定性

Sigma通常测试FITC葡聚糖在水中在25 mg/ml或更高浓度时的溶解度。应该避光保存溶液。在体内,FITC-葡聚糖稳定超过24小时。21
 

 应用

FITC-葡聚糖广泛用于利用微荧光法进行微循环和细胞渗透性研究。22,23 FITC-葡聚糖已被用于研究植物细胞壁孔隙度24 以及毛细血管渗透性。25,26 已显示血浆蛋白不与FITC-葡聚糖结合。26


 材料

     

 参考文献

  1. Rankin, J.C. and Jeanes, A., J. Am. Chem. Soc., 76, 4435 (1954).
  2. Dimler, R.J. et al., J. Am. Chem. Soc., 77, 6568 (1955).
  3. Van Cleve, J.W. et al., J. Am. Chem. Soc., 78, 4435 (1951).
  4. Lindberg, B. and Svensson, S., Acta. Chem. Scand., 22, 1907 (1968).
  5. Larm, O. et al., Carbohydr. Res., 20, 39 (1971).
  6. Bovey, F.A., J. Polym. Sci., 35, 167 (1959).
  7. Senti, R.F. et al., J. Polym. Sci., 17, 527 (1955).
  8. Arond, L.H. and Frank, H.P., J. Phys. Chem., 58, 953 (1954).
  9. Elias, H.G., Makromol. Chem., 33, 166 (1959).
  10. Antonini, E. et al., Biopolymers, 2, 27 (1964).
  11. Supplier's data.
  12. Granath, K.A., J. Colloid Sci., 13, 308 (1958).
  13. Wales, M. at al., J. Polym. Sci., 66, 101 (1979).
  14. Gekko, K., Am. Chem. Soc. Symposium Series, 150, 415 (1981).
  15. Allen, P. W., Techiques of Polymer Characterization, Butterworths Scientific Publications, p. 131 (1959).
  16. Granath, K.A. and Flodin, P., Makromol. Chem., 48, 160 (1961).
  17. Journal of Research of the National Bureau of Standards, 50, 81 (1953).
  18. Jermyn, M.A., Anal. Biochem., 68, 332 (1975).
  19. Ingelman, B. and Halling, M.S., Ark. Kemi., 1, 61 (1949).
  20. De Belder, A.N. and Gratath, K.A., Carbohydrate Res., 30, 375 (1973).
  21. Arfors, K.E. and Hint, H., Microvasc. Res., 3, 440 (1971).
  22. Arfors, K.E. and Rutili, G., Microvasc. Res., 4, 466 (1972).
  23. Arfors, K.E. and Rutili, G., Abstracts. VII Conference on Microcirculation, Aberdeen, p. 3 (1972).
  24. Baron-Epal, O. et al., Planta, 175, 389 (1988).
  25. Rutili, G.and Arfors, K. E., Abstracts. Nordic Microcirculation Group Meeting, Ustaoset (1973).
  26. Rutili, G. and Arfors, K.E., Abstracts. VII Conference on Microcirculation, Aberdeen, p. 101 (1972).