胶凝剂 – 植物组织培养方案

琼脂一直被用来固化植物组织培养的培养基。使用的琼脂或凝胶剂的类型可影响培养组织的生长。在任何研究或生产操作中,胶凝剂的纯度和成本都是重要的因素。我们已经扩大了我们的胶凝剂系列,以便在根据您的特殊要求选择植物细胞培养测试胶凝剂时提供更多的选择。下 列出的一些标准可帮助您为应用程序选择合适的产品。
 

 藻酸盐、琼脂凝胶和植物凝胶的制备

藻酸盐制剂 (产品编号 A0682)

海藻酸已被用作类似于琼脂糖的物理支持物,并用于制备固定化悬浮细胞和原生质体嵌入其中的珠子(Adaoha Mbanaso and Roscoe,1982;Chie 和 Cantliffe,1989 年;Draget 等,1988;Larkin 等,1988)。海藻酸的水溶液在室温下在某些阳离子(特别是钙)存在的条件下形成凝胶。这种凝胶基质可以通过添加螯合剂(例如柠檬酸盐)来实现。包埋在藻酸盐珠中的细胞很容易操纵,而且造成物理损伤的几率较小。

藻酸盐应在含有适当渗透剂的低钙(如 2 mm)缓冲介质中制备为 1.75-4.0% (w/v) 浓度。搅拌至完全溶解后,可将藻酸盐溶液过滤灭菌 (0.45 μm) 或高压灭菌。然而,Larkin 等人(1988) 指出,随着高压灭菌时间的增加,造珠能力会下降。原生质体通过在低钙培养基中离心的方式浓缩,并以适当的密度(例如 1 × 105)加入到藻酸盐中。将原生质体——藻酸盐溶液滴加到含有 50 mm CaCl2 和适当渗透压的溶液中。每一滴都会形成一个珠子。珠子应保留在 CaCl2 中 45 min,以确保完全凝胶化。

Agargel™ 制剂 (产品编号 A3301)

Agargel 是琼脂和 Phytagel™ 的混合物,开发用于帮助控制植物组织培养物中的玻璃化。这款产品提供了两种产品的积极属性,优于 Phytagel (存在玻璃化的问题)。它也是琼脂的经济替代品。Agargel 生产半透明凝胶,可以更好地检测污染。根据所需的凝胶强度,本品的使用浓度应为 3.5-5.0 g/L。

Phytagel™ 制剂 (产品编号 P8169)

Phytagel 是由葡萄糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖组成的细菌基质产生的琼脂替代品。它能产生透明、无色、高强度的凝胶,有助于微生物污染的检测。Phytagel 提供了一种取代琼脂作为胶凝剂的经济替代品。使用浓度为 1.5-2.5 g/L 的 Phytagel,为防止结块,应将 Phytagel 加入到快速搅拌的、室温下的培养基中。
 

 琼脂产品的描述和使用

产品编号 说明 使用 胶凝温度 0C pH 值在 1.5% 灰分含量 典型 ICP 分析 (%)
Ca Mg K P Na
A1296 琼脂 用于大多数研究和生产需要的普通琼脂。
按 6-12 g/L 使用。
32-35 7.0-7.5 2-5% 0.30 0.10 0.01 0.01 0.5
A6686 琼脂细菌学 大多数微生物工作的细菌级琼脂。
按 6-12 g/L 使用。
32-39 6.5-7.5 3-7% 0.17 0.09 0.80 3.1
A4550 A 型琼脂 通用琼脂;良好的细菌学级琼脂。
按 6-12 g/L 使用。
26-28 7.2-7.7 5-6% 0.01 0.01 0.1 0.17 1.8
A4675 E 型琼脂 通用琼脂;
按 5-10 g/L 使用。
26-28 7.5-8.0 3-4% 0.02 0.02 0.07 0.13 1.2
A4800 M 型琼脂 通用琼脂;
按 5-11 g/L 使用。
34-36 7.0-7.5 3-6% 0.09 0.14 0.07 0.01 1.4
A9799 高凝胶强度琼脂 需要使用更牢固的凝胶时使用。
按 4-8 g/L 使用。
34-37 6.5-7.0 3-4% 0.03 0.00 0.07 0.09 0.72
A7921 纯化琼脂 用于研究和原生质体培养的高纯度琼脂。
按 6-12 g/L 使用。
30-35 6.5-7.0 2.0% 0.02 0.01 0.01 0.01 0.35
A8678 水洗琼脂 用于研究和原生质体培养的高纯度琼脂。通过一系列纯化水和溶剂洗涤制备。
按 6-10 g/L 使用。
25-27 7.0-7.5 2.2% 0.15 0.08 0.38
A9045 琼脂糖 一种低凝胶温度的琼脂糖,具有极好的透明度。
按 6-10 g/L 使用。
26-30 7.0-8.0 <1%
A0682 海藻酸 形成凝胶的多糖醛酸。用于原生质体培养或细胞悬浮培养的优良产品。 0.17 0.01 2.3 10.1
A3301 Agargel™ 琼脂和植物凝胶的混合物具有两种产品的优势。生产半透明凝胶。
按 3.5-5.0 g/L 使用。
26-28 7.2-7.7 4-5% 0.25 0.06 0.04 0.08 1.05
P8169 Phytagel™ 生产透明、无色的高强度凝胶。
按 1.5-2.5 g/L 使用。
27-31 6.5-7.0 9.5% 0.85 0.35 1.70 0.15 0.45