生长调节剂 — 植物组织培养实验方案

已有充分记录显示植物生长调节剂在植物组织培养中的重要性。Sigma提供广泛的植物生长调节剂,专门针对植物细胞培养进行了测试。测定了每种产品的物理和化学特性后,按照为粉末培养基确定的标准进行生物学测试。
测定了每种植物生长素在体外环境下促进愈伤组织生长和/或发根的作用。测定了每种细胞分裂素刺激枝条产生的作用。

将植物生长调节剂溶液通过双0.2 μm过滤单元无菌过滤到无菌瓶中。
每批植物生长调节剂溶液均根据美国药典 第XXI卷,以及植物细胞培养中的生物学测试标准,进行了测试,这些标准与我们的植物组织培养基所使用的标准完全相同。

仅供实验室、植物组织培养基制备、以及植物研究使用。不得用作发达植物的植物生长调节剂。不得用于药物或家庭用途。


 制备和使用

制备1 mg/ml原液:将100 mg植物生长调节剂加入100 ml容量瓶或其他玻璃容器中。
 加入2-5 ml溶剂以溶解粉末。一旦完全溶解,用双加工水(产品编号:W3500)定容。
 可能需要在加入水的同时搅拌溶液以使材料保持在溶液中。按照表中的建议存储原液。将1.0 ml原液加入1升培养基中,使培养基中的植物生长调节剂的最终浓度为1.0 mg/L。(见下表。)

原液体积 =(所需的激素浓度 X 培养基体积)/原液浓度

植物细胞培养测试生长素通常用于植物细胞培养,浓度范围为0.01-10.0 mg/L。
 当以适当的浓度添加时,它们可以调节细胞伸长、组织肿胀、细胞分裂、不定根的形成、对不定枝和腋生枝形成的抑制、愈伤组织发出和生长、以及诱导胚胎发生。

植物细胞培养测试细胞分裂素通常用于植物细胞培养,浓度范围为0.1-10.0 mg/L。
 当以适当的浓度添加时,它们可以调节细胞分裂,刺激腋生枝和不定枝增殖,调节分化,抑制根形成,激活RNA合成,并刺激蛋白质和酶活性。


 摩尔当量和溶液制备表


 生长素

 

  摩尔当量 溶液制备
品名 产品编号 摩尔 重量 µM,对1mg/L 溶剂 稀释液 粉剂储存 液体储存 灭菌 工作浓度(mg/L)
p-对氯苯氧乙酸(4-CPA) C0413 186.6 5.36 EtOH RT 2-8°C CA 0.1-10.0
2,4-二氯苯氧乙酸 D7299 221 4.53 RT 2-8°C CA 0.01-6.0
2,4-二氯苯氧乙酸钠盐 D6679 243 4.12 RT 2-8°C CA 0.01-6.0
吲哚-3-乙酸游离酸(IAA) I2886 175.2 5.71 EtOH/1N NaOH -0°C -0°C CA/F 0.01-3.0
吲哚-3-乙酸钠盐 I5148 197.2 5.07 2-8°C -0°C CA/F 0.01-3.0
吲哚-3-乙酸甲酯

I9770 189.2 5.29 2-8°C 2-8°C
吲哚-3-乙酰基-L-天冬氨酸 I9387 290.3 3.45 0.5N NaOH -0°C -0°C F 0.01-5.0
吲哚-3-丁酸(IBA) I5386 203.2 4.90 EtOH/1N NaOH 2-8°C -0°C CA/F 0.1-10.0
吲哚-3-丁酸钾盐(K-IBA) I7512 241.3 4.14 2-8°C -0°C CA/F 0.1-10.0
α-萘乙酸游离酸(NAA) N0640 186.2 5.37 1N NaOH RT 2-8°C CA 0.1-10.0
β-萘氧基乙酸游离酸(NOA) N3019 202.2 4.95 1N NaOH RT 2-8°C CA 0.1-10.0
苯乙酸(PAA) P6061 136.2 7.34 EtOH RT 2-8°C CA/F 0.1-50.0
毒莠定 P5575 241.5 4.14 DMSO RT 2-8°C CA 0.01-10.0
2,4,5-三氯苯氧乙酸(2,4,5-T) T5785 255.5 3.91 EtOH RT 2-8°C CA 0.01-5.0
2,3,5-三碘苯甲酸游离酸(TIBA) T5910 499.8 2.00 1N NaOH -0°C -0°C F 0.05-5.0


 细胞分裂素

 

  摩尔当量 溶液制备
品名 产品编号 摩尔 重量 µM,对1mg/L 溶剂 稀释液 粉剂储存 液体储存 灭菌 工作浓度(mg/L)
腺嘌呤游离碱 A5665 135.1 7.40 1.0 HCl RT 2-8°C CA 50-250
腺嘌呤半硫酸盐 A2545 184.2 5.43 RT 2-8°C CA 50-250
6-苄氨基嘌呤(BA) B3408 225.3 4.44 1N NaOH RT 2-8°C CA/F 0.1-5.0
6-苄氨基嘌呤盐酸盐 B5920 261.7 3.82 RT 2-8°C CA/F 0.1-5.0
6-苄氨基嘌呤(BA) B3274 225.3 4.44 1N NaOH RT 2-8°C CA/F 0.1-5.0
N-苄基-9-(2-四氢吡喃基)腺嘌呤(BPA) B2275 309.4 3.23 EtOH -0°C -0°C CA/F 0.1-5.0
N-(2-氯-4-吡啶基)-N'-苯基脲(4-CPPU) C2791 247.7 4.04 DMSO 2-8°C 2-8°C F 0.001-1.0
6-(γ,γ-二甲基烯丙基氨基)嘌呤(2iP) D7674 203.2 4.92 1N NaOH -0°C -0°C CA/F 1.0-30.0
6-(γ,γ-二甲基烯丙基氨基)嘌呤(2iP) D5912 203.2 4.92 1N NaOH -0°C -0°C CA/F 1.0-30.0
1,3-二苯基脲(DPU) D7535 212.3 4.71 DMSO RT 2-8°C F 0.1-1.0
激动素 K0753 215.2 4.65 1N NaOH -0°C -0°C CA/F 0.1-5.0
激动素 K3378 215.2 4.65 1N NaOH -0°C -0°C CA/F 0.1-5.0
激动素 K3253 215.2 4.65 1N NaOH -0°C -0°C CA/F 0.1-5.0
激动素盐酸盐 K1885 251.7 3.97 -0°C -0°C CA/F 0.1-5.0
1-苯基-3-(1,2,3-噻二唑-5-基)脲 P6186 220.2 4.54 DMSO RT 2-8°C CA/F 0.001-0.05
反式玉米素游离碱 Z0876 219.2 4.56 1N NaOH -0°C -0°C CA/F 0.01-5.0
玉米素 Z0164 219.2 4.56 1N NaOH -0°C -0°C CA/F 0.01-5.0
反式玉米素盐酸盐 Z2753 255.7 3.91 -0°C -0°C CA/F 0.01-5.0
反式玉米素核糖核苷 Z3541 351.4 2.85 1N NaOH -0°C -0°C F 0.01-5.0
* CA = 可与其他培养基组分一起高温高压灭菌。F = 过滤灭菌。CA/F = 可与其他培养基成分一起高温高压灭菌,但可能会损失一些活性。这可以通过增加组分浓度来补偿。组分可以过滤灭菌。


 其他植物生长调节剂

   

   摩尔当量 溶液制备
品名 产品编号 摩尔 重量 µM,对1mg/L 溶剂 稀释液 粉剂储存 液体储存 灭菌 工作浓度(mg/L)
(±)-顺式,反式脱落酸(ABA)  A1049  264.3  3.78  1N NaOH  水  -0°C  -0°C  CA/F  0.1-10.0 
环丙嘧啶醇  A9431  256.3  3.90  DMSO  —  2-8°C  -0°C  CA/F  1.0-10.0 
氯化胆碱(CCC)  C4049  158.1  6.33  水  —  RT  2-8°C  不超过500 
3,6-二氯邻茴香酸(麦草畏)  D5417  221.0  4.52  EtOH / 水  —  2-8°C  2-8°C  0.01-10.0 
赤霉酸(GA3)  G7645  346.4  2.89  EtOH  —  RT  2-8°C  CA/F  0.01-5.0 
赤霉酸钾盐(K-GA3)  G1025  384.5  2.60  水  —  2-8°C  -0°C  CA/F  0.01-5.0 
赤霉素A4游离酸(GA4)  G7276  332.4  3.01  EtOH  —  -0°C  -0°C  0.01-5.0 
(±)-茉莉酸  J2500  210.3  4.76  EtOH  —  2-8°C  -0°C  0.01-100.0 
间苯三酚  P1178  126.1  7.93  水  —  RT  2-8°C  CA/F  不超过162 
N-(膦酰基甲基)甘氨酸(草甘膦)  P9556  169.1  5.91  1N NaOH  水  RT  2-8°C  — 
珀酸2,2-二甲基酰肼  S2022  160.2  6.24  水  —  2-8°C  2-8°C  CA/F  0.1-10.0 
* CA = 可与其他培养基组分一起高温高压灭菌。F = 过滤灭菌。CA/F = 可与其他培养基成分一起高温高压灭菌,但可能会损失一些活性。这可以通过增加组分浓度来补偿。组分可以过滤灭菌。