诱导多能干细胞分化方案

成年体细胞可被重编程为具有关键重编程基因(OCT4、KLF4、SOX2、cMYC、NANOG 和 LIN28)过表达的诱导多能干细胞 (iPSCs)。人类 iPSCs 具有分化成身体任何细胞类型的独特能力,包括:

  • 外胚层:  神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞、视网膜上皮细胞 (RPE)、表皮、毛发和角质形成细胞。
  • 内胚层: 肝细胞、胰岛 β 细胞、肠上皮细胞、肺泡细胞。
  • 中胚层:  造血细胞、内皮细胞、心肌细胞、平滑肌细胞、骨骼肌细胞、肾细胞、脂肪细胞、软骨细胞和骨细胞。

我们提供大量用于控制人类 iPSCs 细胞命运的细胞培养基


我们提供大量用于控制人类 iPSCs 细胞命运的细胞培养基、补充剂、生物活性小分子和生长因子。下图表重点介绍了用于将人类 iPSC 区分为不同细胞谱系的最广泛使用的方案、培养基和特征抗体。

 

分化细胞类型 培养基和添加物 定性抗体 参考资料
神经干细胞 细胞培养基/F12谷氨酰胺,Neurobasal 培养基N2B27, SB431542CHIR99021化合物 E人体 LIF头蛋白bFGFEGF

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巢蛋白PAX6OTX2SOX2  通过 SMAD 信号的双重抑制实现人 ES 和 iPS 细胞的高效神经转化。
皮质神经元 细胞培养基/F12谷氨酰胺,Neurobasal 培养基N2B27SB431542CHIR99021化合物 E头蛋白bFGFEGF

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MAP2TBR1CTIP2VGLUT1  人类多能干细胞定向分化为大脑皮层神经元和神经网络
多巴胺能神经元 细胞培养基/F12谷氨酰胺,Neurobasal 培养基N2B27SB431542CHIR99021化合物 E, 人体 LIFSHHFGF8BDNFGDNFTGFβ3cAMP

 订购完全培养基
TH, TUJ-1, LMX1A, FOXA2, NURR1  人类多能干细胞定向分化多巴胺神经元
运动神经元  细胞培养基/F12谷氨酰胺, 神经基础培养基  B27 SB431542CHIR99021 化合物 E全反式维甲酸 (ATRA)SHH BDNF CNTF,   GDNF 巢蛋白 TUJ-1 ChATIslet1 Hb9 Hoxa2  人诱导多能干细胞定向分化产生活性运动神经元
星形细胞  细胞培养基/F12,   谷氨酰胺,   B27 青霉素-链霉素   FBS bFGF CNTF BMP4 激活素 A 调蛋白 1β IGF-1  GFAP TUJ-1 CD44  在限定条件下从人类多能干细胞高效生成星形胶质细胞。
少突(神经)胶质细胞  细胞培养基/F12 谷氨酰胺,   神经基础培养基    B27 SB431542 CHIR99021 化合物 E ,   人 LIF 全反式维甲酸 (ATRA)  SHH ,  SAG  ,PDGF IGF-I NT3 胰岛素  ,   T3 cAMP  PAX6 OLIG2 NKX2.2 ,   O4 SOX10 MBP MAP2  诱导多能干细胞高效生成原发进展型多发性硬化症患者的髓鞘少突胶质细胞。
心肌细胞  RPMI 1640 B27 rH-白蛋白   ,L-抗坏血酸 2-磷酸  乳酸盐  CHIR99021 Wnt-C59  TNNT2 α-SMA α-辅肌动蛋白  vWF MLC2A MLC2V  化学定义的人心肌细胞生成。
骨骼肌  IMDM FBS 谷氨酰胺 青霉素-链霉素  非必需氨基酸 2-巯基乙醇 油酸  亚油酸  硫酸铁  葡萄糖酸铁钠 马血清 Y-27632 bFGF  CD13 CD31 CD56 CD44 CD45 CD49b CD146 MyHC  从人 ES 和患者特异性 iPS 细胞中高效衍生和诱导分化可扩增的骨骼肌原细胞。
血管内皮/平滑肌  细胞培养基/F12 谷氨酰胺,  神经基础培养基  ,  ,   B27 CHIR99021 生物  Y-27632 ,   BMP4 VEGF 毛喉素  PDGF-BB 激活素 A 肝素  CD31 CD144 vWF ,   I-CAM1 SMA   MyHC ,   VECAD PECAM  人类多能干细胞生成血管内皮和平滑肌细胞
肝细胞  RPMI 1640 B27 激活素 A BMP4 ,   HGF ,   制瘤素 M  FOXA2 SOX17 GATA4 ,   HNF4-α AFP ALB  从诱导多能干细胞高效生成人类肝细胞样细胞。
胰岛 β 细胞  细胞培养基/F12 IMDM 牛血清白蛋白  N2 B27 其   BMP4 激活素 A FGF7 头蛋白  bFGF EGF 烟酰胺  毒蜥外泌肽-4 ,   全反式维甲酸 (ATRA)  PDX1 FOXA2 SOX9 ,   HNF1β c-肽  胰岛素  生长抑素  人 ES 细胞和 iPS 细胞高效分化为成熟的胰腺胰岛素生成细胞。
 细胞培养基/F12 谷氨酰胺,  B27 抗坏血酸  ,   单硫甘油 牛血清白蛋白 青霉素-链霉素  ,   Y-27632 ,   Dorsomorphin SB431542 ,  IWP2CHIR99021 BMP4 bFGF 激活素 A   FGF-10 FGF7 EGF 全反式维甲酸 (ATRA)  FOXA2 SOX2 NKX2.1 p63 从人类多能干细胞高效生成肺和气道上皮细胞

Cell Culture