培养基灭菌 – 植物组织培养方案

植物组织培养基一般在 121°C 和 1.05 kg/cm2  (15-20 psi) 下高压灭菌。灭菌所需的时间取决于容器中培养基的体积。下面列出了不同体积培养基灭菌所需的最短时间。建议尽可能以小份分配培养基,因为许多培养基成分在长时间暴露于高温时会被分解。有证据表明,培养基暴露于超过 121°C 的温度下如果没有适当的凝胶或可能导致细胞生长不良。

植物组织培养基的最小高压灭菌时间

 

每个容器的培养基体积 (ml) 最小高压灭菌(分钟)*
25 20
50 25
100 28
250 31
500 35
1000 40
2000 48
4000 63
最小高压灭菌时间包括液体体积到达灭菌温度所需的时间
(121℃) 和在 121°C 下保持 15 min。 (Burger,1988)。不同的高压灭菌器,时间可能会有所不同。建议您使用系统进行验证。

几种培养基成分被普遍认为是不耐热的,不应高压灭菌。制备热不稳定组分的原液,并通过 0.22 μm 过滤器过滤灭菌至无菌容器中。将过滤后的溶液无菌加入已高压灭菌的培养基中,使其冷却至约 35-45℃,然后在无菌条件下分装培养基。建议使用您的系统进行实验。