電気泳動

mPAGE™ Bis-Tris プレキャストゲルを用いた電気泳動法

mPAGE™ Bis-Trisプレキャストゲルは、論文に必要な高解像のデータをお求めやすい価格帯でご提供します。ランタイムを短縮(最大で15分)しながらも、変わらぬタンパク質分離能を実現し、ほとんどの電気泳動槽に適合します。ぜひmPAGE™プレキャストゲルをお試しいただき、研究者の皆様にとって重要な時間とコストを節約してください。

  • 格安なコストで論文にお使いいただける高解像なデータを取得可能
  • 一般的な電気泳動槽のほぼすべてに適合
  • 最大15分の泳動時間短縮を実現
  • 中性pHのゲルによりタンパク質の変性を防止
  • 最大80μLのサンプル添加が可能な大容量ウェルサイズ
  • 湿式およびセミドライ式ウエスタンブロット転写を効率よく実施可能

mPAGE™プレキャストゲルを用いたタンパク質分離および転写

ポリアクリルアミドゲル電気泳動(PAGE)は、電気泳動移動度によってタンパク質を分離する普遍的な手法です。タンパク質を分離するにはnative-PAGEを用いて未変性のまま泳動する方法もありますが、一般的には分離前にジチオトレイトール(DTT)などの還元剤とドデシル硫酸ナトリウム(SDS)を用いて化学的に変性(または展開)させた状態で泳動します。SDS PAGEゲルは上記の手法で変性・展開させたタンパク質を分子量に基づいて分離するために使用され、サンプルを分子量マーカーなど既知の分子量のタンパク質と比較します。

分離

ゲル電気泳動法の泳動時間はゲルや泳動させる状態によって異なります。mPAGE™ bis-trisプレキャストゲルは、市販の同等製品と比較して解像度を損なうことなく最大で15分短い泳動時間で結果を得ることが可能です。(図1)。研究者の皆様の貴重な時間とコスト削減を実現します。

 

競合品T
泳動時間50分
mPAGE™プレキャストゲル
泳動時間35分

図1. mPAGE™ Bis-Trisプレキャストゲル(4-12%)と他社プレキャストbis-Trisゲルにおける電気泳動結果の比較。サンプル:未染色タンパク質マーカー、E.coli抽出物の連続希釈液。ランニングバッファー:MOPS

メンブレンへの転写

主にウエスタンブロット(免疫ブロット)などの検出方法で用いるため、タンパク質は分離後にメンブレンに転写します。特にウエスタンブロットのプロトコルでは、湿式(槽)またはセミドライ式の転写方法のいずれかを用いて電気泳動的に転写されます。mPAGE™ bis-trisプレキャストゲルは、湿式およびセミドライ式の転写のどちらにおいても、効率的なタンパク質転写が可能です。(図2)

湿式転写

Wet (tank) transfer and semi-dry transfer are the two most common transfer techniques used in Western blotting protocols. mPAGE precast gels provide good transfer for both methods. The image shows quality protein transfer from a serially diluted sample of A431 cell lystate for both wet and semi-dry transfer.

 

セミドライ式転写

Figure shows the stacked images of two Western blotting membranes after the immunodetection step. The proteins in the top image were transferred to the membrane using a wet transfer electrophoresis method. The proteins in the bottom image were transferred to the membrane using a semi-dry transfer electrophoresis method. Both images look identical, verifying that separated proteins can be transferred from mPAGE™ gels using either wet or semi-dry transfer methods.

図2. A431細胞溶液の連続希釈液をmPAGE™4-12%ゲルにロードし電気泳動を行った後、標準的な方法でImmobilon®-P膜に転写した。EGFR(180 kDa)、AKT1(60 kDa)およびヒストン(17 kDa)に結合した抗体とペルオキシダーゼ標識二次抗体と反応させたのち、Immobilon®Forte 化学発光基質を用いて検出

mPAGE™プレキャストゲルの選び方

SDS-PAGE用プレキャストゲルは分離するタンパク質の大きさに基づいて選択します。プレキャストゲルはいくつかのアクリルアミド濃度 もしくは、濃度に勾配のあるグラジエントゲルからお選びいただけます。一般的に、低濃度のゲルは高分子量タンパク質の分離に使用され、高濃度のゲルは低分子量のタンパク質の分離に使用されます。グラジエントゲルは濃度が一定のゲルよりも広範囲のタンパクを分離できます。 またゲル濃度に合わせてMOPSもしくはMESランニングバッファーを選択することでより精度の高い分離が行えます。MOPSは高濃度域のゲルで(図3)、MESは低濃度域のゲルで(図4)分離向上をもたらし得ます。以下の移動チャートを用いてご自身の電気泳動適用に最適なmPAGE™ゲルおよびバッファーをご確認ください。

Protein banding patterns for different mPAGE™ gel strengths run in Tris-MOPS running buffer. This migration chart can be used to determine the best mPAGE™ gel concentration and format for your gel electrophoresis application.

図3. Tris-MOPS SDSランニングバッファーを用いたmPAGE™プレキャストゲルの移動チャート

Protein banding patterns for different gel mPAGE™ strengths in MES SES running buffer. This migration chart can be used to determine the best mPAGE™ gel concentration and format for your gel electrophoresis application.

図4. MES SDSランニングバッファーを用いたmPAGE™プレキャストゲルの移動チャート

 

mPAGE™ Gels, Buffers, and Accessories

Product # Description
MPTA Adapters for mPAGE™ gels when using XCell SureLock® and other compatible electrophoresis tanks
MPMES MES SDS running buffer powder for mPAGE™ Bis-Tris gels pack of 5 ea (Each packet makes 1 liter of running buffer)
MPM0PS MOPS SDS running buffer powder for mPAGE™ Bis-Tris gels pack of 5 ea (Each packet makes 1 liter of running buffer)
MP41G10 mPAGE™ 4-12% Bis-Tris Precast Gel L × W × wells 10 cm × 8 cm × 10 well
MP41G12 mPAGE™ 4-12% Bis-Tris Precast Gel L × W × wells 10 cm × 8 cm × 12 well
MP41G15 mPAGE™ 4-12% Bis-Tris Precast Gel L × W × wells 10 cm × 8 cm × 15 well
MP8W10 mPAGE™ 8% Bis-Tris Precast Gel L × W × wells 10 cm × 8 cm × 10 well
MP8W12 mPAGE™ 8% Bis-Tris Precast Gel L × W × wells 10 cm × 8 cm × 12 well
MP8W15 mPAGE™ 8% Bis-Tris Precast Gel L × W × wells 10 cm × 8 cm × 15 well
MP81G10 mPAGE™ 8-16% Bis-Tris Precast Gel L × W × wells 10 cm × 8 cm × 10 well
MP81G12 mPAGE™ 8-16% Bis-Tris Precast Gel L × W × wells 10 cm × 8 cm × 12 well
MP81G15 mPAGE™ 8-16% Bis-Tris Precast Gel L × W × wells 10 cm × 8 cm × 15 well
MP10W10 mPAGE™ 10% Bis-Tris Precast Gel L × W × wells 10 cm × 8 cm × 10 well
MP10W15 mPAGE™ 10% Bis-Tris Precast Gel L × W × wells 10 cm × 8 cm × 15 well
MP10W12 mPAGE™ 10% Bis-Tris Precast Gel L × W × wells 10 cm × 8 cm × 12 well
MP12W10 mPAGE™ 12% Bis-Tris Precast Gel L × W × wells 10 cm × 8 cm × 10 well
MP12W12 mPAGE™ 12% Bis-Tris Precast Gel L × W × wells 10 cm × 8 cm × 12 well
MP12W15 mPAGE™ 12% Bis-Tris Precast Gel L × W × wells 10 cm × 8 cm × 12 well
MPSB-10ML mPAGE™ 4X LDS Sample Buffer
MPSB-250ML mPAGE™ 4X LDS Sample Buffer
MP41G12TR1 mPAGE™ Trial Kit includes 2 4-12% Bis-Tris precast gels, 10x8 cm, 12-well, MOPS SDS powder, makes 1L of running buffer, 2 tank adapters
MP42G12TR1 mPAGE™ Trial Kit includes two 4-20% Bis-Tris precast gels, 10x8 cm, 12-well, MOPS SDS powder, makes 1L of running buffer, 2 tank adapters
MP10W12TR1 mPAGE™ Trial Kit includes two 10% Bis-Tris precast gels, 10x8 cm, 12-well, MOPS SDS powder, makes 1L of running buffer, 2 tank adapters
MP41G12TR2 mPAGE™ Trial Kit includes two 4-12% Bis-Tris precast gels, 10x8 cm, 12-well, MES SDS powder, makes 1L of running buffer, 2 tank adapters
MP10W12TR2 mPAGE™ Trial Kit includes two 10% Bis-Tris precast gels, 10x8 cm, 12-well, MES SDS powder, makes 1L of running buffer, 2 tank adapters
MP12W12TR2 mPAGE™ Trial Kit includes two 12% Bis-Tris precast gels, 10x8 cm, 12-well, MES SDS powder, makes 1L of running buffer, 2 tank adapters
MPC0 Tool for operning mPAGE™ gel cassettes
MPTRB Transfer buffer powder for use with mPAGE™ Bis-Tris gels pack of 10 ea (Each packets makes 1 liter of transfer buffer at 1X)
MPBD When running a single gel, the buffer dam can be used to occupy space in the electrophoresis tank normally taken by another gel.