[Przejdź do zawartości](https://www.sigmaaldrich.com#main-content) [](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl) Produkty Koszyk0 PLPL Produkty [Zaloguj się / Zarejestruj się](https://www.sigmaaldrich.com/oidc-sign-in) [Wyszukiwanie zamówienia](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/order-lookup) [Szybkie zamówienie](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/quick-order) Koszyk0 [Strona główna](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl)[Elektroforeza żelowa](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/applications/protein-biology/gel-electrophoresis)Jak szybciej odlewać żele za pomocą systemu mPAGE® Lux Gel Casting System do żeli SDS-PAGE # Jak szybciej odlewać żele za pomocą systemu mPAGE® Lux Gel Casting System do żeli SDS-PAGE Odkryj system mPAGE® Lux Casting System do przygotowywania gotowych do użycia żeli SDS-PAGE w 3 minuty. Świeże żele SDS-PAGE gotowe do użycia, kiedy tylko ich potrzebujesz. Zainteresowany? Poproś o informacje poniżej. [Poproś o informacje](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/campaigns/mpage-lux-gel-casting-system) ## Łatwe odlewanie żelu Jak wykonać żel do SDS-PAGE? Wylewanie żelu zazwyczaj polega na wylewaniu żeli rozdzielających i układających w czasochłonnym, wieloetapowym procesie. Naukowcy mają zazwyczaj niewiele możliwości zaspokojenia swoich potrzeb w zakresie wylewania żelu i elektroforezy. Nasz innowacyjny system odlewania żelu mPAGE® Lux SDS-PAGE został zaprojektowany tak, aby zapewnić elastyczność żeli odlewanych ręcznie i niezawodność żeli prefabrykowanych, bez utraty jakości, czasu lub znacznie wyższych kosztów, które towarzyszą alternatywnym opcjom. Żele w mniej niż trzy minuty dzięki naszemu systemowi odlewania mPAGE® Lux. Możesz pożegnać się z konwencjonalnymi metodami i czasochłonnymi, ręcznymi etapami tworzenia żelu. To coś nowego.  __Przegląd sekcji__ - [Cechy i zalety systemu odlewania żelowego mPAGE® Lux](https://www.sigmaaldrich.com#features) - [Jakie są etapy odlewania żelu?](https://www.sigmaaldrich.com#steps) - [System mPAGE® Lux Casting i zestaw odczynników Bis-Tris](https://www.sigmaaldrich.com#castingsystem) - [Protokół odlewania żelu mPAGE® Lux SDS-PAGE](https://www.sigmaaldrich.com#protocol) - [Żele mPAGE® Lux Bis-Tris z buforami roboczymi MOPS i MES](https://www.sigmaaldrich.com#mops) - [Zrównoważone odlewanie żelu za pomocą systemu mPAGE® Lux](https://www.sigmaaldrich.com#sustainable) - [Szybka wizualizacja wykrywania białek w żelu bez barwienia przy użyciu systemu mPAGE® Lux](https://www.sigmaaldrich.com#rapid) - [Zamów system do odlewania mPAGE® Lux i powiązane odczynniki](https://www.sigmaaldrich.com#products) ## [](https://www.sigmaaldrich.com)Cechy i zalety systemu odlewania żelu mPAGE® Lux System odlewania żelu mPAGE® Lux zastępuje proces odlewania żelu białkowego szybszymi, prostszymi i bezpieczniejszymi metodami, zapewniającymi bardziej powtarzalne wyniki. System odlewania mPAGE® Lux pozwala utwardzić mini żel w 90 sekund, podczas gdy konwencjonalne metody zajmują ponad 90 minut. Nasz szybki proces odlewania z wykorzystaniem promieniowania UV przyspiesza utwardzanie odczynników mPAGE® Lux Bis-Tris, a chemia żelu Bis-Tris pozwala na skrócenie czasu pracy w porównaniu z metodami konwencjonalnymi. Zobacz, jak wykonać żele białkowe za pomocą tego systemu odlewania, oglądając poniższy film. Jednoetapowa fotopolimeryzacja z wykorzystaniem precyzyjnych elementów sterujących systemu oraz mniejsza liczba etapów przygotowania oznaczają mniejsze ryzyko popełnienia błędu. Nasz mPAGE® Caster zapobiega wyciekom, a zastosowanie żeli Bis-Tris zapewnia lepszą jakość pasm w porównaniu z ręcznie odlewanymi żelami Tris-Glycine. Ponadto zestaw odczynników mPAGE® Lux, zestaw odczynników mPAGE® TurboMix oraz gotowe żele mPAGE® wykorzystują chemikalia Bis-Tris i mają te same bufory robocze oraz barwniki do żeli. Nasz system odlewania mPAGE® Lux nie wykorzystuje APS ani TEMED i stanowi bezpieczniejszą opcję, ponieważ zawiera mniej toksycznych substancji chemicznych. Aby jeszcze bardziej poprawić kompatybilność i dostosować się do potrzeb użytkowników, oferujemy teraz naszą maskę mPAGE® Clip-on Mask. Dzięki masce mPAGE® Clip-on Mask podczas utwardzania żelu za pomocą systemu utwardzającego mPAGE® Lux Curing Station można stosować płytki Bio-Rad Mini-PROTEAN® Short Plates, Spacer Plates i Combs, a także płytki mPAGE® Mini Short Plates, Spacer Plates i Combs. Uwaga: Płytka mPAGE® Lux Masked Short Plate nie jest już wymagana w przypadku stosowania maski Clip-on Mask, chociaż płytka Masked Short Plate nadal może być używana. [Poproś o prezentację](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/campaigns/lead-generation/mpage-lux-demo-request) ### Tradycyjny proces ręcznego odlewania  __Rysunek 1.__Infografika przedstawiająca tradycyjny proces ręcznego odlewania żeli SDS-PAGE, pokazująca rozszerzone etapy i czas polimeryzacji wynoszący 90 minut lub więcej. ### mPAGE®Lux Przepływ pracy  __Rysunek 2.__Tradycyjne odlewanie żelu a proces mPAGE® Lux. System mPAGE® Lux Casting wymaga mniej czynności, skraca czas polimeryzacji i generuje mniej toksycznych odpadów w porównaniu z tradycyjną technologią odlewania żelu. Żele wytworzone za pomocą systemu mPAGE® Lux Casting są kompatybilne z mPAGE® Mini-gel Tank i Bio-Rad Mini-PROTEAN® Cells. Aby uzyskać doskonałą rozdzielczość i skrócić czas pracy, należy stosować nasze bufory mPAGE®. Żele mPAGE® Lux są kompatybilne z buforami kompatybilnymi z Bis-Tris i odczynnikami barwiącymi. ## [](https://www.sigmaaldrich.com)Jakie są etapy odlewania żelu? Wylewanie żelu SDS-PAGE często obejmuje ważenie, wstępne mieszanie roztworów żelu, wylewanie i czas oczekiwania na polimeryzację. Chociaż często wymieniane jako bardziej ekonomiczne rozwiązanie, konwencjonalne metody ręcznego wylewania żelu są czasochłonne i wymagają wielu praktycznych kroków, co może skutkować niespójnymi recepturami żelu. Jakość ręcznie wylewanych żeli i dane, które mogą pomóc w ich wytworzeniu, zależą od spójności receptur żelu białkowego, dzięki czemu cenne odczynniki i czas nie są ostatecznie marnowane na nieudane próby wylewania żelu.  __Rysunek 3.__Porównanie jakości danych uzyskanych przy użyciu żelu mPAGE® Lux Bis-Tris i ręcznie odlewanego żelu tris-glicynowego. Jakość pasm żelu mPAGE® Lux Bis-Tris (po lewej) w porównaniu z ręcznie odlewanym żelem tris-glicynowym (po prawej). Oba żele zawierają 10% akrylamidu i są nasycone lizatem komórek ludzkich A431. Czas trwania elektroforezy wynosi 42 minuty przy napięciu 200 V (żel Lux) i 119 minut przy napięciu 120 V (żel tris-glicynowy). Żele są barwione barwnikiem ReadyBlue™ Coomassie. System mPAGE® Lux Casting oferuje innowacyjne rozwiązanie dla procesu odlewania żeli. Nie musisz już wybierać między oszczędnością czasu a zasobami. Nasz nowatorski system odlewania żeli pozwala badaczom na łatwe i szybkie odlewanie żeli w razie potrzeby, przy ułamku kosztów związanych z technologiami żeli prefabrykowanych. Zwiększ wydajność swojego laboratorium i usprawnij proces elektroforezy żelowej dzięki systemowi mPAGE® Lux Casting.  __Rysunek 4.__Porównanie metod transferu Western blotting dla metod mokrej, szybkiej i półsuchej. Porównania przeprowadzono przy użyciu 12% żeli mPAGE® Lux Bis-Tris, które poddano titracji lizatem komórek ludzkich A431 i różnymi metodami transferu na membrany Immobilon®-P. Membrany poddano blotowaniu przy użyciu przeciwciał anty-EGFR i anty-ErK1/2, a następnie wykryto przy użyciu substratu Immobilon® ECL Ultra Western HRP. Metoda Turbo = transfer przy użyciu systemu transferowego Bio-Rad Trans-Blot® Turbo™ i pakietów transferowych Trans-Blot® Turbo™.   __Rysunek 5.__ Powtarzalność żeli mPAGE® Lux Bis-Tris. __A.__ Wytworzono cztery żele 8% i poddano je titracji lizatem komórek ludzkich A341, a następnie zabarwiono barwnikiem ReadyBlue™ Coomassie. __B.__ Dla każdego żelu obliczono względną odległość migracji (Rf) dla niebarwionego markera masy cząsteczkowej. Dla każdego pasma białkowego podano odchylenie standardowe.  __Rysunek 6.__Analiza okresu przydatności odczynnika mPAGE® Lux Bis-Tris. Żele mPAGE® Lux Bis-Tris odlane przy użyciu odczynników __(A)__ 0 miesięcy, __(B)__ 6 miesięcy lub __(C)__ 12 miesięcy, lub __(D)__ 24 miesięcy. Nie zaobserwowano żadnych różnic w przebiegu lub czasie trwania. ## [](https://www.sigmaaldrich.com)System odlewania mPAGE® Lux i zestawy odczynników Bis-Tris Dodaj system mPAGE® Lux Casting do swojego laboratorium i uzyskaj gotowe do użycia żele do Western blot i elektroforezy w mniej niż 3 minuty. Odetchnij i przyzwyczaj się do szybkiego procesu odlewania żeli, który generuje mniej odpadów i nie wymaga obaw o niepowodzenie. To nowość. Skorzystaj z naszych zestawów mPAGE® Lux Casting System zawierających stację utwardzającą mPAGE® Lux, probówkę mieszającą mPAGE® Lux, urządzenie do odlewania żeli mPAGE®, grzebień mPAGE® z 10 i 15 studzienkami, płytkę dystansową mPAGE® Mini oraz płytki mPAGE® Lux Masked Short z 10 i 15 studzienkami. Opisy i konfiguracje zestawów do odlewania znajdują się poniżej: Opis zestawuPozycje/ilościNumer części w zestawieNr produktu zestawu System odlewania mPAGE® Lux, 1 mm\*Stacja utwardzająca mPAGE® Lux (1) Rurka mieszająca mPAGE® Lux (5) Formy do żelu mPAGE® (2) Grzebień mPAGE® 1,0 mm, 10 studzienek (5) mPAGE® Comb 1,0 mm, 15 studzienek (5) mPAGE® Spacer plate 1,0 mm (5) mPAGE® Mini Short Plates (10) mPAGE® Lux Clip-on Mask 10 studzienek (2) mPAGE® Lux Clip-on Mask 15 studzienek (2)LUXGCS LUXMIXTB GCR2 C1M10W C1M15W MSPA10 MSHRT LUXCLP10W [LUXCLP15W](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/product/mm/luxclp)[LUXCSYS-1M](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/product/mm/luxcsys)   System odlewania mPAGE® Lux, 0,75 mm\*mPAGE® Lux Curing Station (1) mPAGE® Lux Mixing Tube (5) mPAGE® Gel Caster (2) mPAGE® Comb 0,75 mm, 10 studzienek (5) mPAGE® Grzebień, 0,75 mm, 15 studzienek (5) mPAGE® Płytka dystansowa 0,75 mm (5) mPAGE® Mini płytki krótkie (10) mPAGE® Lux Clip-on Mask 10 studzienek (2) mPAGE® Lux Clip-on Mask 15 studzienek (2)[LUXGCS LUXMIXTB GCR2 C75M10W C75M15W MSPA75 MSHRT LUXCLP10W](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/product/mm/luxclp) [LUXCLP15W](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/product/mm/luxclp)[LUXCSYS-75M](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/product/mm/luxcsys) System odlewania mPAGE® Lux, 1,5 mm\*mPAGE® Lux Stacja utwardzająca (1) mPAGE® Lux Probówka mieszająca (5) mPAGE® Caster (2) mPAGE® Grzebień, 1,5 mm 10 studzienek (5) mPAGE® Grzebień 1,5 mm, 15 studzienek (5) mPAGE® Płytka dystansowa 1,5 mm (5) mPAGE® mPAGE® Mini Short Plates (10) mPAGE® Lux Clip-on Mask 10 studzienek (2) mPAGE® Lux Clip-on Mask 15 studzienek (2) [LUXGCS LUXMIXTB GCR2 C15M10W C15M15W MSPA15 MSHRT LUXCLP10W](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/product/mm/luxclp) [LUXCLP15W](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/product/mm/luxclp)[LUXCSYS-15M](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/product/mm/luxcsys) \*Dostępne z wtyczką NEMA 5-15P (YP12), CEE 7/7 (YP22), typu G (YP61), YP18 lub typu I (YP03).  __Rysunek 7.__Stacja utwardzająca mPAGE® Lux. Zestaw odczynników mPAGE® Lux Bis-Tris to specjalny zestaw odczynników do systemu mPAGE® Lux Casting System. Zestaw odczynników mPAGE® Lux Bis-Tris składa się z 3 elementów: roztworu rozdzielającego, rozcieńczalnika i roztworu do układania. Zestaw obsługuje różne żele akrylamidowe o stężeniu od 8,0 do 13,5%. Opis i konfiguracja zestawu odczynników mPAGE® Lux są następujące: Opis zestawuPozycje/ilościNumer części w zestawieNumer produktu zestawu Zestaw odczynników mPAGE® Lux Bis-TrisRoztwór rozdzielający mPAGE® Lux Bis-Tris (1) Roztwór układający mPAGE® Lux Bis-Tris (1) Rozcieńczalnik mPAGE® Lux Bis-Tris (1)LUXRGTRES LUXRGTSTK [LUXRGTDIL](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/product/mm/luxrgtdil)[LUXRGTKIT](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/product/mm/luxrgtkit) ## [](https://www.sigmaaldrich.com)mPAGE® Lux SDS-PAGE Gel Cast Protocol Wszystkie roztwory należy chronić przed światłem słonecznym, aby zapobiec polimeryzacji. Przed odlewaniem żeli należy doprowadzić wszystkie roztwory do temperatury pokojowej. ### Żel rozdzielający 1. Rozwiązanie do żelu rozdzielającego przygotowuje się poprzez zmieszanie roztworu rozdzielającego i rozcieńczalnika. Proporcje mieszanki podano w tabeli poniżej. Roztwór do żelu rozdzielającego można przygotować w dużej partii, aby wykonać kilka żeli kolejno. 2. Za pomocą czystej pipety dodaj roztwór rozdzielający do czarnej probówki mieszającej lub innego nieprzezroczystego pojemnika. 3. Za pomocą czystej pipety dodaj rozcieńczalnik do tej samej probówki mieszającej. 4. Wymieszać, delikatnie obracając pojemnik. Nie mieszać w wirówce. ### Objętości roztworu żelu rozdzielającego Aby przygotować pojedynczy żel o grubości 1,0 mm, należy użyć poniższych objętości. Objętości roztworu dla żeli o grubości 0,75 mm i 1,5 mm można znaleźć w pełnej instrukcji obsługi dostępnej na [stronie](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/product/mm/luxrgtkit) [produktu.](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/product/mm/luxrgtkit) | | | | | | | |--------------|-----------------------|----|----------------|---|--------------------| | Procent żelu | Roztwór rozdzielający | | Rozcieńczalnik | | Całkowita objętość | | 8 | 2 ml | \+ | 3 ml | = | 5 ml | | 10 | 2,5 ml | \+ | 2,5 ml | = | 5 ml | | 12 | 3 ml | \+ | 2 ml | = | 5 ml | | 13,5% | 3,3 ml | \+ | 1,7 ml | = | 5 ml | ### Żel do układania w stosy Roztwór do układania w stosy jest gotowy do użycia bezpośrednio z butelki. Do żelu o grubości 1,0 mm należy użyć 1,5 ml roztworu do układania w stosy. Ważne: Nie rozcieńczać roztworu do układania w stosy. ### Odlewanie żelu 01. Oczyść szklane płytki łagodnym detergentem i spłucz wodą dejonizowaną. Przed użyciem przetrzyj 70% etanolem. 02. Złóż urządzenie do odlewania żelu mPAGE® Gel Caster, używając płytki dystansowej mPAGE® Spacer Plate i płytki mPAGE® Lux Masked Short Plate, aby utworzyć szklaną kasetę. Płytka maskowana powinna być ustawiona tak, aby tekst znajdował się po lewej stronie kasety. Przed zamknięciem zacisków urządzenia do odlewania upewnij się, że obie szklane płytki są wyrównane w dolnej części ramy urządzenia. Uwaga: Płytka mPAGE® Lux Masked Short Plate musi być używana z urządzeniem mPAGE® Curing Station. 03. Włącz stację utwardzającą mPAGE® Lux, naciskając przycisk zasilania. Stacja utwardzająca rozpocznie autotest. Po zakończeniu autotestu pojawi się ekran gotowości. 04. Otwórz drzwiczki i umieść urządzenie do odlewania żelu w stacji utwardzającej, wyrównując je za zderzakami. 05. Za pomocą czystej pipety o pojemności 5 ml dodaj przygotowany roztwór żelu rozdzielającego do wskazanej linii napełniania na ramie urządzenia do odlewania żelu mPAGE®. 06. Za pomocą czystej pipety o pojemności 5 ml powoli dodaj roztwór do układania warstw do górnej krawędzi krótkiej płytki. 07. Powoli włóż grzebień mPAGE® pod kątem, aby zapobiec tworzeniu się pęcherzyków powietrza pod zębami. Ważne: Mieszanie różnych formatów studzienek może spowodować nieprawidłowe uformowanie studzienek. Użyj: - grzebienie 10-dołkowe z płytkami mPAGE® Lux Masked Short Plates 10-dołkowymi - Grzebienie 15-dołkowe z płytkami mPAGE® Lux Masked Short Plates 15-dołkowymi 08. Wytrzyj rozlane roztwory z przedniej części krótkiej płytki, aby zapobiec niepełnemu utwardzeniu w miejscach rozlania. 09. Załóż maskę Clip-on Mask na płytkę krótką i ramę odlewniczą. - Przednia część maski powinna ściśle przylegać do krótkiej płytki, całkowicie zakrywając zęby grzebienia. 10. Zamknij drzwiczki stacji utwardzającej i wybierz grubość żelu. 11. Naciśnij przycisk Start, aby rozpocząć utwardzanie żelu. Wskazówka: Jeśli odlewasz wiele żeli, rozpocznij proces odlewania żelu za pomocą drugiego urządzenia Gel Caster teraz, podczas gdy pierwszy żel się utwardza. 12. Po zakończeniu utwardzania otwórz drzwi i wyjmij urządzenie do odlewania żelu. Wyjmij kasetę z urządzenia do odlewania żelu, opuszczając zacisk napinający, aby zwolnić ramę urządzenia. Następnie otwórz boki ramy i wysuń kasetę od góry. 13. Żel należy zużyć natychmiast lub owinąć kasetę mokrym ręcznikiem papierowym i przechowywać w pozycji poziomej w torebce strunowej lub innym szczelnym pojemniku w temperaturze 2–8 °C przez maksymalnie 2 tygodnie. Nie należy pozostawiać kaset bez opakowania, ponieważ żel wyschnie. ## [](https://www.sigmaaldrich.com)Żele mPAGE® Lux Bis-Tris z buforami MOPS i MES Żele mPAGE® Lux Bis-Tris są przeznaczone wyłącznie do stosowania z buforami roboczymi MOPS lub MES. W zależności od zastosowanego buforu roboczego można uzyskać bardzo różne wzorce separacji. Bufor MOPS może być stosowany do precyzyjnego dostrojenia separacji białek dużych i średnich, natomiast bufor MES zapewnia optymalną separację białek mniejszych. Aby określić, który system buforów roboczych do żeli najlepiej nadaje się do zamierzonego zakresu separacji, należy zapoznać się z wykresami migracji (__rysunek 8__).  __Rysunek 8.__Wykresy migracji żeli mPAGE® Lux Bis-Tris z buforem roboczym MOPS SDS i buforem roboczym MES SDS (kDa). ### Jak usunąć żel po elektroforezie Usuń żel z kasety szklanej za pomocą skrobaczki do żelu. Przetnij wzdłuż krawędzi żelu (po prawej stronie), aby uniknąć jego rozerwania. Żele mPAGE® Lux Bis-Tris powinny być używane WYŁĄCZNIE z buforem MOPS-SDS lub MES-SDS. Żele Bis-Tris NIE są kompatybilne z buforem Tris-Glycine. ## [](https://www.sigmaaldrich.com)Zrównoważone odlewanie żelu za pomocą systemu odlewania żelu mPAGE® Lux Aby określić wpływ naszego systemu odlewania mPAGE® Lux na zrównoważony rozwój, przeprowadzono obliczenia w odniesieniu do stosowania reprezentatywnego zestawu do szybkiego odlewania ręcznego żeli poliakrylamidowych do elektroforezy białek. Oba systemy wymagają stosowania zestawów do odlewania wielokrotnego użytku i zestawów odczynników do odlewania ręcznego. System mPAGE® Lux Casting wymaga dodatkowo użycia stacji utwardzającej mPAGE® Lux Gel Curing Station, podczas gdy system bazowy wymaga użycia APS i TEMED, które są sprzedawane oddzielnie od zestawu odczynników do ręcznego odlewania. W niniejszej ocenie uwzględniono wszystkie elementy niezbędne do odlewania żeli do elektroforezy w minimalnym okresie eksploatacji stacji utwardzającej mPAGE® Lux, który wynosi 5 lat. Obejmuje to wpływ produkcji, pakowania, dystrybucji, użytkowania i utylizacji zestawu do ręcznego odlewania, niezbędnych odczynników i wszystkich wymaganych materiałów laboratoryjnych. Obliczenia przeprowadzono przy założeniu produkcji 250, 500 lub 1000 żeli rocznie i podano minimalną różnicę w stosunku do systemu bazowego. ### Cechy zrównoważonego rozwoju materiałów i produktów Chociaż system mPAGE® Lux Casting System stanowi innowacyjne rozwiązanie do ręcznego odlewania żeli poliakrylamidowych, nadal wymaga on użycia niektórych plastikowych materiałów eksploatacyjnych i niebezpiecznych odczynników. Chociaż nie ma odpowiedniego zamiennika akryloamidu w tym zastosowaniu, wszystkie pozostałe zagrożenia chemiczne zostały wyeliminowane z tego systemu, a ilość wymaganych plastikowych materiałów eksploatacyjnych została znacznie zmniejszona w porównaniu z systemem bazowym. Dodatkowa masa stacji utwardzania żelu wymagana przez system mPAGE® Lux Casting System jest kompensowana przez zmniejszenie ilości produktów wymaganych w procesie odlewania żelu, jak pokazano na wykresie. W całym okresie eksploatacji urządzenia całkowita masa systemu jest zmniejszona o co najmniej 20% w porównaniu z systemami szybkiego odlewania. __Masa systemu w całym okresie eksploatacji (kg) przy odlewaniu 500 żeli rocznie:__  __Rysunek 9.__Porównanie masy systemu w całym okresie użytkowania (kg) przy odlewaniu 500 żeli rocznie dla systemu mPAGE® Lux Casting i systemu produktu referencyjnego. Ciemnoniebieski = system produktu referencyjnego. Jasnoniebieski = system mPAGE® Lux Casting. Ponadto produkt ten jest zgodny z zasadami SMASH Packaging, naszej strategii, która ma na celu poprawę zrównoważonego rozwoju opakowań poprzez zmniejszenie ilości opakowań, stosowanie bardziej ekologicznych materiałów i ułatwienie recyklingu. - Opakowania produktów i dodatkowych elementów wymaganych do funkcjonowania urządzenia zostały zmniejszone o 30% w stosunku do systemu bazowego. - 100% opakowań systemowych na bazie włókien posiada certyfikat zrównoważonej gospodarki leśnej. - Wszystkie wkładki ochronne z pianki są wykonane w 100% z polietylenu pochodzącego z recyklingu. - Opakowania nie zawierają żadnych materiałów, które utrudniałyby recykling zgodnie z naszymi wytycznymi SMASH. ### System odlewania mPAGE® Lux Dystrybucja i użytkowanie produktu Zmniejszenie ilości wymaganych materiałów eksploatacyjnych i wyeliminowanie niektórych odczynników skutkuje znacznym zmniejszeniem wpływu związanego z transportem. Zmniejszenie masy regularnie wysyłanych komponentów i związanych z nimi opakowań wynosi co najmniej 24% w stosunku do minimalnego okresu użytkowania urządzenia. | | | | | |-----------------------------------|------------|----------------------|---| | Oszczędności masowe w ciągu 5 lat | | | | | Żele/rok | Odczynniki | Sprzęt laboratoryjny | | | 250 | 4,7 kg | 12,8 kg | | | 500 | 8,4 kg | 12,8 kg | | | 1000 | 16,1 kg | 22,1 kg | | Tabela 1.Całkowita oszczędność masy w ciągu 5 lat dla systemu mPAGE® Lux. Chociaż dodane urządzenie wymaga energii podczas pracy, stacja mPAGE® Lux Casting Station została zaprojektowana z myślą o energooszczędności. Dzięki zastosowaniu oświetlenia LED i prostego, ale intuicyjnego interfejsu użytkownika, całkowite zużycie energii pozostaje na niezwykle niskim poziomie. Łączne zużycie energii wymagane do utwardzenia 1000 żeli wynosi tylko 1,65 kWh, co odpowiada około 33 godzinom użytkowania laptopa. Ilość jednorazowych odpadów z tworzyw sztucznych powstających podczas procesu odlewania żeli jest zmniejszona o co najmniej 25%. Ponadto odczynniki mPAGE® Lux ulegają samopolimeryzacji pod wpływem światła otoczenia, eliminując niepolimeryzowane pozostałości akryloamidu w strumieniach odpadów. Dzięki odlewaniu świeżych, gotowych do użycia żeli w miarę potrzeb eliminuje się ryzyko przygotowania żeli, które nie zostaną wykorzystane. System mPAGE® Lux eliminuje potrzebę magazynowania zestawów odczynników lub wstępnie odlewanych żeli o różnych stężeniach, co zmniejsza ilość odpadów powstających w wyniku wygaśnięcia terminu ważności składników. Stacja utwardzająca mPAGE® Lux jest urządzeniem elektronicznym i jako taka musi być utylizowana zgodnie z obowiązującymi przepisami. Więcej informacji na temat utylizacji odpadów elektronicznych można znaleźć na naszej [stronie poświęconej zgodności z dyrektywą WEEE](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/life-science/weee-compliance). Produkt ten wykazał znaczną poprawę w stosunku do systemu bazowego w całym cyklu życia produktu i został uznany za bardziej ekologiczny produkt alternatywny. Więcej informacji można [znaleźć](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/life-science/ssbi/greener-products-solutions) na [naszej stronie](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/life-science/ssbi/greener-products-solutions) poświęconej projektowaniu z myślą o zrównoważonym rozwoju oraz bardziej ekologicznym produktom alternatywnym. ## [](https://www.sigmaaldrich.com)Szybka wizualizacja wykrywania białek w żelu bez barwienia przy użyciu systemu mPAGE® Lux SDS-PAGE to powszechnie stosowana technika rozdzielania białek i innych biomolekuł według wielkości. Białka w żelu można wykrywać za pomocą sprawdzonych barwników kolorymetrycznych lub fluorescencyjnych, takich jak Coomassie Brilliant Blue (CBB), Silver Stain i SYPRO™ Ruby. Metody barwienia różnią się czułością i często wymagają kilku czasochłonnych etapów inkubacji. Trichloroetanol (TCE), opisany po raz pierwszy jako środek wygaszający fluorescencję, jest związkiem, który przesuwa fluorescencję tryptofanu z jego naturalnej emisji (~350 nm) w kierunku światła widzialnego (~512 nm) poprzez wytworzenie nowego fluoroforu po aktywacji światłem UV.1-3 Ta właściwość TCE i innych związków trichloro została wykorzystana przez Kazmin et. al. do opracowania szybkiego i czułego jednokrokowego rozwiązania do barwienia żelu.4 Później TCE został włączony bezpośrednio do żeli SDS-PAGE podczas przygotowywania żelu, co umożliwiło wykrywanie białek bez uciążliwych etapów barwienia.5,6 Opisujemy tutaj przygotowanie żeli mPAGE® Lux z TCE, aby umożliwić wykrywanie białek w żelu bez barwienia. ### Porównanie metod barwienia i bezbarwienia Przeprowadzono porównanie między metodą wizualizacji TCE a metodą barwienia żelu Coomassie. Czułość wykrywania była podobna w obu metodach (__ryc. 10__). Jednak wykrywanie oparte na TCE nie wymaga etapu barwienia, co pozwala zaoszczędzić co najmniej dwie do kilku godzin czasu przygotowania, w zależności od aktualnie stosowanej metody barwienia.  __Rysunek 10.__Wizualizacja białek za pomocą TCE w porównaniu z barwnikiem READYBLUE® Coomassie Gel Stain. Trzy oczyszczone białka (lizozym (14,4 kDa), BSA (66 kDa), fosforylaza b (97 kDa)) zostały naniesione w ilościach odpowiednio 4 µg, 1 µg, 0,25 µg, 0,0625 µg, 0,0156 µg, 0,004 µg, 0,0009 µg i 0 µg na 12% żel mPAGE® Lux przygotowany z 1% TCE. Żel poddano działaniu prądu o napięciu 200 V przez 42 minuty w buforze roboczym MOPS-SDS. (__A__) Wizualizacja białek po 45 sekundach aktywacji TCE. (__B__) Odpowiedni obraz żelu barwionego READYBLUE® Coomassie. Obserwuje się podobną czułość wykrywania białek między żelem barwionym TCE a żelem barwionym Coomassie. ### Zgodność metody Przeprowadzono również badanie zgodności tej metody z analizą końcową, w tym przypadku z metodą Western blotting. __Rysunek 11__ przedstawia porównanie wyników Western blot przygotowanego z użyciem TCE i bez użycia TCE. Podobną czułość wykrywania immunologicznego zaobserwowano, gdy żele Western blot aktywowano przez 45 sekund i poddano obrazowaniu przed transferem, jak pokazano tutaj. Jednak ze względu na charakter polimeryzacji żelu mPAGE® Lux dłuższe czasy aktywacji i ekspozycji mogą wpływać na wydajność transferu białek. Konieczne może być zoptymalizowanie transferu białek. Jeśli po wizualizacji TCE zostanie przeprowadzony Western blotting, zaleca się stosowanie jak najkrótszego czasu aktywacji, ponieważ aktywacja może wpływać na wydajność transferu żeli mPAGE® Lux.  __Rysunek 11.__Western Blot po wizualizacji TCE. Seria rozcieńczeń 2x lizatu komórek A431 stymulowanych EGF (10 ng – 0,3 ng) została umieszczona w 8% żelu mPAGE® Lux przygotowanym (__B__) z 1% TCE lub (__A__) bez 1% TCE. Żel poddano działaniu prądu o napięciu 200 V przez 38 minut w buforze MOPS-SDS, a następnie żel zawierający TCE aktywowano przez 45 sekund i wykonano zdjęcie. Oba żele przeniesiono następnie na membranę Immobilon® P PVDF. Membrany zbadano pod kątem obecności EFGR, MAPK 1/2 i histonu H3 przy użyciu standardowych metod immunodetekcji. ### Technologia Stain-Less z aktywacją TCE Ponieważ ta metoda aktywacji TCE nie wymaga dodatkowego etapu barwienia, pozwala zaoszczędzić czas i może być przeprowadzona bezpośrednio po elektroforezie. Wyniki pokazują również, że czułość wykrywania białek jest podobna do innych konwencjonalnych metod wykorzystujących barwienie. Ogólnie rzecz biorąc, dzięki żelom mPAGE® Lux i innym produktom do elektroforezy mPAGE® można szybko i w sposób powtarzalny przygotowywać i przeprowadzać elektroforezę. Ponadto żele mPAGE® Lux są kompatybilne z opisaną tutaj technologią bezbarwną wykorzystującą TCE, co dodatkowo redukuje liczbę etapów w aktualnych protokołach. Dzięki temu naukowcy zyskują cenne narzędzie, które nadal pozwala im polegać na łatwości i elastyczności technologii odlewania mPAGE® Lux, a jednocześnie zapewnia dodatkową korzyść w postaci szybkiej wizualizacji białek. [Poproś o informacje](https://www.sigmaaldrich.com/US/en/technical-documents/technical-article/protein-biology/gel-electrophoresis/mpage-lux-gel-casting-system) ## [](https://www.sigmaaldrich.com)Zamów system do odlewania mPAGE® Lux i powiązane odczynniki ## System odlewania mPAGE® Lux Przepraszamy, wystąpił nieoczekiwany błąd Response not successful: Received status code 500 ## Akcesoria i odczynniki mPAGE® Lux Przepraszamy, wystąpił nieoczekiwany błąd Response not successful: Received status code 500 ### Referencje 1\. Eftink MR, Zajicek JL, Ghiron CA. 1977. A Hydrophobic Quencher of Protein Fluorescence: 2,2,2-Trichloroethanol. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Protein Structure. 491(2):473-481. [https://doi.org/10.1016/0005-2795(77)90290-2](https://doi.org/10.1016/0005-2795%2877%2990290-2) 2\. Edwards RA, Jickling G, Turner RJ. The Light-induced Reactions of Tryptophan with Halocompounds¶. 75(4):362-368. [https://doi.org/10.1562/0031-8655(2002)0750362tlirot2.0.co2](https://doi.org/10.1562/0031-8655%282002%290750362tlirot2.0.co2) 3\. Pichlo C, Toelzer C, Chojnacki K, Öcal S, Uthoff M, Ruegenberg S, Hermanns T, Schacherl M, Denzel MS, Hofmann K, et al. 2018. Improved protein-crystal identification by using 2,2,2-trichloroethanol as a fluorescence enhancer. Acta Crystallogr F Struct Biol Commun. 74(5):307-314. [https://doi.org/10.1107/s2053230x18005253](https://doi.org/10.1107/s2053230x18005253) 4\. Kazmin D, Edwards RA, Turner RJ, Larson E, Starkey J. 2002. Visualization of Proteins in Acrylamide Gels Using Ultraviolet Illumination. Analytical Biochemistry. 301(1):91-96. [https://doi.org/10.1006/abio.2001.5488](https://doi.org/10.1006/abio.2001.5488) 5\. Ladner CL, Yang J, Turner RJ, Edwards RA. 2004. Visible fluorescent detection of proteins in polyacrylamide gels without staining. Analytical Biochemistry. 326(1):13-20. [https://doi.org/10.1016/j.ab.2003.10.047](https://doi.org/10.1016/j.ab.2003.10.047) 6\. Ladner-Keay CL, Turner RJ, Edwards RA. 2018. Fluorescent Protein Visualization Immediately After Gel Electrophoresis Using an In-Gel Trichloroethanol Photoreaction with Tryptophan.179-190. [https://doi.org/10.1007/978-1-4939-8745-0\_22](https://doi.org/10.1007/978-1-4939-8745-0_22) __Powiązane artykuły__ - [Standardowy protokół PCR](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/technical-documents/protocol/genomics/pcr/standard-pcr) - [Protokół Western Blot - Immunoblotting lub Western Blot](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/technical-documents/protocol/protein-biology/western-blotting/western-blotting) - [Wprowadzenie do SDS-PAGE - separacja białek na podstawie ich wielkości](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/technical-documents/protocol/protein-biology/gel-electrophoresis/sds-page) - [Gel Electrophoresis with mPAGE® Gels](https://www.sigmaaldrich.com/PL/en/technical-documents/technical-article/protein-biology/western-blotting/mpagegels) - [How to Run an mPAGE™ Protein Gel Using a Bio-Rad Electrophoresis System](https://www.sigmaaldrich.com/PL/en/technical-documents/protocol/protein-biology/gel-electrophoresis/running-protein-gel-biorad) - [How to Run an mPAGE™ Protein Gel Using an Invitrogen XCell Surelock® Mini-Cell Electrophoresis System](https://www.sigmaaldrich.com/PL/en/technical-documents/protocol/protein-biology/gel-electrophoresis/running-protein-gel-invitrogen) - [Urządzenie do elektroforezy żelowej Auto2D®](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/technical-documents/technical-article/protein-biology/gel-electrophoresis/automated-2d-gel-electrophoresis-device) - [Wprowadzenie do wykrywania białek metodą Western Blot](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/technical-documents/technical-article/protein-biology/western-blotting/western-blotting) __Powiązane kategorie produktów__ - [Żele i bufory do elektroforezy białek](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/products/protein-biology/protein-electrophoresis-and-western-blotting/protein-electrophoresis-gels-and-buffers) - [Barwniki do elektroforezy białek w żelu](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/products/protein-biology/protein-electrophoresis-and-western-blotting/protein-electrophoresis-gel-stains) - [Sprzęt do elektroforezy i transferu białek w żelu](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/products/protein-biology/protein-electrophoresis-and-western-blotting/electrophoresis-and-transfer-equipment) - [Bufory transferowe i odczynniki](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/products/protein-biology/protein-electrophoresis-and-western-blotting/transfer-buffers-and-reagents) - [Markery białkowe](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/products/protein-biology/protein-electrophoresis-and-western-blotting/protein-markers) - [Odczynniki do frakcjonowania subkomórkowego, wzbogacania i usuwania komórek](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/products/protein-biology/protein-sample-prep/subcellular-fractionation-reagents) - [Detergenty - anionowe, kationowe, zwitterionowe, przeciwpieniące](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/products/chemistry-and-biochemicals/biochemicals/detergents) - [Oczyszczanie białek rekombinowanych/znaczników fuzyjnych](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/products/protein-biology/protein-sample-prep/recombinant-fusion-tag-protein-purification) Góra __Zaloguj się, aby kontynuować__ Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować. Zaloguj się__Nie masz konta użytkownika?__Zarejestruj Dla wygody naszych klientów ta strona została przetłumaczona maszynowo. Dołożyliśmy starań, aby zapewnić dokładne tłumaczenie maszynowe. Tłumaczenie maszynowe nie jest jednak doskonałe. Jeśli tłumaczenie maszynowe nie spełnia Twoich oczekiwań, przejdź do wersji w języku angielskim. An unknown error has occured.