When Sigma-Aldrich tests the activity of RNase A, a stock solution is prepared in water at 1 mg/mL. The stock solution of RNase A is also suggested can be prepared in 10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 15 mM NaCl at a concentration of 10 mg/mL. The working concentration is suggested to be at 10 ug/ml.
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R6513
Ribonuklease A aus Rinderpankreas
Molecular Biology, ≥70 Kunitz units/mg protein, lyophilized
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Synonym(e):
Pankreatische Ribonuklease, RNAsea, RNase A, Ribonuclease I
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10 mg | Warenkorb auf Verfügbarkeit prüfen | € 94,40 |
50 mg | Warenkorb auf Verfügbarkeit prüfen | € 326,00 |
500 mg | Warenkorb auf Verfügbarkeit prüfen | € 981,00 |
250 mg | Warenkorb auf Verfügbarkeit prüfen | € 1.310,00 |
1 g | Warenkorb auf Verfügbarkeit prüfen | € 1.680,00 |
Über diesen Artikel
CAS-Nummer:
NACRES:
NA.53
UNSPSC Code:
12352204
EC Number:
232-646-6
MDL number:
EG-Nummer:
Specific activity:
≥70 Kunitz units/mg protein
Technischer Dienst
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Unterstützung erhaltengrade
Molecular Biology
Quality Segment
form
lyophilized
specific activity
≥70 Kunitz units/mg protein
mol wt
13.7 kDa, ~13,700
foreign activity
Exonuclease and endonuclease, none detected, NICKase and DNase, none detected
storage temp.
−20°C
SMILES string
[nH]1cnc(c1)CC(NC(=O)CCN)C(=O)O
InChI
1S/C9H14N4O3/c10-2-1-8(14)13-7(9(15)16)3-6-4-11-5-12-6/h4-5,7H,1-3,10H2,(H,11,12)(H,13,14)(H,15,16)
InChI key
CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N
General description
RNase A ist eine Endoribonuklease, die am 3′-OH-Phosphat eines Pyrimidin-Nukleotids angreift. Die Sequenz pG-pG-pC-pA-pG wird gespalten und ergibt pG-pG-pCp und A-pG. Das Enzym hat bei einzelsträngiger RNA die höchste Aktivität.
RNase A, Ribonuklease A, ist eine Endoribonuklease, die Phosphodiester-Bindungen an RNA-Einzelsträngen nach Pyrimidin-Nukleotiden spaltet. Sie greift am 3′-Phosphatende an (z. B. wird die Sequenz pG-pG-pC-pA-pG gespalten und ergibt pG-pG-pCp und A-pG). Das Enzym hat bei einzelsträngiger RNA die höchste Aktivität. RNase A ist ein einkettiges Polypeptid mit 4 Disulfidbrücken. Im Gegensatz zur RNase B ist sie kein Glycoprotein. Ribonukleasen hydrolysieren die DNA nicht, da die DNA keine 2′-OH-Gruppen enthält, die für die Bildung zyklischer Zwischenprodukte von höchster Bedeutung sind. RNase A kann auch RNA aus Proteinproben hydrolysieren. RNase A kann durch Alkylierung des His12 und His119 gehemmt und durch Kalium- und Natriumsalze aktiviert werden. RNAse wird durch vorhandene Schwermetallionen gehemmt. RNase wird außerdem kompetitiv durch DNA gehemmt.
RNase A ist ein einkettiges Polypeptid mit 124 Aminosäuren, die durch vier Disulfidbrücken verbunden sind. Im Gegensatz zur RNase B ist RNase A kein Glycoprotein. RNase A kann durch Alkylierung von His12 bzw. His119, die sich an der aktiven Stelle des Enzyms befinden, gehemmt werden. Aktivatoren von RNase A sind Kalium- und Natriumsalze.
Application
- RNase A wird zur Entfernung von RNA aus DNA-Plasmidpräparationen, aus Präparationen von genomischer DNA und aus Proteinproben verwendet.
- RNase A wird ferner in der RNA-Sequenzanalyse und in Schutzassays eingesetzt.
- RNase A wurde als Hilfsmittel für das computerunterstützte Wirkstoffdesign verwendet.
- RNase A unterstützt die Analyse von RNA-Sequenzen.
- RNase A hydrolysiert in Proteinproben enthaltene RNA.
- Die Aufreinigung von DNA wird durch Rnase A unterstützt.
Ribonuclease A aus Rinderpankreas wird verwendet:
- bei der Reinigung von Plasmid-DNA
- zum Verdauen und Vermeiden der Färbung doppelsträngiger RNA beim Färben von Kernen
- zum Immunperoxidase- und Immunfluoreszenznachweis
- zur Behandlung von Zellen vor der Durchflusszytometrie
- als Bestandteil des Post-Hybridisierungspuffers zum Waschen von FFPE-Gewebeschnitten nach der In-situ-Hybridisierung
- zur Behandlung von Zellen während der Präparation von Extrakten äußerer Membranproteine
- RNase-Schutzassay
- Entfernung unspezifisch gebundener RNA
- Analyse der RNA-Sequenzen
- Hydrolyse von RNA in Proteinproben
Features and Benefits
Unsere stabile Ribonuklease A, RNase A eignet sich für die Entfernung von RNA, die RNA-Sequenzierung und die Aufreinigunn von DNA.
Analysis Note
Proteinbestimmung nach E.
Other Notes
Aktivatoren von RNase A sind Kalium- und Natriumsalze. RNase A kann durch Alkylierung von His12 oder His119 gehemmt werden.
Eine wichtige Anwendung von RNase A ist die Entfernung von RNA aus Plasmid-DNA-Präparationen. Für diese Anwendung wird DNase-freie RNase A bei einer Endkonzentration von 10 μg/ml verwendet.
Das Kochen von Stammlösungen dieses RNase A-Produkts zur Inaktivierung von DNase-Resten ist nicht erforderlich und kann zur Ausfällung von RNase und möglicherweise einem Verlust der Enzymaktivität führen. Wenn eine RNase A-Lösung bei neutralem pH-Wert erhitzt wird, findet eine Ausfällung statt. Bei Erhitzung bei einem niedrigeren pH-Wert findet aufgrund vorhandener Proteinverunreinigungen eine gewisse Ausfällung statt.
Das Kochen von Stammlösungen dieses RNase A-Produkts zur Inaktivierung von DNase-Resten ist nicht erforderlich und kann zur Ausfällung von RNase und möglicherweise einem Verlust der Enzymaktivität führen. Wenn eine RNase A-Lösung bei neutralem pH-Wert erhitzt wird, findet eine Ausfällung statt. Bei Erhitzung bei einem niedrigeren pH-Wert findet aufgrund vorhandener Proteinverunreinigungen eine gewisse Ausfällung statt.
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|---|---|---|---|
| description Molecular Biology, ≥70 Kunitz units/mg protein, lyophilized | description (Solution of 50% glycerol, 10mM Tris-HCL pH 8.0) | description Type I-A, powder, ≥60% RNase A basis (SDS-PAGE), ≥50 Kunitz units/mg protein | description Type III-A, ≥85% RNase A basis (SDS-PAGE), 85-140 Kunitz units/mg protein |
| grade Molecular Biology | grade Molecular Biology | grade - | grade - |
| specific activity ≥70 Kunitz units/mg protein | specific activity - | specific activity ≥50 Kunitz units/mg protein | specific activity 85-140 Kunitz units/mg protein |
| form lyophilized | form (Solution of 50% glycerol, 10mM Tris-HCL pH 8.0) | form powder | form lyophilized powder |
| storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. −20°C |
| mol wt 13.7 kDa, ~13,700 | mol wt 13.7 kDa, ~13,700 | mol wt ~13,700 | mol wt ~13,700 |
| foreign activity Exonuclease and endonuclease, none detected, NICKase and DNase, none detected | foreign activity Endonuclease and exonuclease, none detected, NICKase and DNase, none detected | foreign activity protease, essentially free | foreign activity protease, essentially free |
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Signalwort
Danger
Gefahrencodes
Sicherheitshinweise
Hazard Classifications
Resp. Sens. 1
Lagerklasse
11 - Combustible Solids
Was ist los?
WGK 3
Flammpunkt (°F)
Not applicable
Flammpunkt (°C)
Not applicable
PSA (Persönliche Schutzausrüstung)
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
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What solution should be used to dissolve RNase A? I see many options from UHP water, 0.15M NaCl, 0.01M Tris HCl, to Sodium Acetate solution. Which is preferred?
1 answer-
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What working concentration of Product R6513, Ribonuclease A from bovine pancreas (RNase A), do you suggest?
1 answer-
We suggest using RNase A at a concentration of 10 ug/ml.
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Do I need to boil Product R6513, Ribonuclease A from bovine pancreas (RNase A), to inactivate residual DNases?
1 answer-
Boiling of stock solutions to inactivate residual DNase is not necessary and may cause precipitation of RNase with loss of enzymatic activity.
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What is the Department of Transportation shipping information for this product?
1 answer-
Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.
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How are solutions of Product R6513, Ribonuclease A from bovine pancreas (RNase A), stored?
1 answer-
RNase A solutions can be stored, aliquoted and frozen at -20 °C.
Helpful?
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Why is RNase A activity not listed as micromoles per minute, and what is a Kunitz unit?
1 answer-
The Kunitz unit was created to reflect the non-linear nature of the RNAse enzymatic reaction. As the reaction progresses the activity changes due to RNA as a heterogeneous polymeric substrate; therefore, the unit of moles or micomoles per minute becomes inaccurate. As such, our enzymatic assay describes a unit that varies throughout the reaction: One unit will cause a decrease of 100% per minute in the value of E0 - Ef at pH 5.0 at 25°C. Ef is determined in the RNAse control step, while E0 reflects the current reaction rate.
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What is the shelf life of Product R6513, Ribonuclease A from bovine pancreas (RNase A)?
1 answer-
This product is stable for at least 3 years when stored properly at -20 °C.
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What is the solubility of Product R6513, Ribonuclease A from bovine pancreas (RNase A)?
1 answer-
Stock solutions of RNase A can be made in 10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 15 mM NaCl at a concentration of 10 mg/mL.
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