OGS3

PSF-CMV-DELTA-D78NCOI - PLAZMID Z USUNIĘTYM KODONEM STARTOWYM (NCOI)

plasmid vector for molecular cloning

• Synonim(y): szybki wektor
• NACRES: NA.85
• UNSPSC Code: 12352200
• Promoter: Promoter name: CMV; Promoter activity: constitutive; Promoter type: mammalian
• Origin of replication: pUC (500 copies)
• Bacteria selection: ampicillin
• Reporter gene: none
• Peptide cleavage: no cleavage

Właściwości

• form: buffered aqueous solution
• mol wt: size 4304 bp
• bacteria selection: ampicillin
• origin of replication: pUC (500 copies)
• peptide cleavage: no cleavage
• promoter: Promoter name: CMV; Promoter activity: constitutive; Promoter type: mammalian
• reporter gene: none
• shipped in: ambient
• storage temp.: −20°C

Opis

General description

Plazmid ten zapewnia wysoki poziom ekspresji białka z promotora CMV w komórkach ssaków, ale nie zawiera kodonu startowego w MCS, w przeciwieństwie do większości naszych innych plazmidów. Pozwala to na wstawienie genów do dalszych miejsc restrykcji i użycie własnego kodonu startowego genów, jeśli jest to wymagane, zapobiegając w ten sposób przedwczesnej inicjacji translacji w kodonie startowym, który znajdował się w miejscu NcoI.

Poziom ekspresji promotora: Ten plazmid zawiera promotor CMV ssaków do napędzania ekspresji genów. Przetestowaliśmy wszystkie nasze promotory ssaków w różnych typach komórek i CMV jest konsekwentnie najsilniejszy w tych, które badaliśmy. Istnieje jednak wiele doniesień o promotorze CMV wykazującym wyciszenie przez metylację w hodowli długoterminowej.

Application

Klonowanie genu: Plazmid ten został zaprojektowany tak, aby był kompatybilny z wieloma technikami klonowania. Miejsce wielokrotnego klonowania zawiera szereg standardowych, powszechnie stosowanych miejsc restrykcyjnych do klonowania. Korzystając z tych miejsc, geny mogą być wstawiane przy użyciu standardowych metod klonowania z ligazą DNA. Można również stosować inne metody, takie jak klonowanie niezależne od ligazy (LIC) Gibson Assembly InFusionHD lub Seamless GeneArt, a ponieważ wszystkie nasze plazmidy są oparte na tym samym szkielecie, ta sama metoda może być stosowana do klonowania we wszystkich naszych wektorach katalogowych.

Uwagi dotyczące miejsca wielokrotnego klonowania: To miejsce wielokrotnego klonowania zostało zmodyfikowane w celu usunięcia kodonu startowego w miejscu restrykcyjnym NcoI. Osiągnięto to poprzez rozszczepienie pSF-CMV-Amp za pomocą KpnI, a następnie ponowną cyrkulację. Usunięcie tego miejsca usuwa również wbudowane miejsce Shine-Dalgarno i Kozak z MCS, co będzie wymagało dodania do każdego klonowanego genu, aby zapewnić wydajną ekspresję.

W miejscu wielokrotnego klonowania znajduje się kilka ważnych miejsc w MCS. Obejmują one miejsce XbaI oraz miejsca BsgI i BseRI. Miejsce XbaI zawiera kodon stop. Ten kodon stop jest umieszczony w określonej pozycji w stosunku do miejsc BsgI i BseRI, które znajdują się bezpośrednio za nim. Kiedy BseRI lub BsgI rozszczepiają plazmid, wytwarzają nawis TA z kodonu stop w miejscu XbaI, który jest kompatybilny ze wszystkimi naszymi plazmidami peptydowymi ciętymi w tych samych miejscach. Miejsca BseRI i BsgI są niepalindromowe i rozszczepiają określoną liczbę zasad z dala od miejsca wiązania.

Analysis Note

Aby wyświetlić certyfikat analizy dla tego produktu, należy odwiedzić stronę www.oxgene.com .

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable