[ข้ามไปยังเนื้อหา](https://www.sigmaaldrich.com#main-content) [![Merck](https://www.sigmaaldrich.com/static/logos/purple/merck.svg)](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th) สินค้า รถเข็น0 THTH สินค้า [เข้าสู่ระบบ / ลงทะเบียน](https://www.sigmaaldrich.com/oidc-sign-in) [ค้นหาคำสั่งซื้อ](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/order-lookup) [สั่งซื้อด่วน](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/quick-order) รถเข็น0 [หน้าแรก](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th)[การใช้งาน](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/applications)[จีโนมิก](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/applications/genomics)การประยุกต์ใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์ # การประยุกต์ใช้งานปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์ (PCR) ![ขั้นตอน RT-PCR จากการแยก RNA ไปจนถึงการขยาย - Reverse Transcriptase (RT) PCR ทำตามขั้นตอนต่อไปนี้: การแยก RNA หรือ mRNA การหลอมรองพื้นการสังเคราะห์เกลียวครั้งแรกและการขยาย PCR](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/categories/molecular-biology/loading-pcr-tubes-into-thermocycler.jpg "Sample tubes being loaded into a PCR thermocycler") ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR) เป็นเทคนิคชีววิทยาโมเลกุลหลักที่มีประสิทธิภาพซึ่งเป็น วิธีการที่มีประสิทธิภาพและรวดเร็วในหลอดทดลองสำหรับการขยายตัวของเอนไซม์ของลำดับ DNA หรือ RNA เฉพาะจากแหล่งต่างๆ PCR มาตรฐานประกอบด้วยดีเอ็นเอเป้าหมายซึ่งเป็นชุดของไพรเมอร์ oligonucleotide สังเคราะห์ที่หมุนลำดับดีเอ็นเอเป้าหมายโพลิเมอร์ DNA ที่มีความเสถียรต่ออุณหภูมิ (โดยปกติจะเป็นโพลิเมอร์ Taq) และนิวคลีโอไทด์ การใช้วงจรความร้อนมีสามขั้นตอนในระหว่างวงจรการขยายแต่ละครั้งรวมถึงการลดความอิ่มตัวของดีเอ็นเอแบบดับเบิลเกลียว (DSDNA) เป็นดีเอ็นเอเดี่ยวที่แยกออกจากกันการหลอมไพรเมอร์เข้ากับลำดับดีเอ็นเอเป้าหมายและการขยายตัวที่ดีเอ็นเอพอลิเมอเรสขยายดีเอ็นเอจากไพรเมอร์สร้าง dsDNA ใหม่ด้วยเส้นใยเก่าหนึ่งเส้นและเส้นใยใหม่หนึ่งเส้น เกลียวที่สังเคราะห์ขึ้นในหนึ่งรอบทำหน้าที่เป็นเทมเพลตในครั้งต่อไปส่งผลให้ปริมาณดีเอ็นเอเพิ่มขึ้นเป็นล้านเท่าในเวลาเพียง 20 รอบ * * * ## สินค้าที่เกี่ยวข้อง Slide 1 of 9 1 of 2 [![Protector RNase Inhibitor](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/174/556/8d1e424e-34d7-4109-84b7-0625c65de418/640/8d1e424e-34d7-4109-84b7-0625c65de418.jpg) \ Roche \ RNAINH-RO \ Protector RNase Inhibitor](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/roche/rnainhro) มุมมองด่วน [![DNase I Amplification Grade](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/768/254/b28f4124-c405-4238-bb00-17fba23ca875/640/b28f4124-c405-4238-bb00-17fba23ca875.jpg) \ Sigma-Aldrich \ AMPD1 \ DNase I](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/sigma/ampd1) มุมมองด่วน [![ReadyScript® cDNA Synthesis Mix Complete reagent for first strand cDNA synthesis for RT-qPCR](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/397/823/83f0837b-ea06-4a95-adab-4f2013b7d91b/640/83f0837b-ea06-4a95-adab-4f2013b7d91b.jpg) \ Sigma-Aldrich \ RDRT \ ReadyScript® cDNA Synthesis Mix](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/sigma/rdrt) มุมมองด่วน [![Enhanced Avian First Strand Synthesis Kit Components for cDNA synthesis with enhanced AMV reverse transcriptase](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/231/800/d7f37703-8d0d-4f13-94ca-092c9300bac3/640/d7f37703-8d0d-4f13-94ca-092c9300bac3.jpg) \ Sigma-Aldrich \ STR1 \ Enhanced Avian First Strand Synthesis Kit](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/sigma/str1) มุมมองด่วน [![FastStart Universal Probe Master (Rox) sufficient for 250 reactions, sufficient for 1250 reactions, sufficient for 5000 reactions, suitable for qPCR, suitable for RT-qPCR](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/221/624/11a7cd9a-b594-452c-8c3d-7b0bceb92b53/640/11a7cd9a-b594-452c-8c3d-7b0bceb92b53.jpg) \ Roche \ FSUPMMRO \ FastStart Universal Probe Master (Rox)](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/roche/fsupmmro) มุมมองด่วน [![FastStart Universal SYBR Green Master (Rox)](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/348/305/be9f628a-518b-44fe-bfe4-441c8d1b40a3/640/be9f628a-518b-44fe-bfe4-441c8d1b40a3.jpg) \ Roche \ FSUSGMMRO \ FastStart Universal SYBR Green Master (Rox)](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/roche/fsusgmmro) มุมมองด่วน [![FastStart SYBR Green Master sufficient for 500 reactions, sufficient for 5000 reactions, suitable for qPCR, suitable for RT-qPCR](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/626/814/6013edd9-71a7-4ee2-9c97-99491a2c3c26/640/6013edd9-71a7-4ee2-9c97-99491a2c3c26.jpg) \ Roche \ FSSGMMRO \ FastStart SYBR Green Master](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/roche/fssgmmro) มุมมองด่วน [![FastStart TaqMan® Probe Master sufficient for 100 reactions, sufficient for 500 reactions, sufficient for 2000 reactions, suitable for qPCR, suitable for RT-qPCR](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/626/814/6013edd9-71a7-4ee2-9c97-99491a2c3c26/640/6013edd9-71a7-4ee2-9c97-99491a2c3c26.jpg) \ Roche \ FSTMPMMRO \ FastStart TaqMan® Probe Master](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/roche/fstmpmmro) มุมมองด่วน [![EagleTaq Universal Master Mix (ROX) sufficient for 100 reactions, sufficient for 500 reactions, sufficient for 5000 reactions, suitable for qPCR, suitable for RT-qPCR](https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/626/814/6013edd9-71a7-4ee2-9c97-99491a2c3c26/640/6013edd9-71a7-4ee2-9c97-99491a2c3c26.jpg) \ Roche \ EAGLETMMRO \ EagleTaq Universal Master Mix (ROX)](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/roche/eagletmmro) มุมมองด่วน * * * ## Featured Categories [![การโคลนโมเลกุลและการแสดงออกของโปรตีน](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/categories/molecular-biology/molecular-cloning-protein-expression.jpg "CMV Promoter Mammalian Expression Vector")](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/cloning-and-expression/molecular-cloning-and-protein-expression) [การโคลนโมเลกุลและการแสดงออกของโปรตีน](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/cloning-and-expression/molecular-cloning-and-protein-expression) การโคลนโมเลกุลและวิธีการแสดงออกของโปรตีนและโปรโตคอลสำหรับการโคลนที่เชื่อถือได้และการแสดงออกของโปรตีนที่แข็งแกร่งจากแมลงแบคทีเรียและเวกเตอร์การแสดงออกของโปรตีนสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม [เลือกซื้อผลิตภัณฑ์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/cloning-and-expression/molecular-cloning-and-protein-expression) [![เอพิเจเนติกส์](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/categories/molecular-biology/epigenetics-and-chromatin.jpg "เอพิเจเนติกส์")](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/epigenetics) [เอพิเจเนติกส์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/epigenetics) รีเอเจนต์ epigenetic และทรัพยากรสำหรับการตรวจสอบสายพันธุ์ RNA การดัดแปลงดีเอ็นเอ methylation การปรับเปลี่ยนโครมาตินและการปรับเปลี่ยนไฮสโตน [เลือกซื้อผลิตภัณฑ์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/epigenetics) [![ผลิตภัณฑ์เกรดตัวทำละลาย ReagentPlus](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/categories/molecular-biology/microbiome-opc.jpg "ผลิตภัณฑ์เกรดตัวทำละลาย ReagentPlus")](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/microbiome) [ไมโครไบโอม](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/microbiome) การวิเคราะห์ Gut Microbiome ที่ครอบคลุม: ค้นพบโซลูชันแบบองค์รวมที่ครอบคลุมการเตรียมตัวอย่างการจัดลำดับชีวสารสนเทศและสถิติ ตั้งแต่ 16 วินาทีถึง WGS [เลือกซื้อผลิตภัณฑ์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/microbiome) * * * ภาพรวม Related Articles & Protocols การสนับสนุน ## PCR ทรานสคริปต์ย้อนกลับ (RT-PCR) RT-PCR หรือ Reverse Transcriptase PCR คือการเปลี่ยนแปลงของเทคนิค PCR มาตรฐานที่เกี่ยวข้องกับการขยายตัวของ mRNA เฉพาะที่ได้จากตัวอย่างที่มีขนาดเล็กมาก จึงไม่จำเป็นต้องใช้กระบวนการทำให้บริสุทธิ์ mRNA ที่น่าเบื่อซึ่งจำเป็นสำหรับเทคนิคการโคลนแบบดั้งเดิม ด้วย RT-PCR จะมีการใช้ Reverse Transcriptase และตัวอย่าง RNA นอกเหนือจากตัวทำปฏิกิริยา PCR มาตรฐาน ส่วนผสมของปฏิกิริยาจะถูกให้ความร้อนถึง 37 ˚C ซึ่งช่วยให้สามารถผลิตสำเนา cDNA เสริมจากตัวอย่าง RNA ได้โดยใช้ reverse transcriptase จากนั้น cDNA นี้จะหลอมเข้ากับหนึ่งในไพรเมอร์ที่นำไปสู่การสังเคราะห์เกลียวครั้งแรก PCR มาตรฐานจะมาจากตรงนี้ซึ่งจะสร้าง dsDNA ในที่สุด RT-PCR มักถูกรวมเข้ากับ PCR แบบเรียลไทม์ (QPCR) ซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายในการวัดปริมาณของระดับการถอดความในเซลล์และเนื้อเยื่อ ## Hot Start PCR Hot Start PCR เป็นเทคโนโลยีที่ยับยั้งการเกิดโพลิเมอร์ Taq แบบ Hot Start หรือการรวมตัวของ dNTP ที่ได้รับการดัดแปลงในระหว่างการตั้งค่าปฏิกิริยาจนกว่าจะมีขั้นตอนการกระตุ้นความร้อนเกิดขึ้น วิธีการต่างๆสามารถใช้ได้เพื่อยับยั้งกิจกรรมโพลิเมอร์เริ่มต้นร้อนและรวมถึงการปรับเปลี่ยนทางเคมีวิธีแอนติบอดีปานกลางและ aptamer-mediated  ## PCR ของอุปกรณ์ปลายทางสำหรับการขยายเป้าหมายที่ยาวและแม่นยำ PCR จุดสิ้นสุดมักใช้เพื่อตรวจจับการมีอยู่ของเป้าหมายและความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์เมื่อการตอบสนองเสร็จสมบูรณ์ ความยาวที่จำกัดของลำดับที่ผลิตในระหว่าง PCR มาตรฐานประมาณ 5 kb เป็นส่วนหนึ่งที่เอาชนะด้วยการรวมตัวกันของปัจจัยเพิ่มเติมที่ให้กิจกรรม " พิสูจน์อักษร " →ยาวและถูกต้อง (LA) PCR รวมการใช้โพลิเมอร์ที่มีความร้อนคงที่ตัวที่สองกับ exonuclease 3 ' 5 ' เพื่อซ่อมแซมการรวมตัวกันของนิวเคลียสของขั้วส่งผลให้ความเที่ยงตรงเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญและความสามารถในการขยายเป้าหมาย DNA ได้ถึง 40 kb ยาว [![ค้นหาเอกสาร](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/ecommerce/document-search.png "ค้นหาเอกสาร")](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) [กำลังมองหาข้อมูลที่เฉพาะเจาะจงมากขึ้น ?](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) ไปที่เอกสารของเราค้นหาเอกสารข้อมูลใบรับรองและเอกสารทางเทคนิค [Find Documents](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) ## บทความที่เกี่ยวข้อง - [การแก้ไขปัญหาการขยาย PCR และ RT-PCR](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/troubleshooting-pcr-and-rt-pcr-amplification) ปัญหาเกี่ยวกับ PCR และ RT-PCR จะถูกระบุในระหว่างการวิเคราะห์อิเล็กโตรโฟเรซิสของเจลเช่นการไม่มีแถบการมีแบนที่ไม่เฉพาะเจาะจงรอยเปื้อนที่มากเกินไปและรอยเปื้อนของแถบ - [Digital PCR](https://www.sigmaaldrich.com/TH/en/technical-documents/protocol/genomics/pcr/digital-pcr) Digital PCR enables absolute quantification and detection of minority sequences against similar majority sequences, such as somatic mutations. - [อีทิเดียมโบรไมด์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/technical-article/genomics/nucleic-acid-labeling-and-detection/ethidium-bromide) Ethidium bromide เป็นสีย้อมเรืองแสงที่รู้จักกันดีและใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยเทคโนโลยีชีวภาพ - [ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/polymerase-chain-reaction) ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์เป็นหนึ่งในเทคนิคที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในชีววิทยาโมเลกุล กระบวนการ PCR ประกอบด้วยสามขั้นตอนหลักคือการลดความอิ่มตัวการหลอมและการขยาย - [Hot Start PCR](https://www.sigmaaldrich.com/TH/en/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/hot-start-pcr) The purpose of Hot Start PCR is to inhibit the PCR reaction in order to reduce nonspecific amplification, prevent the formation of primer dimers, and increase product yields. - [ดูทั้งหมด (73)](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) ## Related Protocols - [มาตรฐาน PCR Protocol](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/protocol/genomics/pcr/standard-pcr) เรียนรู้ขั้นตอนมาตรฐานของโปรโตคอล PCR และทบทวนรายการตัวทำปฏิกิริยาหรือพารามิเตอร์การขี่จักรยาน วิธีนี้สำหรับการขยาย PCR ประจำของ DNA ใช้พอลิเมอเรสดีเอ็นเอ Taq มาตรฐาน - [การอบอ่อน oligonucleotides พิธีสาร](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/protocol/genomics/pcr/annealing-oligos) การอบอ่อนเป็นกระบวนการของความร้อนและความเย็นสอง oligonucleotides เดี่ยวที่ควั่นกับลำดับเสริม - [Oligonucleotide Melting Temperature](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/protocol/genomics/pcr/oligos-melting-temp) เรียนรู้เกี่ยวกับวิธีการคำนวณอุณหภูมิการละลายของ oligonucleotide (TM) - [การออกแบบการวิเคราะห์ PCR/qPCR/dPCR](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/protocol/genomics/pcr/pcr-qpcr-dpcr-assay-design) ความผันแปรของเวิร์กโฟลว์ PCR ที่ได้รับอิทธิพลจากแหล่งตัวอย่างการถอดสคริปต์ย้อนกลับและการออกแบบการวิเคราะห์ซึ่งส่งผลกระทบต่อความสามารถในการทำซ้ำ - [REDExtract-N-Amp™ Tissue PCR Kit Protocol](https://www.sigmaaldrich.com/TH/en/technical-documents/protocol/genomics/pcr/redextract-n-amp) Extract-N-Amp kit protocol provides rapid DNA extraction yielding PCR-ready samples in 15 minutes with optimized PCR ReadyMix. - [ดูทั้งหมด (64)](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) ### ค้นหาบทความและโปรโตคอลเพิ่มเติม Enter Keywords ค้นหา ## How Can We Help ในกรณีที่มีคำถามใดๆโปรดส่ง [คำขอการสนับสนุนลูกค้า](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/support/customer-support) หรือพูดคุยกับทีมบริการลูกค้าของเรา: ส่งอีเมลไป[](mailto:[email protected]) ที่ [email protected] หรือโทรไปที่ 800 (0) 244-1173 ## Additional Support - [Chromatogram Search](https://www.sigmaaldrich.com/chromatogram-search) Use the Chromatogram Search to identify unknown compounds in your sample. - [เครื่องคิดเลขและแอป](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/support/calculators-and-apps) Web Toolbox - เครื่องมือวิจัยทางวิทยาศาสตร์และทรัพยากรสำหรับการวิเคราะห์ทางเคมีวิทยาศาสตร์ชีวภาพการสังเคราะห์สารเคมีและวิทยาศาสตร์วัสดุ - [Customer Support Request](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/support/customer-support) การสนับสนุนลูกค้ารวมถึงความช่วยเหลือเกี่ยวกับการสั่งซื้อผลิตภัณฑ์บัญชีและปัญหาทางเทคนิคของเว็บไซต์ - [FAQ](https://maestro.my.site.com/knowledgeportal/s/) Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services. * * * __Featured Articles__ [การแก้ไขปัญหาการขยาย PCR และ RT-PCR](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/troubleshooting-pcr-and-rt-pcr-amplification) ปัญหาเกี่ยวกับ PCR และ RT-PCR จะถูกระบุในระหว่างการวิเคราะห์อิเล็กโตรโฟเรซิสของเจลเช่นการไม่มีแถบการมีแบนที่ไม่เฉพาะเจาะจงรอยเปื้อนที่มากเกินไปและรอยเปื้อนของแถบ [Digital PCR](https://www.sigmaaldrich.com/TH/en/technical-documents/protocol/genomics/pcr/digital-pcr) Digital PCR enables absolute quantification and detection of minority sequences against similar majority sequences, such as somatic mutations. [อีทิเดียมโบรไมด์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/technical-article/genomics/nucleic-acid-labeling-and-detection/ethidium-bromide) Ethidium bromide เป็นสีย้อมเรืองแสงที่รู้จักกันดีและใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยเทคโนโลยีชีวภาพ [ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/polymerase-chain-reaction) ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์เป็นหนึ่งในเทคนิคที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในชีววิทยาโมเลกุล กระบวนการ PCR ประกอบด้วยสามขั้นตอนหลักคือการลดความอิ่มตัวการหลอมและการขยาย บนสุด __เข้าสู่ระบบเพื่อดำเนินการต่อ__ เพื่ออ่านต่อ โปรดเข้าสู่ระบบหรือสร้างบัญชีใหม่ เข้าสู่ระบบ__ยังไม่มีบัญชีใช่หรือไม่?__ลงทะเบียน หน้านี้ได้ถูกแปลโดยเครื่องแปลภาษาเพื่อความสะดวกของลูกค้าของเรา เราได้พยายามเพื่อให้มั่นใจว่าเครื่องแปลภาษาแปลได้ถูกต้องแม่นยำ อย่างไรก็ตาม เครื่องแปลภาษานั้นไม่สมบูรณ์แบบ หากคุณไม่พอใจกับเนื้อหาที่แปลโดยเครื่องแปลภาษา โปรดอ้างอิงจากฉบับภาษาอังกฤษ An unknown error has occured. - ไทย - TH - English - EN [ดูข้อมูลเพิ่มเติม](https://www.sigmaaldrich.com)