[ข้ามไปยังเนื้อหา](https://www.sigmaaldrich.com#main-content) [](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th) สินค้า รถเข็น0 THTH สินค้า ผลิตภัณฑ์การใช้งานบริการทรัพยากรการสนับสนุน [เข้าสู่ระบบ / ลงทะเบียน](https://www.sigmaaldrich.com/oidc-sign-in) [ค้นหาคำสั่งซื้อ](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/order-lookup) [สั่งซื้อด่วน](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/quick-order) รถเข็น0 [หน้าแรก](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th)[การใช้งาน](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/applications)[จีโนมิก](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/applications/genomics)การประยุกต์ใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส # การประยุกต์ใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR)  ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR) เป็นเทคนิคหลักที่มีประสิทธิภาพสูงในชีววิทยาโมเลกุล ซึ่งเป็นวิธีการ*ในหลอดทดลอง*ที่มีประสิทธิภาพและรวดเร็วสำหรับการขยายลำดับดีเอ็นเอหรืออาร์เอ็นเอเฉพาะจากแหล่งต่าง ๆ ด้วยเอนไซม์ PCR มาตรฐานประกอบด้วย ดีเอ็นเอเป้าหมาย ชุดไพรเมอร์โอลิโกนิวคลีโอไทด์สังเคราะห์ที่ล้อมรอบลำดับดีเอ็นเอเป้าหมาย ดีเอ็นเอพอลิเมอเรสที่ทนความร้อน (โดยทั่วไปคือ Taq polymerase) และนิวคลีโอไทด์ โดยใช้เครื่องไซเคิลความร้อน (thermal cycler) แต่ละรอบการขยายตัวจะประกอบด้วยสามขั้นตอน ได้แก่ การทำให้ DNA สายคู่ (dsDNA) แยกตัวเป็น DNA สายเดี่ยวสองสาย การจับคู่ไพรเมอร์กับลำดับ DNA เป้าหมาย และการขยายตัว ซึ่ง DNA โพลีเมอเรสจะขยาย DNA จากไพรเมอร์ สร้าง dsDNA ใหม่ที่มีสายเก่าหนึ่งสายและสายใหม่หนึ่งสาย สาย DNA ที่สังเคราะห์ได้ในหนึ่งรอบจะทำหน้าที่เป็นแม่แบบในรอบถัดไป ซึ่งส่งผลให้ปริมาณ DNA เพิ่มขึ้นถึงหนึ่งล้านเท่าภายในเพียง 20 รอบเท่านั้น * * * ## ผลิตภัณฑ์ที่เกี่ยวข้อง Slide 1 of 9 1 of 2 [ \ Roche \ RNAINH-RO \ Protector RNase Inhibitor](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/roche/rnainhro) มุมมองด่วน [ \ Sigma-Aldrich \ AMPD1 \ DNase I](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/sigma/ampd1) มุมมองด่วน [ \ Sigma-Aldrich \ RDRT \ ReadyScript® cDNA Synthesis Mix](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/sigma/rdrt) มุมมองด่วน [ \ Sigma-Aldrich \ STR1 \ Enhanced Avian First Strand Synthesis Kit](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/sigma/str1) มุมมองด่วน [ \ Roche \ FSUPMMRO \ FastStart Universal Probe Master (Rox)](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/roche/fsupmmro) มุมมองด่วน [ \ Roche \ FSUSGMMRO \ FastStart Universal SYBR Green Master (Rox)](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/roche/fsusgmmro) มุมมองด่วน [ \ Roche \ FSSGMMRO \ FastStart SYBR Green Master](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/roche/fssgmmro) มุมมองด่วน [ \ Roche \ FSTMPMMRO \ FastStart TaqMan® Probe Master](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/roche/fstmpmmro) มุมมองด่วน [ \ Roche \ EAGLETMMRO \ EagleTaq Universal Master Mix (ROX)](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/product/roche/eagletmmro) มุมมองด่วน * * * ## หมวดหมู่ที่แนะนำ [](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/cloning-and-expression/molecular-cloning-and-protein-expression) [การโคลนนิ่งระดับโมเลกุลและการแสดงออกของโปรตีน](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/cloning-and-expression/molecular-cloning-and-protein-expression) วิธีการและขั้นตอนการโคลนนิ่งระดับโมเลกุลและการแสดงออกของโปรตีน เพื่อการโคลนนิ่งที่เชื่อถือได้และการแสดงออกของโปรตีนที่มั่นคงจากเวกเตอร์การแสดงออกของโปรตีนจากแมลง แบคทีเรีย และสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม [ดูสินค้า](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/cloning-and-expression/molecular-cloning-and-protein-expression) [](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/epigenetics) [เอพิเจเนติกส์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/epigenetics) สารและทรัพยากรด้านเอพิเจเนติกส์ สำหรับการศึกษาชนิดของ RNA การเมทิลเลชันของ DNA การเปลี่ยนแปลงของโครมาติน และการเปลี่ยนแปลงของฮิสโตน [ดูสินค้า](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/epigenetics) [](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/microbiome) [ไมโครไบโอม](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/microbiome) การวิเคราะห์ไมโครไบโอมในลำไส้อย่างครบวงจร: ค้นพบโซลูชันแบบองค์รวมที่ครอบคลุมการเตรียมตัวอย่าง การหาลำดับพันธุกรรม การวิเคราะห์ข้อมูลชีวภาพ และสถิติ ตั้งแต่ 16S ไปจนถึง WGS [ดูสินค้า](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/products/molecular-biology-and-functional-genomics/microbiome) * * * ภาพรวม บทความและขั้นตอนที่เกี่ยวข้อง การสนับสนุน ## PCR ด้วยเอนไซม์รีเวิร์สทรานสคริปเทส (RT-PCR) RT-PCR หรือ PCR ด้วยเอนไซม์รีเวิร์สทรานสคริปเทส เป็นรูปแบบหนึ่งของเทคนิค PCR มาตรฐาน ซึ่งเกี่ยวข้องกับการขยายปริมาณ mRNA ที่เฉพาะเจาะจงจากตัวอย่างที่มีขนาดเล็กมาก เทคนิคนี้ช่วยขจัดความจำเป็นในการผ่านกระบวนการแยกบริสุทธิ์ mRNA ที่ยุ่งยาก ซึ่งจำเป็นสำหรับเทคนิคการโคลนนิ่งแบบดั้งเดิม โดยใน RT-PCR จะใช้เอนไซม์รีเวิร์สทรานสคริปเทสและตัวอย่าง RNA ร่วมกับสารเคมี PCR มาตรฐาน ผสมปฏิกิริยาถูกให้ความร้อนถึง 37 ˚C ซึ่งทำให้เอนไซม์รีเวิร์สทรานสคริปเทสสามารถสร้างสำเนา cDNA ที่เสริมกันจากตัวอย่าง RNA ได้ cDNA นี้จึงจับคู่กับไพรเมอร์ตัวหนึ่ง ซึ่งนำไปสู่การสังเคราะห์สายแรก หลังจากนั้นจะดำเนินการตามขั้นตอน PCR มาตรฐาน ซึ่งในที่สุดจะสร้าง dsDNA ขึ้น RT-PCR มักถูกใช้ร่วมกับ real-time PCR (qPCR) ซึ่งถูกใช้อย่างแพร่หลายในการวัดปริมาณระดับการถอดรหัสในเซลล์และเนื้อเยื่อ ## Hot Start PCR Hot Start PCR เป็นเทคโนโลยีที่ยับยั้งการทำงานของ Taq polymerase แบบ hot start หรือการรวมตัวของ dNTP ที่ถูกดัดแปลงในระหว่างการเตรียมปฏิกิริยา จนกว่าจะถึงขั้นตอนการกระตุ้นด้วยความร้อน มีวิธีการต่าง ๆ ที่สามารถใช้เพื่อยับยั้งกิจกรรมของ polymerase แบบ hot start ได้ ซึ่งรวมถึงวิธีการดัดแปลงทางเคมี วิธีการที่ใช้แอนติบอดีเป็นตัวกลาง และวิธีการที่ใช้ aptamer เป็นตัวกลาง  ## PCR แบบ Endpoint สำหรับการขยาย เป้าหมายที่ยาวและแม่นยำ PCR แบบจุดสิ้นสุดมักถูกใช้เพื่อตรวจหาการมีอยู่ของเป้าหมายและปริมาณสัมพัทธ์เมื่อปฏิกิริยาเสร็จสิ้น ความยาวที่จำกัดของลำดับที่เกิดใน PCR มาตรฐาน ซึ่งประมาณ 5 kb สามารถแก้ไขได้ส่วนหนึ่งด้วยการเพิ่มปัจจัยเพิ่มเติมที่ให้กิจกรรม “การตรวจสอบความถูกต้อง” PCR ยาวและแม่นยำ (LA) ใช้โพลีเมอเรสที่ทนความร้อนตัวที่สองที่มีเอนโซนิวคลีเอส 3′→5′ เพื่อซ่อมแซมการรวมนิวคลีโอไทด์ผิดที่ปลายสาย ส่งผลให้ความแม่นยำเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ และสามารถขยายเป้าหมาย DNA ได้ยาวถึง 40 kb [](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) [ต้องการข้อมูลที่ละเอียดกว่านี้หรือไม่?](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) เยี่ยมชมระบบค้นหาเอกสารของเราเพื่อค้นหาใบข้อมูล ใบรับรอง และเอกสารทางเทคนิค [ค้นหาเอกสาร](https://www.sigmaaldrich.com/documents-search) ## บทความที่เกี่ยวข้อง - [การแก้ไขปัญหาการขยาย PCR และ RT-PCR](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/troubleshooting-pcr-and-rt-pcr-amplification) ปัญหาเกี่ยวกับ PCR และ RT-PCR จะถูกระบุในระหว่างการวิเคราะห์อิเล็กโตรโฟเรซิสของเจลเช่นการไม่มีแถบการมีแบนที่ไม่เฉพาะเจาะจงรอยเปื้อนที่มากเกินไปและรอยเปื้อนของแถบ - [Digital PCR](https://www.sigmaaldrich.com/TH/en/technical-documents/protocol/genomics/pcr/digital-pcr) Digital PCR enables absolute quantification and detection of minority sequences against similar majority sequences, such as somatic mutations. - [อีทิเดียมโบรไมด์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/technical-article/genomics/nucleic-acid-labeling-and-detection/ethidium-bromide) Ethidium bromide เป็นสีย้อมเรืองแสงที่รู้จักกันดีและใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยเทคโนโลยีชีวภาพ - [ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/polymerase-chain-reaction) ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์เป็นหนึ่งในเทคนิคที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในชีววิทยาโมเลกุล กระบวนการ PCR ประกอบด้วยสามขั้นตอนหลักคือการลดความอิ่มตัวการหลอมและการขยาย - [Hot Start PCR](https://www.sigmaaldrich.com/TH/en/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/hot-start-pcr) The purpose of Hot Start PCR is to inhibit the PCR reaction in order to reduce nonspecific amplification, prevent the formation of primer dimers, and increase product yields. - [ดูทั้งหมด (73)](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) ## โปรโตคอลที่เกี่ยวข้อง - [มาตรฐาน PCR Protocol](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/protocol/genomics/pcr/standard-pcr) เรียนรู้ขั้นตอนมาตรฐานของโปรโตคอล PCR และทบทวนรายการตัวทำปฏิกิริยาหรือพารามิเตอร์การขี่จักรยาน วิธีนี้สำหรับการขยาย PCR ประจำของ DNA ใช้พอลิเมอเรสดีเอ็นเอ Taq มาตรฐาน - [การอบอ่อน oligonucleotides พิธีสาร](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/protocol/genomics/pcr/annealing-oligos) การอบอ่อนเป็นกระบวนการของความร้อนและความเย็นสอง oligonucleotides เดี่ยวที่ควั่นกับลำดับเสริม - [Oligonucleotide Melting Temperature](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/protocol/genomics/pcr/oligos-melting-temp) เรียนรู้เกี่ยวกับวิธีการคำนวณอุณหภูมิการละลายของ oligonucleotide (TM) - [การออกแบบการวิเคราะห์ PCR/qPCR/dPCR](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/protocol/genomics/pcr/pcr-qpcr-dpcr-assay-design) ความผันแปรของเวิร์กโฟลว์ PCR ที่ได้รับอิทธิพลจากแหล่งตัวอย่างการถอดสคริปต์ย้อนกลับและการออกแบบการวิเคราะห์ซึ่งส่งผลกระทบต่อความสามารถในการทำซ้ำ - [REDExtract-N-Amp™ Tissue PCR Kit Protocol](https://www.sigmaaldrich.com/TH/en/technical-documents/protocol/genomics/pcr/redextract-n-amp) Extract-N-Amp kit protocol provides rapid DNA extraction yielding PCR-ready samples in 15 minutes with optimized PCR ReadyMix. - [ดูทั้งหมด (64)](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) ### ค้นหาบทความและขั้นตอนเพิ่มเติม ป้อนคำค้นหา ค้นหา ## เราสามารถช่วยได้อย่างไร หากมีคำถามใดๆ โปรดส่งคำ[ขอ](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/support/customer-support) [สนับสนุนลูกค้า](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/support/customer-support) หรือติดต่อทีมบริการลูกค้าของเรา: อีเมล [custserv@sial.com](mailto:custserv@sial.com) หรือโทร +1 (800) 244-1173 ## การสนับสนุนเพิ่มเติม - [การค้นหาโครมาโตแกรม](https://www.sigmaaldrich.com/chromatogram-search) ใช้ฟังก์ชันการค้นหาโครมาโตแกรมเพื่อระบุสารประกอบที่ไม่ทราบชื่อในตัวอย่างของคุณ - [เครื่องคิดเลขและแอป](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/support/calculators-and-apps) Web Toolbox - เครื่องมือวิจัยทางวิทยาศาสตร์และทรัพยากรสำหรับการวิเคราะห์ทางเคมีวิทยาศาสตร์ชีวภาพการสังเคราะห์สารเคมีและวิทยาศาสตร์วัสดุ - [คำขอสนับสนุนลูกค้า](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/support/customer-support) การสนับสนุนลูกค้ารวมถึงความช่วยเหลือเกี่ยวกับการสั่งซื้อผลิตภัณฑ์บัญชีและปัญหาทางเทคนิคของเว็บไซต์ - [คำถามที่พบบ่อย](https://maestro.my.site.com/knowledgeportal/s/) ดูส่วนคำถามที่มักถูกถาม (FAQ) ของเรา เพื่อหาคำตอบสำหรับคำถามที่มักถูกถามเกี่ยวกับผลิตภัณฑ์และบริการของเรา * * * __บทความแนะนำ__ [การแก้ไขปัญหาการขยาย PCR และ RT-PCR](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/troubleshooting-pcr-and-rt-pcr-amplification) ปัญหาเกี่ยวกับ PCR และ RT-PCR จะถูกระบุในระหว่างการวิเคราะห์อิเล็กโตรโฟเรซิสของเจลเช่นการไม่มีแถบการมีแบนที่ไม่เฉพาะเจาะจงรอยเปื้อนที่มากเกินไปและรอยเปื้อนของแถบ [Digital PCR](https://www.sigmaaldrich.com/TH/en/technical-documents/protocol/genomics/pcr/digital-pcr) Digital PCR enables absolute quantification and detection of minority sequences against similar majority sequences, such as somatic mutations. [อีทิเดียมโบรไมด์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/technical-article/genomics/nucleic-acid-labeling-and-detection/ethidium-bromide) Ethidium bromide เป็นสีย้อมเรืองแสงที่รู้จักกันดีและใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยเทคโนโลยีชีวภาพ [ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/technical-documents/technical-article/genomics/pcr/polymerase-chain-reaction) ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์เป็นหนึ่งในเทคนิคที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในชีววิทยาโมเลกุล กระบวนการ PCR ประกอบด้วยสามขั้นตอนหลักคือการลดความอิ่มตัวการหลอมและการขยาย บนสุด __เข้าสู่ระบบเพื่อดำเนินการต่อ__ เพื่ออ่านต่อ โปรดเข้าสู่ระบบหรือสร้างบัญชีใหม่ เข้าสู่ระบบ__ยังไม่มีบัญชีใช่หรือไม่?__ลงทะเบียน หน้านี้ได้ถูกแปลโดยเครื่องแปลภาษาเพื่อความสะดวกของลูกค้าของเรา เราได้พยายามเพื่อให้มั่นใจว่าเครื่องแปลภาษาแปลได้ถูกต้องแม่นยำ อย่างไรก็ตาม เครื่องแปลภาษานั้นไม่สมบูรณ์แบบ หากคุณไม่พอใจกับเนื้อหาที่แปลโดยเครื่องแปลภาษา โปรดอ้างอิงจากฉบับภาษาอังกฤษ การสนับสนุน[ฝ่ายบริการลูกค้า](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/support/customer-support)[ติดต่อเรา](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/collections/offices)[คำถามที่พบบ่อย](https://maestro.my.site.com/knowledgeportal/s/)[เอกสารข้อมูลความปลอดภัย (SDS)](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/documents-search?tab=sds)[ใบรับรอง (COA/COO)](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/documents-search?tab=coa)[คุณภาพและการกำกับดูแล](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/life-science/quality-and-regulatory-management)[เครื่องคิดเลขและแอป](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/support/calculators-and-apps)[การสัมมนาผ่านเว็บ](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/collections/webinars) คำสั่งซื้อ[ค้นหาคำสั่งซื้อ](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/order-lookup)[คำสั่งซื้อด่วน](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/quick-order)[ผลิตภัณฑ์ที่กำหนดเอง](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/services/custom-products)[โซลูชันอีคอมเมิร์ซ](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/life-science/ecommerce/ecommerce-solutions) บริษัท[เกี่ยวกับเรา](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/life-science/about-us)[ความรับผิดชอบ](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/life-science/ssbi)[กิจกรรม](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/collections/events)[ข่าวประชาสัมพันธ์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/collections/press)[โครงการ](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/life-science/partnership-programs)[อาชีพ](https://careers.merckgroup.com/global/en)[สำนักงาน](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/collections/offices) โซเชียลมีเดีย [](https://www.linkedin.com/company/merck-life-science) [](https://x.com/Merck_lifesci) [](https://www.facebook.com/Merck.lifescience) [](https://www.instagram.com/mercklifescience/) [](https://www.youtube.com/@MerckLifeScience/featured) Merck __การวิจัย การพัฒนา การผลิต__ เราเป็นผู้จัดจำหน่ายชั้นนำของอุตสาหกรรมวิทยาศาสตร์ชีวภาพระดับโลกด้วยโซลูชันและบริการสำหรับการวิจัย การพัฒนาและผลิตเทคโนโลยีชีวภาพ รวมถึงการพัฒนาและผลิตการบำบัดด้วยยาทางเภสัชกรรม [](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th) [โซลูชัน Sigma-Aldrich®](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/life-science/sigma-aldrich)[โซลูชัน BioReliance®](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/life-science/bioreliance)[โซลูชัน Millipore®](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/life-science/millipore)[โซลูชัน SAFC®](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/life-science/safc)[โซลูชัน Milli-Q®](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/life-science/milliq)[โซลูชัน Supelco®](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/life-science/supelco) © 2026 Merck KGaA เมืองดาร์มชตัท ประเทศเยอรมนี และ/หรือบริษัทในเครือ สงวนลิขสิทธิ์รวมถึงการทำเหมืองข้อมูลและข้อความสำหรับการฝึกอบรม AI และเทคโนโลยีที่คล้ายกัน ห้ามทำซ้ำสื่อใดๆ จากเว็บไซต์โดยไม่ได้รับอนุญาต [เงื่อนไขการใช้งานเว็บไซต์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/life-science/legal/site-use-terms)|[นโยบายความเป็นส่วนตัว](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/life-science/legal/privacy-statement)|[ข้อกำหนดและเงื่อนไขทั่วไปของการขาย](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/life-science/legal/terms-and-conditions)|[การยินยอมด้านลิขสิทธิ์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/life-science/legal/copyright-consent)|[แผนผังเว็บไซต์](https://www.sigmaaldrich.com/TH/th/site-map) An unknown error has occured.