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FSUPMMRO

Roche

FastStart Universal Probe Master (Rox)

sufficient for 250 reactions, sufficient for 1250 reactions, sufficient for 5000 reactions, suitable for qPCR, suitable for RT-qPCR

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sufficient for 1250 reactions, sufficient for 250 reactions, sufficient for 5000 reactions

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dNTPs included: no, hotstart

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Roche

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pkg of 1250 x 20 μL reactions (04913957001), pkg of 250 x 20 μL reactions (04913949001), pkg of 5000 x 20 μL reactions (04914058001)

technique(s)

RT-qPCR: suitable, qPCR: suitable

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FSUSGMMROFSSGMMROFSTMPMMRO
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RT-qPCR: suitable

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RT-qPCR: suitable

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RT-qPCR: suitable

technique(s)

RT-qPCR: suitable

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sufficient for 500 reactions, sufficient for 5000 reactions

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sufficient for 100 reactions, sufficient for 2000 reactions, sufficient for 500 reactions

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dNTPs included: no, hotstart

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dNTPs included: no, hotstart

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dNTPs included: no, hotstart

manufacturer/tradename

Roche

manufacturer/tradename

Roche

manufacturer/tradename

Roche

manufacturer/tradename

Roche

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pkg of 1250 x 20 μL reactions (04913957001)

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pkg of 200 x 50 μL reactions (04913850001), pkg of 2000 x 50 μL reactions (04913914001)

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pkg of 500 x 20 μL reactions (04673484001), pkg of 5000 x 20 μL reactions (04673492001)

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pkg of 100 x 50 μL reactions (04673409001), pkg of 2000 x 50 μL reactions (04673433001), pkg of 500 x 50 μL reactions (04673417001)

input

purified DNA

input

purified DNA

input

purified DNA

input

purified DNA

General description

Gebrauchsfertiges Heißstart-Reaktionsgemisch für die qPCR und RT-qPCR auf allen Echtzeit-PCR-Systemen, die eine Normalisierung mit ROX erfordern.

FastStart Universal Probe Master (Rox) enthält einen neuartigen Referenzfarbstoff, der seine Verwendung auf allen Echtzeit-PCR-Systemen ermöglicht, die eine Normalisierung mit ROX erfordern, ohne dass das spezifische Gerät oder Protokoll modifiziert oder angepasst werden muss. Dieser gebrauchsfertige, 2x-konzentrierte Master-Mix enthält alle Reagenzien (außer Primer, Sonde und Template), die für die Durchführung quantitativer Echtzeit-DNA-Detektionsassays, einschließlich qPCR und zweistufiger qRT-PCR, im Hydrolyse-Sondennachweisformat benötigt werden. FastStart Universal Probe Master (Rox) liefert hervorragende Ergebnisse bei Systemen wie dem 7900 HT Fast Real-Time PCR-System oder dem 7500 Real-Time PCR-System von Applied Biosystems. Dieses Produkt ist nicht zur Verwendung mit den LightCycler® Geräten vorgesehen.
Heißstart-Protokolle verbessern die Spezifität, Sensitivität und Ausbeute der PCR erheblich. Hitzelabile Blockiergruppen auf einigen der Aminosäurereste der FastStart Taq DNA-Polymerase inaktivieren das modifizierte Enzym bei Raumtemperatur. Daher findet während der Zeit, in der Primer unspezifisch binden können, keine Verlängerung statt. FastStart Taq DNA-Polymerase wird durch Entfernung der Blockiergruppen bei hohen Temperaturen (z.B. einem Vorinkubationsschritt bei +95 °C) aktiviert.

Application

FastStart Universal Probe Master (Rox) wurde verwendet für:
  • TaqMan® quantitative Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktionen (qRT-PCR) zur Quantifizierung endogener miRNA wie MIR376B, MIR376A und MIR181A[1][2][3]
  • reverse Transkriptase (RT-PCR) zur Untersuchung der Expression des Tumornekrosefaktors (TNF) in ganzem Synovialgewebe von Patienten mit undifferenzierter peripherer inflammatorischer Arthritis (UPIA) [4]
  • die Amplifikation und Detektion beliebiger DNA- oder cDNA-Targets, einschließlich GC- oder AT-reicher Targets, mittels quantitativer PCR[5][6]
Durch Kombination dieses Mastermixes mit dem Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit (Roche) erzielen Sie ausgezeichnete Ergebnisse bei der zweistufigen qRT-PCR.[7]

Features and Benefits

  • Steigerung der qPCR-Sensitivität und -Spezifität.
Erzeugung niedrigerer Ct (Schwellenwertzyklus)-Werte.

  • Verwendung der Master-Mischung mit jedem sondenbasierten Assay.
Erreichen empfindlicher, spezifischer Ergebnisse in Assays mit den Universal ProbeLibrary-Sonden oder jeder anderen Hydrolyse-Sonde.

  • Amplifizieren und Nachweis eines breiten Spektrums von DNA- oder cDNA-Targets.
Amplifizieren von Fragmenten mit einer Länge bis zu 500 bp, einschließlich derjenigen, die GC- oder AT-reich sind.

  • Visualisierung von Amplifikationsprodukten auf Agarosegelen.

  • Verwenden von automatisierten Pipettierstationen zum Vorbereiten von qPCR-Reaktionen.
Verwendung einer Master-Mischung, die bei Raumtemperatur während längerer Reaktionseinrichtzeiten stabil ist.

  • Vermeidung falsch-positiver Ergebnisse durch Kontaminationsübertragung.
Verwendung dieser dUTP enthaltenden Mischung mit Uracil-DNA-Glycosylase zur Eliminierung von kontaminierender DNA, die von früheren PCR-Reaktionen übertragen wurde.

Analysis Note

Funktionstest: Jede Charge wird mit drei Templates auf ihre Leistung in der qPCR getestet: ein GC-reiches Template, ein AT-reiches Template und ein langes Template (ca. 440 bp).

Other Notes

FastStart Universal Probe Master (ROX), doppelt konzentrierte Master-Mischung, die FastStart Taq DNA Polymerase, Reaktionspuffer, Nukleotide (dATP, dCTP, dGTP, dUTP) und einen Referenzfarbstoff enthält.
Nur für die Life Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.

Legal Information

FastStart is a trademark of Roche
LightCycler is a registered trademark of Roche
TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.

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The essential function for serum response factor in T-cell development reflects its specific coupling to extracellular signal-regulated kinase signaling.
Mylona A, et al.
Molecular and Cellular Biology, 31(2), 267-276 (2011)
Stefano Alivernini et al.
Frontiers in medicine, 5, 186-186 (2018-07-19)
Objectives: To examine synovial tissue (ST) predictors of clinical differentiation in patients with seronegative undifferentiated peripheral inflammatory arthritis (UPIA). Methods: Fourty-two patients with IgA/IgM-Rheumatoid Factor and anti-citrullinated peptide antibodies negative UPIA, naive to Disease-Modifying Anti-Rheumatic Drugs, underwent Gray Scale (GSUS)
Kumsal Ayse Tekirdag et al.
Autophagy, 9(3), 374-385 (2013-01-17)
Macroautophagy (autophagy herein) is a cellular catabolic mechanism activated in response to stress conditions including starvation, hypoxia and misfolded protein accumulation. Abnormalities in autophagy were associated with pathologies including cancer and neurodegenerative diseases. Hence, elucidation of the signaling pathways controlling
Matthew L Hillestad et al.
Human gene therapy, 23(10), 1116-1126 (2012-07-28)
Reporter genes are important tools for assessing vector pharmacology in vivo. Although useful, current systems are limited by (1) the need to generate a new vector for each different reporter, (2) the inability to package reporter genes in small vectors
Gozde Korkmaz et al.
PloS one, 8(12), e82556-e82556 (2013-12-21)
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