CELLDETH-RO

Zelltodnachweis-ELISA^PLUS

sufficient for 96 multiwell tests (11774425001), sufficient for 10 x 96 multiwell tests (11920685001)

• Synonym(e): ELISA
• UNSPSC Code: 41116158
• NACRES: NA.54
• Storage temp.: 2-8°C

Eigenschaften

• usage: sufficient for 10 x 96 multiwell tests (11920685001), sufficient for 96 multiwell tests (11774425001)
• manufacturer/tradename: Roche
• technique(s): ELISA: suitable
• detection method: photometric
• storage temp.: 2-8°C

Beschreibung

General description

Verwenden Sie dieses Kit zur relativen Quantifizierung Histon-komplexierter DNA-Fragmente (Mono- und Oligonukleosomen) aus dem Zytoplasma von Zellen nach dem induzierten Zelltod (Apoptose) oder nach der Freisetzung aus nekrotischen Zellen. Da der Assay keine Vormarkierung von Zellen erfordert, detektiert er den internukleosomalen Abbau genomischer DNA während der Apoptose, selbst in Zellen, die nicht in vitro proliferieren, wie z.B. frisch isolierten Tumorzellen. Die in diesem Assay eingesetzten Antikörper sind nicht Spezies-spezifisch. Das Kit kann daher für Zellen zahlreicher verschiedener Spezies eingesetzt werden.

Application

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Der photometrische Zelltodnachweis-ELISA^PLUS ist für die quantitative In-vitro-Bestimmung zytoplasmatischer Histon-assoziierter DNA-Fragmente (Mono- und Oligonukleosomen) nach dem induzierten Zelltod vorgesehen.[1][2][3]
Das Kit enthält eine Stopplösung, die es dem Anwender ermöglicht, die Substratreaktion abzubrechen und den Assay unter definierten Bedingungen durchzuführen, wodurch er für den Einsatz in Hochdurchsatz-Anwendungen geeignet ist.

Biochem/physiol Actions

Anti-Histon reagiert mit den Histonen H1, H2A, H2B, H3 und H4 verschiedener Spezies (z.B. Mensch, Maus, Ratte, Hamster, Kuh, Opossum, Xenopus). Anti-DNA bindet an einzel- und doppelsträngige DNA. Der ELISA ermöglicht daher den Nachweis von Mono- und Oligonukleosomen verschiedener Spezies und kann zur Messung des apoptotischen Zelltodes in zahlreichen verschiedenen Zellsystemen eingesetzt werden.

Features and Benefits

Testzeit: 3 - 4 Stunden
Negativkontrolle: Je nach Zellkulturbedingungen enthält jede exponentiell wachsende permanente Zellkultur einen gewissen Anteil an toten Zellen (typischerweise etwa 3–8 %). Im Immunoassay verursachen diese inhärenten toten Zellen in der unbehandelten Probe (ohne Zelltod-induzierende Mittel) einen bestimmten Extinktionswert (Negativkontrolle).
Positivkontrolle: Ein DNA-Histon-Komplex dient als Positivkontrolle.
Probenmaterial: Zytoplasmatische Fraktionen (Lysate) von Zelllinien, Zellen ex vivo, Zellkulturüberstände und Serum oder Plasma

• Ein-Schritt-ELISA
• Hohe Empfindlichkeit: (5 x 102 Zellen/ml)
• Schnelle Durchführung: (3 - 4 Stunden)
• Positivkontrolle im Lieferumfang enthalten
• Keine Vormarkierung der Zellen erforderlich
• Nicht-radioaktives Assaysystem
• Keine Speziesbeschränkung
• Einfache Handhabung
• Geringer Hintergrund
• Unterdrückter humaner Anti-Maus-Faktor
• Funktionsgeprüft

Packaging

1 Kit mit 10 Komponenten

• 11774425001 (1 Kit mit 10 Komponenten)
• 11920685001 (1 Kit mit 10 Komponenten)

Preparation Note

Die exakte Detektionsgrenze für sterbende/tote Zellen in einer bestimmten Probe hängt von der Kinetik des Zelltodes, dem verwendeten zytotoxischen Wirkstoff und der Anzahl der betroffenen Zellen in der gesamten Zellpopulation ab. Bei Anwendung von U937/Camptothecin (CAM) als zelluläres Modell für den Zelltod ermöglicht der Immunoassay den spezifischen Nachweis von Mono- und Oligonukleosomen in der zytoplasmatischen Fraktion von 125 Zelläquivalenten/Well.

Arbeitslösung: Herstellung von Arbeitslösungen

Neben den gebrauchsfertigen Lösungen, die mit diesem Kit geliefert werden, müssen Sie die folgenden Arbeitslösungen herstellen:
Hinweis: Verwenden Sie bidestilliertes Wasser zur Rekonstituierung der Lyophilisate.

Anti-Histon-Biotin
Rekonstituieren Sie das Lyophilisat in 450 μl bidestilliertem Wasser für 10 Minuten und mischen Sie gründlich.
Verwendung: Bestandteil des Immunreagenzes.
Anti-DNA-Peroxidase
Rekonstituieren Sie das Lyophilisat in 450 μl bidestilliertem Wasser für 10 Minuten und mischen Sie gründlich.
Verwendung: Bestandteil des Immunreagenzes.
Positivkontrolle
Rekonstituieren Sie das Lyophilisat in 450 μl bidestilliertem Wasser für 10 Minuten und mischen Sie gründlich.
Verwendung: ELISA-Schritt 1.
ABTS-Tabletten
Je nach Anzahl der getesteten Proben, lösen Sie 1, 2 oder 3 Tabletten aus Flasche 7 in 5, 10 oder 15 ml Substratpuffer.
Verwendung: ELISA-Schritt 5.
ABTS-Stopplösung
Wenn Trübung oder ein Präzipitat sichtbar ist, wärmen Sie die Lösung unter Schütteln auf 37 °C auf, bis sie klar ist.
Verwendung: ELISA-Schritt 6.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): Anti-Histon-Biotin: 2 Monate bei 2 bis 8 °C
ABTS-Tabletten: Lichtgeschützt 1 Monat. Vor Gebrauch auf 15 bis 25 °C aufwärmen.
ABTS-Stopplösung: Bei 2 bis 8 °C bis zum Verfallsdatum auf dem Etikett.

Other Notes

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Umrechnung der Einheiten: 1 mU = 1 x 10-3 OD (1 mU = 0,001 OD).

Nur Kit-Komponenten

• Anti-histone-biotin antibody (clone H11-4)
• Anti-DNA-POD antibody (clone MCA-33)
• Positive Control
• Incubation Buffer
• Lysis Buffer
• Substrate Buffer
• ABTS Substrate Tablet

Alle anzeigen (10)

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS07,GHS05,GHS07,GHS09
• signalword: WarningDanger
• hcodes: H317 - H319 - H412 - H317 - H318 - H411
• pcodes: P261 - P273 - P280 - P261 - P273 - P280 - P333 + P313 - P337 + P313 - P362 + P364 - P305 + P351 + P338 + P310 - P333 + P313 - P391
• Hazard Classifications: Aquatic Chronic 2 - Aquatic Chronic 3 - Eye Dam. 1 - Eye Irrit. 2 - Skin Sens. 1
• Lagerklasse: 8B - Non-combustible, corrosive hazardous materials
• wgk: WGK 3
• flash_point_c: does not flash