For the cytokine analysis of brain tissue using Milliplex Cytokine kits , the following protocol is recommended:
Tissue Collection:
•Extract the brains from each animal during euthanasia.
•Cut the tissue into small pieces using two scalpel blades.
•Shock-freeze approximately 0.2 ml of tissue in liquid nitrogen or using dry ice.
•Store the frozen tissue at -80°C until further processing for cytokine analysis.
Tissue Homogenization:
•Homogenize the tissue in 1 ml of PBS containing protease inhibitors (the ratio of tissue to volume should be 10 to 1, for example, 1 ml for 100 mg of tissue).
•Centrifuge the homogenates at a speed greater than 10,000g for at least 10 minutes.
•Use the supernatants for cytokine assays or store them at -80°C.
Dilutions of the homogenates should be determined as necessary.
HCYTA-60K-PX48
MILLIPLEX®, Panel A de citocinas/quimiocinas/factor de crecimiento humanos Panel A 48 plexado de microesferas magnéticas premezcladas - Ensayo múltiple para inmunología
MILLIPLEX® Human Cytokine/Chemokine/Growth Factor Panel A
Sinónimos:
Human cytokine multiplex kit, Luminex® human cytokine immunoassay, Millipore human cytokine panel
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Acerca de este artículo
Código UNSPSC:
12161503
NACRES:
NA.77
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Permítanos ayudarlereactividad de especies
human
Nivel de calidad
fabricante / nombre comercial
Milliplex®
técnicas
multiplexing: suitable
método de detección
fluorometric (Luminex® xMAP®)
temp. de almacenamiento
2-8°C
Categorías relacionadas
1 of 4
Este artículo | HCYTA-60K-PXBK48 | HCYTA-60K-PX38 | HCYP2MAG-62K |
|---|---|---|---|
| species reactivity human | species reactivity human | species reactivity human | species reactivity human |
| manufacturer/tradename Milliplex® | manufacturer/tradename Milliplex® | manufacturer/tradename Milliplex® | manufacturer/tradename Milliplex® |
| Quality Level 200 | Quality Level 200 | Quality Level 200 | Quality Level 200 |
| technique(s) multiplexing: suitable | technique(s) multiplexing: suitable | technique(s) multiplexing: suitable | technique(s) multiplexing: suitable |
| detection method fluorometric (Luminex® xMAP®) | detection method fluorometric (Luminex® xMAP®) | detection method fluorometric (Luminex® xMAP®) | detection method fluorometric (Luminex xMAP) |
| storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. - |
Descripción general
Las citocinas son polipéptidos inmunomoduladores que desempeñan un papel clave en las respuestas inmunitarias tanto adaptativas como innatas. “Citocina” es un término general utilizado para un grupo diverso de proteínas y péptidos solubles que actúan como reguladores en condiciones normales y patológicas para modular las actividades funcionales de células y tejidos. Estas proteínas también intervienen en las interacciones directas entre las células y regulan los procesos que tienen lugar en el entorno extracelular. Las citocinas difieren de las hormonas en que actúan en un espectro más amplio de células diana. El grupo de proteínas citocinas consta de linfocinas, interferones, factores estimulantes de colonias y quimiocinas. Los factores de crecimiento intervienen en la estimulación de la supervivencia, la proliferación y la diferenciación de células específicas, con efectos sobre la angiogénesis, la vasculogénesis, la migración celular, la apoptosis, la cicatrización de heridas y la embriogénesis.La investigación sobre citocinas, quimiocinas y factores de crecimiento representa un papel importante en la consecución de una comprensión más profunda del sistema inmunitario y su respuesta multifacética a la mayoría de los antígenos, en especial aquellas respuestas que conforman el proceso inflamatorio, y estados mórbidos como las enfermedades infecciosas, la artrosis, las enfermedades respiratorias, el síndrome del intestino irritable (IBD), la septicemia y las reacciones alérgicas, así como enfermedades neurológicas, metabólicas y cardiovasculares e incluso el cáncer. MILLIPLEX® MAP ofrece la selección más amplia de analitos en una amplia gama de estados mórbidos y especies. Una vez identificados los analitos de interés, puede confiar en la calidad que incorporamos en cada kit para obtener resultados fiables. Además de las características del ensayo enumeradas en el protocolo, otros criterios de rendimiento evaluados durante el proceso de verificación son: reactividad cruzada, linealidad de dilución, estabilidad del kit y comportamiento de la muestra (por ejemplo, detectabilidad y estabilidad). Cada panel y kit MILLIPLEX® MAP consta de:Controles de calidad (QC) para calificar el rendimiento del ensayoComparación de lotes patrón (calibrador) y de control de calidad con un lote de referencia para garantizar la uniformidad entre lotesMatriz sérica optimizada para imitar el entorno de analitos nativos en muestras de suero y plasmaCócteles de detección de anticuerpos diseñados para producir perfiles de analitos uniformes en el panelAdemás, cada panel y kit cumple estrictos criterios de fabricación para garantizar la reproducibilidad entre lotes. Por tanto, el panel A de citocina/quimiocina/factor de crecimiento humanos MILLIPLEX® MAP le permite centrarse en el potencial terapéutico de las citocinas y la modulación de la expresión de las mismas. Junto con la plataforma Luminex® xMAP en un formato de microesferas magnéticas, obtendrá la ventaja de una velocidad y una sensibilidad ideales, lo que permite la detección cuantitativa múltiple simultánea de docenas de analitos, lo que a su vez puede mejorar de manera considerable la productividad.
Aplicación
El panel múltiple basado en microesferas panel A de citocina/quimiocina/factor de crecimiento humanos, que utiliza la tecnología Luminex® xMAP, permite el análisis simultáneo de 48 biomarcadores múltiples citocinas, quimiocinas y factores de crecimiento en muestras de suero, plasma y cultivos celulares humanos.Se trata de un ensayo que incubación durante la noche o durante dos horas.Este ensayo requiere 25 μl de plasma o suero limpio (dilución 1:100 para RANTES) o 25 μl de sobrenadante de cultivo celular por pocillo.Este kit puede utilizarse para el análisis de todos los analitos del Panel A de citocina/quimiocina/factor de crecimiento humano en lisado de células o tejidos humanos y muestras de sobrenadante de cultivo, así como muestras de suero o plasma.La quimiocina CL5 (RANTES) no puede combinarse con otras citocinas en este panel debido a la dilución 1:100 requerida de las muestras de plasma/suero.Este panel premezclado incluye una microesfera de RANTES, por lo que debe planificar sus muestras en consecuencia.Analitos disponibles:SCD40L; EGF; eotaxina; FGF-2; ligando Flt-3; fractalquina; G-CSF;GM-CSF;GROα;IFNα2;IFNγ;IL-1α;IL-1β;IL-1ra;IL-2;IL-3;IL-4;IL-5;IL-6;IL-7;IL-8;IL-9;IL-10;IL-12 (p40);IL-12 (p70);IL-13;IL-15;IL-17A;IL-17E/IL-25;IL-17F;IL-18;IL-22;IL-27;IP-10;MCP-1;MCP-3;M-CSF;MDC (CCL22);MIG;MIP-1α;MIP-1β;PDGF-AA;PDGF-AB/BB;RANTES;TGFα;TNFα;TNFβ;VEGF-A
Características y beneficios
Configuración: Premezclado
Envase
Placa de 96 pocillos
Nota de preparación
El almacenamiento recomendado para los componentes del kit es de 2 a 8°C.
Información legal
Luminex is a registered trademark of Luminex Corp
MILLIPLEX is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
xMAP is a registered trademark of Luminex Corp
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Palabra de señalización
Danger
Frases de peligro
Consejos de prudencia
Clasificaciones de peligro
Acute Tox. 4 Dermal - Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 2 - Eye Dam. 1 - Skin Sens. 1 - STOT RE 2
Órganos de actuación
Respiratory Tract
Código de clase de almacenamiento
10 - Combustible liquids
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Are there any recommended protocols for preparing brain tissue to be used with the Milliplex Cytokine kits?
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