用于分化和检测大肠杆菌和其他大肠菌群的选择性生长培养基

Jvo Siegrist

Analytix,第8卷 第4篇

ivo.siegrist@sial.com

大肠杆菌和其他大肠菌群是食品、职业与环境安全等分析生物学最重要领域中病原体存在的重要指示生物。

大肠杆菌:粪便污染的指示生物

大肠菌群是动物肠道菌群的正常组成,呈杆状,革兰氏阴性,非孢子形成的兼性厌氧菌。它们在35–37 °C下孵育时会发酵乳糖并产生酸和气体。虽然常见于湖泊、河流、游泳池和便源土壤,但大多数情况下大肠菌群并不会引起疾病。不过它们被用作粪便来源的其他致病生物的指示物。大肠菌群最常见的菌属是柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、埃希氏菌属、克雷伯氏菌属和沙雷氏菌属。

大肠杆菌(图1)是最著名的大肠菌群,也是粪便污染的重要指标,因为它几乎仅发现于粪便中。偶然暴发的食物中毒与某些引起胃肠炎的大肠杆菌菌株有关,例如血清型O157:H7。大肠杆菌是杆状细菌,与大多数其他大肠菌群的区别在于它们在44 °C下发酵乳糖的能力,以及它们在某些培养基上的生长特性。大肠杆菌易于培养,常用于分子生物学。

埃希氏菌属

图 1.大肠杆菌

大肠杆菌的选择性生长培养基

微生物培养基不仅用于培养微生物,而且,基于其生物化学的某些独特性或与众不同的方面,还被用于选择或鉴定特定类型的微生物。大多数这种所谓的“选择性生长”培养基含有蛋白质来源,通常是酪蛋白的水解物、以及可发酵的糖(如乳糖或葡萄糖)。有时候可通过添加指示剂(例如中性红或溴甲酚紫)来检测发酵过程产生的酸。

我们所提供的新一代选择性培养基使用生色和荧光底物(图2)。这些培养基以β-D-葡糖醛酸酶(GUD)的存在指示大肠杆菌,以β-D-半乳糖苷酶的存在指示其他大肠菌群。GUD催化β-D-吡喃葡糖醛酸水解,生成相应的糖苷配基和D-葡糖醛酸。GUD存在于94-96%的大肠杆菌菌株中,但也存在于一些沙门氏菌、志贺氏菌耶尔森氏菌属中。(1-3)有范围广泛的培养基可供选用,它们使用各种底物来检测大肠杆菌和大肠菌群(表1)。培养基还配用多种补剂(例如胆汁盐、亮绿、十二烷基硫酸钠和其他物质)来增强其选择性。

用于分化的HiCrome™ M-TEC琼脂

图 2.HiCrome™M-TEC琼脂,用于通过膜过滤技术分化和计数水中的耐热大肠杆菌。大肠杆菌菌落呈蓝色,因为色原体X-葡糖苷酸被β-葡糖醛酸酶切割。

有关我们的生长和选择性培养基以及我们的其他微生物学产品和资源的完整目录,请访问我们的网站。

表1.用于检测、计数和鉴定大肠菌群和大肠杆菌的专用培养基

用于鉴定的非选择性培养基
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用于分化的选择性培养基
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用于分化的选择性培养基
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选择性培养基
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材料
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参考文献

1.
Frampton E, Restaino L. 1993. Methods for Escherichia coli identification in food, water and clinical samples based on beta-glucuronidase detection. 74(3):223-233. http://dx.doi.org/10.1111/j.1365-2672.1993.tb03019.x
2.
Hartman P. 1989. The MUG glucuronidase test for E. coli in food and water.. Brescia, Italy: Brixia Academic Press.
3.
Manafi M. 1996. Fluorogenic and chromogenic enzyme substrates in culture media and identification tests. International Journal of Food Microbiology. 31(1-3):45-58. http://dx.doi.org/10.1016/0168-1605(96)00963-4