Wektory ekspresyjne FLAG® dla bakterii i ssaków
- FLAG® Mapy wektorów ekspresji tagów i 3xFLAG® Peptydy
- FLAG® i 3xFLAG® Sekwencja DNA znacznika epitopowego i sekwencja aminokwasowa peptydu
- FLAG® i 3x FLAG® Produkty wektorów ekspresyjnych dla bakterii i ssaków
- FLAG® i 3xFLAG®: Sprawdzony system wykrywania i oczyszczania białek
- Wysoko specyficzne przeciwciała do FLAG® i 3xFLAG®. epitopów
- SnapFast™ FLAG® i 3xFLAG® Wykres porównawczy produktów Vector Legacy
FLAG® Tag Expression Vector Maps and 3xFLAG®&Peptydy
Bakteryjne i ssacze wektory ekspresyjne lub konstrukty ekspresyjne są kolistymi plazmidami transfekcyjnymi DNA, które są powszechnie stosowane do nadekspresji rekombinowanych białek będących przedmiotem zainteresowania. Unikalne sekwencje zakodowane w konstrukcie wektora zawierają elementy promotorowe, które są rozpoznawane przez własną maszynerię syntezy białek transfekowanych komórek w celu napędzania ekspresji włączonej sekwencji białka.
System ekspresji FLAG® jest uznanym sposobem ekspresji, oczyszczania i wykrywania rekombinowanych białek fuzyjnych. Odczynniki FLAG® i 3xFLAG® okazały się przydatne w wielu zastosowaniach, takich jak Western blotting, immunocytochemia, immunoprecypitacja, cytometria przepływowa, oczyszczanie białek, badanie interakcji białko-białko, ultrastruktura komórek i lokalizacja białek. Te małe hydrofilowe znaczniki ułatwiają wykrywanie i oczyszczanie rekombinowanych białek fuzyjnych przy użyciu naszych wysoce specyficznych i czułych przeciwciał ANTI-FLAG® .
FLAG® i 3xFLAG® Sekwencja DNA znacznika epitopowego i sekwencja aminokwasowa peptydu
System ekspresji FLAG® wykorzystuje krótki, hydrofilowy 8-aminokwasowy peptyd, który jest połączony z rekombinowanym białkiem będącym przedmiotem zainteresowania. Ze względu na swój hydrofilowy charakter, peptyd FLAG® prawdopodobnie znajduje się na powierzchni białka fuzyjnego. W rezultacie peptyd FLAG® jest łatwo dostępny do rozszczepienia przez enterokinazę (Ek) i do wykrywania za pomocą przeciwciał. Ponadto, ze względu na niewielki rozmiar znacznika peptydowego FLAG® nie jest prawdopodobne, aby przesłaniał on inne epitopy, domeny lub zmieniał funkcję, wydzielanie lub transport białka fuzyjnego.
System 3xFLAG® jest ulepszeniem oryginalnego systemu poprzez połączenie 3 tandemowych epitopów FLAG® (22 aminokwasy). Wykrywanie białek fuzyjnych zawierających 3xFLAG® jest wzmocnione do 200 razy bardziej niż jakikolwiek inny system. Podobnie jak oryginalny znacznik FLAG® 3xFLAG® jest hydrofilowy, zawiera miejsce rozszczepienia Ek i jest stosunkowo mały. Dlatego ryzyko zmiany funkcji białka, blokowania innych epitopów lub zmniejszenia rozpuszczalności jest zminimalizowane.
Sekwencje aminokwasowe FLAG® i 3xFLAG®
Usuwanie N-końcowych znaczników FLAG®(8 aminokwasów) i 3xFLAG® (22 aminokwasy) jest możliwe przy użyciu enterokinazy, która rozszczepia sekwencję aminokwasową Asp-Asp-Asp-Asp-Lys na c-końcowym końcu znaczników.
FLAG®i 3x FLAG® Produkty wektorów ekspresyjnych dla bakterii i ssaków
Klasyczne wektory ekspresyjne FLAG® i 3xFLAG® zostały przekształcone w wektory ekspresyjne SnapFast™ - łącząc dwa wysoce funkcjonalne systemy w jednym produkcie. Dodatkowe informacje na temat systemu SnapFast™ obejmują Tło & Popularne wektory, Wykresy wyboru i SnapFast™ FAQ.
Wektory FLAG® i 3xFLAG® są dostępne do ekspresji bakteryjnej i u ssaków, przy użyciu promotorów T7, Tac lub CMV. Wektory posiadają miejsce rozszczepienia enterokinazy w celu usunięcia znacznika z oczyszczonego białka. Wraz z c-myc, niektóre wektory oferują podwójne znakowanie. Aby uzyskać więcej informacji, w tym mapy wektorów, zapoznaj się z poniższymi wykresami i kliknij łącza do stron produktów.
| Nr produktu | FLAG® tag | 3X FLAG® tag | C-myc tag | EKT cleavage tag | Znacznik wydzielania PPT | Marker selekcji ampicyliny (bakteryjny) | Marker selekcji neomycyny (ssaki) | Promotor | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| N-końcowy | C-terminal | N-terminal | C-terminal | C-terminal | Konstytutywny | CMV | |||||||
| OGS618 | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ||||||||
| OGS619 | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ||||||||
| OGS620 | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ||||||||
| OGS621 | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | |||||||
| OGS622 | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ||||||
| OGS623 | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | |||||||
| OGS624 | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ||||||
| OGS625 | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | |||||||
| OGS626 | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ||||||
| OGS627 | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | |||||||
| OGS628 | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ||||||
| OGS629 | . | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ||||||
| OGS630 | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | |||||
| OGS631 | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ||||||
FLAG® and 3xFLAG®: Sprawdzony system wykrywania i oczyszczania białek
Niski poziom ekspresji rekombinowanych białek w komórkach ssaków jest powszechnym problemem, który często utrudnia lub uniemożliwia wykrywanie znaczników epitopowych. Wykrywanie 3x FLAG® przy użyciu ANTI-FLAG® M2 Ab i anty-mouse-HRP jest 20-200 razy bardziej czułe niż jakikolwiek powszechnie stosowany znacznik. Szeroki wybór wektorów p3xFLAG® wykorzystuje silny promotor CMV do napędzania ekspresji.
Western blot oczyszczonej 3xFLAG® bakteryjnej fosfatazy alkalicznej i FLAG® bakteryjnej fosfatazy alkalicznej przeniesionej na membranę nitrocelulozową. Detekcję przeprowadzono przy użyciu przeciwciała monoklonalnego ANTI-FLAG® M2 jako przeciwciała pierwszorzędowego, przeciwciała drugorzędowego anty-mysiego-HRP i substratu chemiluminescencyjnego ECL™.
C-końcowe fuzje GST i znaczników wymienionych powyżej zostały przygotowane i przeanalizowane na Western Blots. Wszystkie białka zostały wykryte przy użyciu odpowiednich przeciwciał znakujących, anty-mysich HRP i ECL.
Wysoko specyficzne przeciwciała przeciwko FLAG® i 3xFLAG® epitopów
Przeciwciała FLAG® i 3xFLAG® zawierają miejsca wiązania dla kilku wysoce specyficznych przeciwciał monoklonalnych (M1, M2, M5) i poliklonalnych oraz koniugatów, z których każde ma inną charakterystykę rozpoznawania i wiązania. Przeciwciała ANTI-FLAG® wykazują niewielką lub żadną reaktywność krzyżową w większości lizatów komórek ssaków i bakterii. Formaty jednoetapowego oczyszczania obejmują żele powinowactwa i płytki 96-dołkowe.
SnapFast™ FLAG®< i 3xFLAG® Tabela porównawcza produktów Vector Legacy
Uwaga: Jeśli w przeszłości korzystałeś z wektora FLAG® vector, ta tabela pomoże Ci wybrać najbliższy wektor SnapFast™ FLAG® i 3xFLAG® vector.
| SnapFast™ FLAG® lub 3xFLAG® Nr produktu Vector. | Legacy FLAG® Nr produktu wektorowego. |
|---|---|
| OGS618. | E6783 |
| OGS619 | E6908 |
| OGS620 | E7033 |
| OGS621 | E7158 |
| OGS622 | E7283 |
| OGS623 | E9283 |
| OGS626 | E7658 oraz E9783 |
| OGS627 | E7408 oraz E7533 |
| OGS628 | E7783 oraz E9908 |
| OGS629 | E7908 |
| OGS630 | E9158 oraz E9408 |
| OGS631 | E9283 |
| OGS632 | E8083 |
| OGS633 | E8158 |
| OGS634 | E8408 |
| OGS635 | E8283 |
| OGS636 | P1118 |
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?Dla wygody naszych klientów ta strona została przetłumaczona maszynowo. Dołożyliśmy starań, aby zapewnić dokładne tłumaczenie maszynowe. Tłumaczenie maszynowe nie jest jednak doskonałe. Jeśli tłumaczenie maszynowe nie spełnia Twoich oczekiwań, przejdź do wersji w języku angielskim.