06-735

Anti-Caspase 3-Antikörper

Upstate^®, from rabbit

• Synonym(e): Anti-CASP-3, Anti-Caspase-3
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: polyclonal
• Application: IHC, WB
• Citations: 27

Eigenschaften

• biological source: rabbit
• Quality Segment: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: polyclonal
• species reactivity: mouse, human, rat
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): immunohistochemistry: suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG
• NCBI accession no.: NM_032991
• UniProt accession no.: P42574
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... CASP3(836)

Beschreibung

General description

32 kDa

Caspase-3 (UniProt: P42574; auch bekannt als EC:3.4.22.56, CASP-3, Apopain, Cysteinprotease CPP32, CPP-32, Protein Yama, SREBP cleavage activity 1, SCA-1) wird beim Menschen vom CASP3-Gen (auch bekannt als CPP32, Gen-ID: 836) kodiert. Cystein-Aspartat-Proteasen oder Caspasen spielen wesentliche Rollen bei Apoptose, Nekrose und Entzündung. In der Vergangenheit wurden Caspasen gemäß der Reihenfolge nummeriert, in der sie identifiziert wurden. Caspase-3 ist ein heterotetrameres Enzym, das aus zwei anti-parallel angeordneten Heterodimeren besteht, von denen jedes durch eine 17-kDa- (p17) und eine 12-kDa-Untereinheit (p12) gebildet wird. Caspase-3 wird anfänglich mit einer Propeptidsequenz (A.S. 1–9) erzeugt, deren Entfernen zum Caspase-3-Proenzym mit 268 Aminosäuren führt. Nach der Aktivierung wird das Proenzym zuerst zwischen Asp175 und Ser176 proteolytisch gespaltet, um ein p20-Fragment (A.S. 10–175) und die p12-Untereinheit (A.S. 176–277) zu erzeugen. Eine weitere Spaltung des p20-Fragments zwischen Asp28 und Ser29 erzeugt die p17-Untereinheit (A.S. 29–175). Die Untereinheiten p17 und p12 dimerisieren und bilden das aktive Caspase-3-Enzym. Caspase-3 hat eine strikte Anforderung an einen Asp-Rest an Positionen P1 und P4. Sie hat eine bevorzugte Spaltungssequenz von Asp-Xaa-Xaa-Asp-|- mit einem hydrophoben Aminosäurerest an P2 und einem hydrophilen Aminosäurerest an P3, obwohl auch Val oder Ala an dieser Position akzeptabel sind. Caspase-3 ist an der Aktivierung der Kaskade von Caspasen, die für die Ausführung der Apoptose verantwortlich ist, beteiligt. Beim Auftreten der Apoptose spaltet sie Poly(ADP-Ribose)-Polymerase (PARP) an der Asp216-|-Gly217-Bindung proteolytisch. Caspase-3 vermittelt die proteolytische Aktivierung von Caspase-6 und Caspase-7, während Caspase-3 durch Caspase-8, Caspase-9 oder Caspase-10 verarbeitet und aktiviert wird.

Immunogen

Humanes Caspase-3-Fusionsprotein von voller Länge mit einem Histidin-6-Tag

Application

Dieser Anti-Caspase-3-Antikörper ist zur Verwendung in der Immunhistochemie und in Western Blot für den Nachweis von Caspase-3 validiert.

Western-Blot-Analyse: 1 μg/ml dieses Antikörpers wies Caspase-3 in A431-Zelllysat nach.

Immunhistochemische (Paraffin) Analyse: Eine 1:250-Verdünnung dieses Antikörpers wie Caspase-3 in Gewebeschnitten der humanen Tonsillen nach.

Biochem/physiol Actions

Erkennt Caspase-3 (Yama/Apopain) von voller Länge und proteolytische Fragmente.

Physical form

Format: Aufgereinigt

Mit Protein A aufgereinigtes IgG in 0,1 mol/l Tris-Glycin, pH-Wert 7,4, 0,15 mol/l NaCl und 0,05 % Natriumazid.

Preparation Note

Bei 2–8 °C ab Versanddatum 2 Jahre haltbar. Für maximale Produktrückgewinnung das Originalfläschchen vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren.

Analysis Note

Kontrolle
Positive Antigenkontrolle: Best.-Nr. 12-301, nichtstimuliertes A431-Zelllysat. Fügen Sie 2,5 µl von 2-Mercaptoethanol/100 µl des Lysats hinzu und kochen Sie es 5 Minuten lang, um die Vorbereitung zu reduzieren. Laden Sie 20 µg reduziertes Lysat pro Spur für Minigele.

Regelmäßig mittels Immunblot an RIPA-Lysaten von nichtstimulierten humanen A431-Zellen, Maus-3T3/A31- oder Ratten-PC12-Zellen beurteilt.

Other Notes

Ersetzt: 04-1090; 04-439

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 10 - Combustible liquids
• Was ist los?: WGK 1