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Über diesen Artikel
NACRES:
NA.43
UNSPSC Code:
12352203
Clone:
-
Species reactivity:
-
Application:
—
Citations:
38
antibody form
purified antibody
Quality Segment
antibody product type
primary antibodies
manufacturer/tradename
Novagen®
storage condition
OK to freeze, avoid repeated freeze/thaw cycles
shipped in
wet ice
storage temp.
−20°C
target post-translational modification
unmodified
General description
Die Rekombinase cre (UniProt: P06956; auch bekannt als Cre) wird durch das Cre-Gen (Gen-ID: 2777477) im Escherichia-Phagen P1 (Bakteriophage P1) kodiert. Cre (abgeleitet von der englischen Bezeichnung „Causes recombination“ [verursacht Rekombination] bzw. „Cyclization recombinase“ [Zyklisierungsrekombinase]) ist eine 38-kDa-DNA-Rekombinase aus der ′Phagen′-Integrase-Familie, die aus dem Bakteriophagen P1 gewonnen wird. Sie katalysiert die stellenspezifische Rekombination und ist hochspezifisch für ein 34-bp-DNA-Sequenzmotiv namens loxP (locus of X-over P1), das sich in der P1-DNA befindet. Die loxP-Stelle besteht aus einer variablen asymmetrischen 8-bp-Sequenz zwischen zwei Sätzen von palindromischen 13-bp-Sequenzen (ATAACTTCGTATA-NNNTANNN-TATACGAAGTTAT). Zwei Cre-Rekombinase-Proteine, die jeweils an einer der beiden palindromischen 13-bp-Sequenzen an eine loxP-Stelle binden, bilden ein Dimer. Dieses Dimer bindet dann an ein zweites Dimer an einer anderen loxP-Stelle und bildet ein Tetramer. Die beiden durch das Tetramer verbundenen Stellen sind parallel ausgerichtet und die doppelsträngige DNA wird an beiden loxP-Stellen geschnitten. Anschließend werden die Stränge mittels DNA-Ligase wieder zusammengefügt. Da das Cre-Gen und die loxP-Stellen bei den meisten Spezies nicht vorkommen, werden sie häufig in Zielzellen oder -gewebe eingebracht und als Mittel zur präzisen Kontrolle der Genexpression sowohl in vitro in kultivierten Zellen als auch in vivo in Tieren eingesetzt.
Spezifischer, empfindlicher Nachweis von Cre-Rekombinase in Zellen und Zelllysaten
Wird als aufgereinigter polyklonaler Kaninchen-Antikörper in Puffer mit 0,1 M Tris-Glycin, 0,15 M NaCl, pH 7,4 mit 0,05 % Natriumazid und 50 % Glycerin geliefert.
Wird mittels Western-Blotting mit rekombinantem Cre-His ausgewertet.
Western-Blot-Analyse: repräsentative Chargendaten. Rekombinantes Cre-His wurde in einer Konzentration von 20 ng/Spur (Spur 1) und 10 ng/Spur (Spur 2) mit Best.-Nr. 69050-3, Anti-Cre (Verdünnung von 1 : 10.000) untersucht. Die Proteine wurden mit einem HRP-konjugierten Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper (Esel) und einem Chemilumineszenz-Detektionssystem sichtbar gemacht. Der Pfeil kennzeichnet Cre (~39 kDa).
Wird mittels Western-Blotting mit rekombinantem Cre-His ausgewertet.
Western-Blot-Analyse: repräsentative Chargendaten. Rekombinantes Cre-His wurde in einer Konzentration von 20 ng/Spur (Spur 1) und 10 ng/Spur (Spur 2) mit Best.-Nr. 69050-3, Anti-Cre (Verdünnung von 1 : 10.000) untersucht. Die Proteine wurden mit einem HRP-konjugierten Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper (Esel) und einem Chemilumineszenz-Detektionssystem sichtbar gemacht. Der Pfeil kennzeichnet Cre (~39 kDa).
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NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
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