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69182

DNase I, RNase-frei

For applications in which maintenance of RNA integrity is critical

Synonym(e):

RNase-freie DNase I

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NACRES:
NA.85
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liquid

manufacturer/tradename

Novagen®

storage condition

OK to freeze, avoid repeated freeze/thaw cycles

technique(s)

DNA extraction: suitable

input

general use sample(s)

suitability

suitable for nucleic acid purification

application(s)

diagnostic assay manufacturing

shipped in

wet ice

storage temp.

−20°C

General description

RNase-freie DNase I verdaut entweder einzel- oder doppelsträngige DNA, wobei eine Mischung aus Mono- und Oligonukleotiden entsteht. Dieses Präparat wurde so aufgereinigt, dass es frei von RNase ist, und eignet sich daher für Anwendungen, bei denen die Erhaltung der Integrität der RNA von entscheidender Bedeutung ist. Das Enzym baut in Gegenwart von RNA selektiv DNA ab und kann zur Entfernung von DNA-Templates nach In-vitro-Transkriptionsreaktionen verwendet werden. Dieses Enzym ist auch für andere Anwendungen wie DNase-Footprinting und Nick-Translation nützlich.

Other Notes

Eine Einheit baut 1 μg DNA in 10 Minuten bei 37 °C ab. Die Reaktionsmischung (50 µl) enthält 80 mM HEPES, pH 7,5, 10 mM NaCl, 5 mM MgCl₂, 10 mM DTT, 1 µg Plasmid-DNA und Enzym.

Legal Information

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Toxizität: Standard-Handhabung (A)

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For applications in which maintenance of RNA integrity is critical

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Novagen®

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Novagen′s PhosphoSafe Extraction Buffer efficiently extracts cytosolic proteins from mammalian and insect cells while preserving their phosphorylation state.

technique(s)

DNA extraction: suitable

technique(s)

-

technique(s)

-

technique(s)

immunoblotting: suitable

form

liquid

form

liquid

form

liquid

form

liquid

suitability

suitable for nucleic acid purification

suitability

-

suitability

-

suitability

-

application(s)

diagnostic assay manufacturing

application(s)

-

application(s)

-

application(s)

sample preparation

storage temp.

−20°C

storage temp.

−20°C

storage temp.

−20°C

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−70°C

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avoid repeated freeze/thaw cycles, OK to freeze

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OK to freeze

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OK to freeze, avoid repeated freeze/thaw cycles

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Questions

1–2 of 2 Questions  
  1. What is the concentration of this product in µg/mL?

    1 answer
    1. This product is prepared at a concentration of 1 U/ul. A milligram concentration is not available. This RNase I solution also contains 10mM Hepes, pH 7.6, 10mM MgCl2, 10mM CaCl2, and 50% glycerol

      Helpful?

  2. Does DNase 1 (SKU 69182 and others) effectively work on circular DNA?

    1 answer
    1. I came across a research article on ResearchGate that discusses DNase I and its effects on plasmid DNA. The article provides the following insights:

      1) DNase I can degrade plasmid DNA, and its activity depends on the ionic strength of the reaction buffer. The enzyme exhibits optimal activity in a buffer containing Mg2+ and Ca2+. Micromolar levels of Ca2+ act as an enzyme activator in the presence of Mg2+. It is also mentioned that sample buffer interference (TE buffer), which chelates Ca2 and Mg2, might have affected the DNase treatment on pure plasmid.

      2) The suggestion is to use a buffer containing Mg2+ and Ca2+, increase the concentration of DNase I, and incubate at 37°C for 10 minutes.

      3) For circular DNA, the article recommends denaturing the circular DNA first, as DNase I degrades DNA by making random single-strand nicks in the phosphate backbone. When the DNA is circular, the fragments are likely to remain coiled together. To linearize the plasmid, two nicks should overlap, which is a rare event. The article suggests using denaturing agents such as urea to facilitate the unfolding of the plasmid or linearizing the plasmid with a specific primer before the DNase I treatment. It also questions the need to digest the plasmid to remove RNA, suggesting the use of an RNA-specific RNAse such as RNAse A.

      Helpful?

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