AB5010

Anti-Glutathion-Antikörper, weist GSH und GSSG nach

Chemicon^®, from rabbit

• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: polyclonal
• Species reactivity: eukaryotes
• Application: IHC
• Citations: 13

Eigenschaften

• biological source: rabbit
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: polyclonal
• species reactivity: eukaryotes
• manufacturer/tradename: Chemicon^®
• technique(s): immunohistochemistry: suitable
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... GSS(2937)

Beschreibung

Immunogen

Epitop: weist GSH und GSSG nach

Glutathion-Glutaraldehyd

Application

Dieser Anti-Glutathion-Antikörper ist zur Verwendung in IH für den Nachweis von Glutathion validiert und detektiert sowohl GSH als auch GSSG.

Forschungskategorie
Neurowissenschaft

Forschungsunterkategorie
Oxidativer Stress

Immunhistochemie unter Verwendung von Silber-intensiviertem Immungold oder verstärkten Fluoreszenzmethoden. Bei Verwendung von glutaraldehydhaltigen Fixiermitteln ist typischerweise eine Behandlung mit autofluoreszenten Reducern erforderlich. Für optimale Detektion sollten die Proben mit 0,2–2,5 % Glutaraldehyd fixiert werden. Siehe technische Hinweise. Dieser Antikörper wurde auch erfolgreich mit einer Fixierung verwendet, die kein/kaum Glutaraldehyd und einen hohen Paraformaldehyd-Gehalt aufwies (Fixierungsmittel mit 4 % Paraformaldehyd in 0,1 M Phosphatpuffer / 3 % Sucrose). Die Mindestkonzentration von Glutaraldehyd für AB5010 beträgt 0,02 %. Die Leistung mit gefrorenen Schnitten, Vibratom-Schnitten und Gewebekulturformaten ist gut, wenn penetrierende Reagenzien wie 0,3 % Triton X-100 verwendet werden. (Nur in Blockierungspuffer, Antikörper-Verdünnungspuffer sollte nur in einfacher TBS oder PBS genutzt werden.)

Western Blotting (Mawatari und Murakami, 2004).

Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Endanwender bestimmt werden.

Hinweis: Glutathion ist nicht Osmium-tolerant und sollte daher nicht für die Elektronenmikroskop-Immunhistochemie nach dem Einbetten verwendet werden.



Alle Verfahren können bei Raumtemperatur durchgeführt werden. Auch wenn es nicht möglich ist, die exakten Verdünnungen für alle Anwendungen anzugeben, werden wahrscheinlich keine Abweichungen von der kalibrierten Konzentration erforderlich sein. Die 100-fache Verdünnung ist kalibriert, um den Nachweis des Antigen-Gehalts über einen Bereich von 2-log-Einheiten zu optimieren. Stärkere oder schwächere Verdünnungen können genutzt werden, wenn ungewöhnlich hohe (> 20 mM) oder geringe (< 0,2 mM) intrazelluläre Hapten-Konzentrationen vermutet werden oder neuartige Probenbedingungen vorliegen, etwa ein geringer Glutaraldehyd-Gehalt oder ungewöhnliche Einbettungsprotokolle. Stärkere Verdünnungen haben wahrscheinlich eine verringerte maximale Signalstärke zur Folge, während konzentriertere Lösungen den dynamischen Nachweisbereich komprimieren.



TECHNISCHE HINWEISE

Der Antikörper AB5010 ist optimiert für die Verwendung mit der Immungold- oder Fluoreszenz-Methode. Eine Visualisierung mit Enzyme-Linked-Methoden kann angewendet werden, dabei wird jedoch typischerweise der Nachweisbereich komprimiert. Bei Anwendung von Methoden mit hoher Verstärkung wie etwa Tyramiden muss der Anwender unabhängige Kalibrierungen durchführen. Die Verwendung mit gefrorenen Schnitten ist möglich, wird aber keine optimalen Bilder ergeben, da IgGs das mit Aldehyd quervernetzte Gewebe nur schlecht durchdringen und die meisten Aminosäuren in so großen Mengen vorliegen, dass ein Prozoneneffekt auftritt. Die Verwendung von voll aufgebrachten oder Vibratom-Schnitten wird aus ähnlichen Gründen nicht empfohlen.

Biochem/physiol Actions

Glutathion. Der Antikörper wurde gegen ein Spektrum von Antigenen kalibriert, um die Hapten-Spezifität und die korrekte Affinität sicherzustellen. Keine messbare Kreuzreaktivität mit Glutaraldehyd-fixiertem Gewebe (<1:1.000) gegen L-Alanin, G-Aminobutyrat, 1-Amino-4-guanidobutan (AGB), D/L-Arganin, D/L-Aspartat, L-Citrullin, L-Cystein, D/L-Glutamat, D/L-Glutamin, Glycin, L-Lysin, L-Ornithin, L-Serin, Taurin, L-Threonin, L-Tryptophan und L-Tyrosin. Unterscheidet nicht zwischen freiem GSH und GSSG.

Packaging

ausreichend für 2.000 Assays

Physical form

Format: Aufgereinigt

IgG-Fraktion in sterilem 0,1 M Phosphatpuffer. Frei von Konservierungsmitteln.

Preparation Note

Stammlösung bei 2–8 °C in unverdünnten Aliquoten bis zu 6 Monate haltbar. Diese Stammlösung ist bei normaler Anwendung und routinemäßiger Aufbewahrung bei 2–8 °C äußerst stabil. Diese Stammlösung nicht wieder einfrieren.

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.