MAC133

Anti-Cas9-Antikörper, Klon 7A9

clone 7A9, from mouse

• Synonym(e): dCas9
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: 7A9, monoclonal
• Technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• Application: ICC, IP, WB
• Citations: 28

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 7A9, monoclonal
• species reactivity (predicted by homology): all
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG1κ
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified

Beschreibung

General description

Cas9 ist eine essenzielle Endonuklease im Serotyp M1 von Streptococcus pyogenes, der Teil des angeborenen Immunsystems dieses Organismus ist. CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeat) ist ein adaptives Immunsystem, das Schutz vor mobilen genetischen Elementen (Viren, Transposonen und konjugativen Plasmiden) bietet. CRISPR-Cluster enthalten Spacer, mit früheren mobilen Elementen komplementäre Sequenzen, und sind gegen eindringende Nukleinsäuren gerichtet. CRISPR-Cluster werden zu CRISPR-RNA (crRNA) transkribiert und verarbeitet. In CRISPR-Systemen vom Typ II werden für die richtige Verarbeitung von prä-crRNA transkodierte kleine RNA (tracrRNA), endogene Ribonuklease 3 (rnc) und Cas9 benötigt. Anschließend wird das lineare oder zirkuläre dsDNA-Ziel von Cas9/crRNA/tracrRNA endonukleolytisch komplementär zum Spacer gespaltet. Der nicht zur crRNA komplementäre Zielstrang wird zunächst endonukleolytisch abgetrennt und dann mittels 3′-5′ exonukleolytisch gekürzt. Für die DNA-Bindung werden das Protein und beide RNA-Spezies benötigt. Cas9 erkennt vermutlich ein kurzes Motiv in den CRISPR-Wiederholungssequenzen (das PAM bzw. Protospacer Adjacent Motif), um die Eigen-Fremd-Unterscheidung zu erleichtern. Forscher hoffen, die Programmierbarkeit und Präzision der Cas9-Spaltung für effektivere rekombinante DNA-Technologien ausnutzen zu können.

~160 kDa gemessen

Immunogen

N-terminale Domäne von Cas9.

Application

Der Anti-Cas9-Antikörper, Klon 7A9|MAC133, ist ein Antikörper gegen Cas9 zur Verwendung in Western-Blots, Immunpräzipitation und Immunzytochemie.

Forschungskategorie
Sekundär- und Kontrollantikörper

Forschungsunterkategorie
Sekundäre Antikörper, adsorbiert für doppelte Markierung

Western-Blot-Analyse: Mit 0,5 µg/ml aus einer repräsentativen Charge wurde Cas9 in 1 µg Myc-Cas9-exprimierendem HEK293-Zelllysat nachgewiesen.
Immunpräzipitationsanalyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde Cas9 aus Flag-Cas9- und Myc-Cas9-exprimierendem Zelllysat ausgefällt (von einem unabhängigen Labor durchgeführt).

Biochem/physiol Actions

MAC133 erkennt sowohl Cas9 als auch dCas9 (Nuklease-defizientes Cas9)

Physical form

Aufgereinigtes monoklonales Maus-IgG1κ in Puffer mit 0,1 M Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mM NaCl mit 0,05 % Natriumazid.

Format: Aufgereinigt

Über Protein G aufgereinigt

Preparation Note

Bei 2–8 °C 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar.

Analysis Note

Beurteilt mittels Western-Blot in Flag-Cas9 exprimierendem HEK293-Zellllysat.

Western-Blot-Analyse: Mit 0,5 µg/ml dieses Antikörpers wurde Cas9 in 1 µg Flag-Cas9-exprimierendem HEK293-Zelllysat nachgewiesen.

Other Notes

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Disclaimer

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Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1