ROAPRO

Aprotinin

from bovine lung

• Synonym(e): Aprotinin, Pankreatischer Trypsin-Inhibitor, Trypsin-Inhibitor, pankreatisch (bpti), Trypsin-Kallikrein-Inhibitor
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• biological source: bovine lung
• form: lyophilized
• packaging: pkg of 10 mg (10236624001), pkg of 100 mg (11583794001), pkg of 50 mg (10981532001)
• manufacturer/tradename: Roche
• technique(s): electrophoresis: suitable, tissue culture: suitable
• pH range: 3-10
• solubility: water: soluble 10 mg/mL
• absorption: 0.84 at 280 nm
• shipped in: wet ice
• storage temp.: 2-8°C

Beschreibung

General description

Trypsin-Inhibitor, pankreatisch, aus der Rinderlunge. Es ist als pankreatischer Trypsin-Inhibitor (BPTI) bekannt. Aprotinin, auch bekannt als pankreatischer Trypsin-Inhibitor und Trypsin-Kallikrein-Inhibitor, wird in Lunge, Milz, Leber und Bauchspeicheldrüse exprimiert. Es kommt außerdem in freier Form in Kälberserum vor.[1][2]

Application

Aprotinin wird für den Schutz von Proteinen und Enzymen während der Isolation/Aufreinigung eingesetzt. Die Hemmung der Proteaseaktivität erhöht die Lebensdauer von Zellen in Zell- und Gewebekulturstudien.[3][4]

• Weitere Anwendungen: Aufreinigung von Urokinase, Trypsin und Chymotrypsin auf immobilisiertem Aprotinin
• Quantifizierung der Kallikreinaktivität in Mischungen aus Esterasen und Proteasen
• Kontrollierter Abbau von Substraten durch das Vermeiden von nichtspezifischer Proteolyse in klinisch-chemischen Tests
• Aprotinin ist ein Modellprotein für Proteinfaltungsstudien
• Molekülmassenmarker in SDS-Polyacrylamid-Gelelektrophorese

Biochem/physiol Actions

Aprotinin hemmt Serinproteasen. Es hemmt Kallikrein, die Protease, die blutdrucksenkende Peptide wie Kallidin und Bradykinin freisetzt (menschliches Plasmakallikrein: K_i = 3 ×10^-8 M bei pH-Wert 8,0, Schweinepankreaskallikrein: (K_i = 1 × 10^-9 M bei pH-Wert 8,0), Trypsin (K_i = 2,8 × 10^-11 M bei pH-Wert 7,8, K_i = 2,6 × 10^-9 M bei pH-Wert 4,0, nicht-kompetitiv), Trypsinogen, Chymotrypsin (K_i = 9 × 10^-9 M bei pH-Wert 8,0), bakterielles Fibrinolysin und Plasmin (K_i = 1 nM bei pH-Wert 7,3).
Cathepsin G, Akrosin, menschliche Leukozytenelastase und menschliche Uokinase werden schwach gehemmt. Faktor Xa, Thrombin, Subtilisin, Papain, Pepsin, Angiotensin-konvertierendes Enzym (ACE), Carboxypeptidase A und B, andere Metallproteasen und Thiolproteasen werden nicht gehemmt.

Preparation Note

Arbeitskonzentration: 0,06 bis 2 μg/ml (0,01–0,3 μM)
Arbeitslösung: Wasserlösliche (10 mg/ml) oder wässrige Pufferlösung (z. B. 0,1 M Tris, pH-Wert 8,0).
Hinweis: Um die Adsorption von Aprotinin auf negativ geladene Festphasen, z. B. Chromatographiegele, Ultrafiltrationsmembranen, zu vermeiden, sollte die NaCl-Konzentration oberhalb von 0,1 M liegen, oder es sollten während der Trennung andere geeignete Salze zu allen Puffern hinzugefügt werden.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C

Leicht wasserlösliche (10 mg/ml) oder wässrige Pufferlösung (z. B. Tris, 0,1 M, pH-Wert 8,0). Eine auf pH-Wert 7 bis 8 angepasste Lösung ist bei 2 bis 8 °C etwa 1 Woche haltbar.
Aliquoten, die bei -15 bis -25 °C gelagert werden, sind etwa 6 Monate lang stabil.
Hinweis: Wiederholtes Einfrieren und Auftauen sowie das Aussetzen gegenüber stark alkalischen Lösungen ist zu vermeiden (inaktiv bei pH-Wert > 12,8).

Other Notes

Eine Inhibitoreinheit (IU) ist als die Menge eines Aproteins definiert, welche 1 U Trypsin in < 10 Minuten bei einem pH-Wert von 6 vollständig hemmt.. (Trypsinaktivität bestimmt bei +25 °C, pH-Wert 8,0, BAEE als Substrat.)
Eine Inhibitoreinheit (IU) (+25 °C, BAEE als Substrat) entspricht etwa 2,8 Inhibitoreinheiten (+25 °C, Chromozym TRY als Substrat).
Eine Inhibitoreinheit (IU) (+25 °C, BAEE als Substrat) entspricht etwa 26 Kallikrein-Inhibitoreinheiten (KIU) (+25 °C).
Eine Inhibitoreinheit (IU) (+25 °C, BAEE als Substrat) entspricht etwa 0,067 Inhibitoreinheiten (+25 °C, Bz-D,L-Arg-4-Na als Substrat, Trypsinbestimmung bei pH-Wert 7,8).
Eine Kallikrein-Inhibtoreinheit = 0,17 μg kristallines Aprotinin.

Monomeres Peptid aus 58 Aminosäuren, das von drei Disulfidbindungen in Konformation gehalten wird.

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable