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Über diesen Artikel
NACRES:
NA.55
UNSPSC Code:
41106502
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Molecular Biology
usage
sufficient for 2,000 transfections (04476115001), sufficient for 400 transfections (04476093001)
packaging
pkg of 1 mL (04476093001 [1 mg/ml]), pkg of 5 × 1 mL (04476115001 [5 x 1 mg/ml])
manufacturer/tradename
Roche
concentration
1 mg/mL
technique(s)
transfection: suitable
shipped in
wet ice
storage temp.
2-8°C
General description
Small interfering RNA (siRNA) kann mittels Transfektion direkt in Zellen eingebracht werden. Ein lipidbasiertes Transfektionsreagens, z. B. X-tremeGENE siRNA-Transfektionsreagens, kann eine praktische, verlässliche und effiziente Trägersubstanz zum Transport von siRNA in tierische Zellen bereitstellen und ermöglicht dadurch die Untersuchung der zellulären und funktionellen Folgen eines Gen-Knockdowns.
Dieses innovative Reagens bildet einen Komplex mit siRNA sowie mit Mischungen von siRNA und Plasmid-DNA (Co-Transfektion), und transportiert die Nukleinsäuren effizient in tierische Zellen, um Gen-Silencing auszulösen. Die Transfektion wird in nur wenigen Schritten erreicht: Mischen und inkubieren Sie verdünntes Transfektionsreagens mit verdünnter siRNA und geben Sie diesen Komplex anschließen zu den Zellen. Da das X-tremeGENE siRNA-Transfektionsreagens in Gegenwart oder Abwesenheit von Serum besonders gut funktioniert und eine geringe Zytotoxizität aufweist, kann es ohne Medienwechsel eingesetzt werden. Dieses Produkt ist frei von tierischen Komponenten.
Inhalt
Lösung durch eine Membran mit 0,2 μm Porengröße filtriert, in Polypropylenröhrchen bereitgestellt.
Dieses innovative Reagens bildet einen Komplex mit siRNA sowie mit Mischungen von siRNA und Plasmid-DNA (Co-Transfektion), und transportiert die Nukleinsäuren effizient in tierische Zellen, um Gen-Silencing auszulösen. Die Transfektion wird in nur wenigen Schritten erreicht: Mischen und inkubieren Sie verdünntes Transfektionsreagens mit verdünnter siRNA und geben Sie diesen Komplex anschließen zu den Zellen. Da das X-tremeGENE siRNA-Transfektionsreagens in Gegenwart oder Abwesenheit von Serum besonders gut funktioniert und eine geringe Zytotoxizität aufweist, kann es ohne Medienwechsel eingesetzt werden. Dieses Produkt ist frei von tierischen Komponenten.
Inhalt
Lösung durch eine Membran mit 0,2 μm Porengröße filtriert, in Polypropylenröhrchen bereitgestellt.
Application
X-tremeGENE siRNA-Transfektionsreagens transportiert small interfering RNA (siRNA) in viele häufig verwendete Zelltypen, einschließlich HeLa, NIH 3T3, HEK-293, CHO-K1 und COS-7 sowie in viele schwer zu transfizierende Zelllinien wie HT29, eine menschliche Adenokarzinom-Zelllinie.PMID 20359598
Features and Benefits
- Knockdown-Genexpression von mehr als 90 % in vielen verschiedenen Zelltypen.
- Maximieren Sie die Versuchsflexibilität mit einem einzelnen Reagens für siRNA- und Co-Transfektions-basierte Gen-Knockdown-Versuche.
- Erzeugen Sie aussagekräftige Ergebnisse mit einem Reagens, das eine geringe Zytotoxizität aufweist und gewährleisten Sie dadurch, dass die beobachteten zellulären Wirkungen aufgrund der transfizierten siRNA auftreten und nicht aufgrund des Transfektionsverfahrens.
- Arbeiten Sie mit oder ohne Serum. Vermeiden Sie vor oder nach der Transfektion Medienwechsel (z. B. zu serumfreiem Medium).
X-tremeGENE siRNA-Transfektionsreagens ist eine proprietäre Mischung aus Lipiden und anderen Komponenten, frei von tierischen Produkten.
Analysis Note
Aktivitätsassay: Das X-tremeGENE siRNA-Transfektionsreagens (1–2,5 μl) wird mit siRNA (0,1–0,35 μg), die spezifisch für das HPRT-Haushaltsgen ist, kombiniert. Die Mischung wird verwendet, um HEK-293-Zellen (in einer Monoschicht, 30–50 % konfluent) in Gegenwart von 10 % fötalem Rinderserum (FBS) zu transfizieren. Nach der Transfektion wird die Verringerung der HPRT-mRNA-Zellen mit dem LightCycler® Echtzeit-PCR-System bestimmt. Wenn mRNA gemessen wird, wird in der Regel eine Knockdown-Effizienz von 70 bis 95 % gemessen.
Zytotoxizitätsanalyse: HEK-293-Zellen werden in Gegenwart von Serum, ohne Medienwechsel, 72 Stunden siRNA/X-tremeGENE siRNA-Reagenskomplexen ausgesetzt. Die Zytotoxizität wird anschließend geprüft, indem die Zellen mit WST-1-Zellproliferationsreagens (Roche) analysiert werden.
Zytotoxizitätsanalyse: HEK-293-Zellen werden in Gegenwart von Serum, ohne Medienwechsel, 72 Stunden siRNA/X-tremeGENE siRNA-Reagenskomplexen ausgesetzt. Die Zytotoxizität wird anschließend geprüft, indem die Zellen mit WST-1-Zellproliferationsreagens (Roche) analysiert werden.
Other Notes
Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.
Legal Information
X-tremeGENE is a trademark of Roche
Lagerklasse
12 - Non Combustible Liquids
wgk
nwg
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does not flash
flash_point_c
does not flash
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